土壤有效磷的测定

土壤有效磷的测定 实验二十六 土壤有效磷的测定 -1(0.5molLNaHCO 浸提—钼锑抗比色法) 3 一、实验目的及说明 土壤中有效磷的含量，随土壤类型、气候、施肥水平、灌溉、耕作栽培等条件的不同而异。通过土壤有效磷的测定，有助于了解近期内土壤供应磷的情况，为合理施用磷肥及提高磷肥利用率提供依据。 土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要是根据土壤的类型和性质测定。浸提剂是否适用，必须通过田间试验来验证。浸提剂的种类很多，近20年各国渐趋于使用少数几种浸提 -1剂，以利于测定结果的比较和交流。我国目前使用最广学的浸提剂是0.5molLNaHCO溶液3注[1](Olsen法)，测定结果与作物反应有良好的相关性，适用于石灰性土壤、中性土壤及酸 -1-1性水稻土。此外还使用0.03molLNHF-0.025molLHCl溶液(Bray?法)为浸提剂，适用4 于酸性土壤和中性土壤。 同一土壤用不同的方法测得的有效磷含量可以有很大差异，即使用同一浸提剂，而浸提时的土液比、温度、时间、振荡方式和强度等条件的变化，对测定结果也会产生很大的影响。所以有效磷含量只是一个相对的指标。只有用同一方法，在严格控制的相同条件下，测得的结果才有相对比较的意义。在报告有效磷测定的结果时，必须同时说明所使用的测定方法。 二、方法原理 石灰性土壤中磷主要以Ca-P(磷酸钙盐)的形态存在。中性土壤Ca-P、Al-P(磷酸铝 -12+盐)、Fe-P(磷酸铁盐)都占有一定的比例。0.5molLNaHCO、(pH8.5)可以抑制Ca的活3 笥，使某些活性更大的与Ca结合的P浸提出来;同时，也可使比较活性的Fe-P和Al-P起水解作用而被浸出。浸出液中磷的浓度很低，须用灵敏的钼蓝比色法测定，其原理详见土壤全磷的测定章节。 当土样含有机质较多时，会使浸出液颜色变深而影响吸光度，或在显色出现浑浊而干扰测定，此时可在浸提排荡后过滤前，向土壤悬液中加入活性碳脱色，或在分光光度计800nm波长处测定以消除干扰。 三、试剂配制 -1 (1)0.5molLNaHCO(pH8.5)浸提剂 42.0gNaHCO(化学纯)溶于约800ml水中，33 稀释至1L，用浓NaOH调节至pH8.5(用pH计测定)，贮于聚乙稀瓶或玻璃瓶中，用塞塞紧。该溶液久置因失去CO而使pH升高，所以如贮存期超过20天，在使用前必须检查并2 校准pH值。 (2)无磷的活性碳粉和滤纸 须做空白试验，证明无磷存在。如含磷较多，须先用 -1-12molLHCl浸泡过液，用水冲洗多次后再用0.5molLNaHCO浸泡过液，在布氏漏斗上抽3-1 滤，用水冲洗几次，最后用蒸馏水淋洗三次，烘干备用。如含磷较少，则直接用0.5molLNaHCO处理。 3 (3)钼锑抗试剂 10.0g钼酸铵[(NH)MoO,4HO](分析纯)溶于300ml约60?的467242 水中，冷却。另取181ml浓HSO(分析纯)慢慢注入约800ml水中，搅匀，冷却。然后将24 稀HSO液入钼酸铵溶液中，随时搅匀，再加入100ml 0.3% (m/v)酒石酸氧锑钾[K(SbO) 24 1CHO,HO]溶液;最后用水稀释至2升，盛于棕色瓶中，此为钼锑贮备液。 44622 临用前(当天)称取0.50g抗坏血酸(分析纯)溶于100ml钼锑贮备液中，此为钼锑抗 试剂，在室温下有效期为24h，在2~8?冰箱中可贮存7天。 -1 (4)磷标准贮备液(Cp = 100mgL) 称取105?烘干2h的KHPO(分析纯)240.4394g溶于200ml水中，加入5ml浓HSO(分析纯)转入1L容量瓶中，用水定容，该24 贮备液可长期保存。 -1-1 (5)磷标准工作液(Cp = 5mgL) 将一定量的磷标准贮备液用0.5molLNaHCO溶3液准确稀释20倍，该标准工作液不宜久存。 四、操作步骤 注[3] 称取风干土样(1mm)2.50g置于干燥的150ml三角瓶中，加入25,1?的液温下， 注[3]于往复振荡机上振荡30,1min，立即用无磷干滤纸过滤到干燥的150ml三角瓶中。如果发现滤液的颜色较深，则应向土壤悬浊液中加入约0.3~0.5g活性碳粉，摇匀后立即过滤。 注[4] 在浸提土样的当天，吸取滤出液10.00ml(含1~25,gp)放入干燥的50ml三角瓶中，加入5.00ml钼锑抗显色剂，慢慢摇动，使CO逸出。再加入10.00ml水，充分摇匀，逐尽2注[5]CO。在室温高于15?处放置30min后，用1cm光径比色杯在660~720nm波长(或红色2注[6]-1滤光片)处测读吸光度，以空白溶液(10.00ml 0.5molLNaHCO溶液代替土壤滤出液，3 同上处理)为参比液，调节分光光度计的零点。 校准曲线或直线回归方程 在测定土样的同时，准确吸取磷标准工作溶液0、1.50、 -12.50、5.00、10.00、15.00、20.00、25.00ml，分别放入50ml容量瓶中，并用0.5molLNaHCO3-1溶液定容。该标准系列溶液中磷的浓度依次为0、0.15、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mgLP。吸取该标准系列溶液各10.00ml同上处理显色，测读系列溶液的吸光度，然后以上述标准系列溶液的磷浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制校准曲线，或计算两个变量的直线回归方程。 五、结果计算 -1(7)+ 土壤有效磷(P)，mgkg = Cp ， 20 -1 式中 Cp——从校准曲一或回归方程求得土壤滤出液中磷的浓度，mgLP 20——浸提时的液土比 -1-1-1 平行测定的允许差测定值< 10mgkgP时允许绝对差值< 0.5mgkg;10~20mgkgP时绝 -1-1对差值为< 1mgkgP;>20mgkgP时允许相对差< 5%。 注释 -1 (1)用0.5molLNaHCO浸提—钼锑抗比色法测定结果的评价标准如下: 3-1土壤有效P(mgkg) < 5 5~10 > 10 土壤有效P供应标准 低(缺磷) 中等(边缘值) 高(不缺磷) (2)温度对测定结果影响较大，据北京地区土样测定结果明，温度每升高1?，磷的含量相对增加约2%，因此统一规定，在25,1?的恒温条件下浸提。 (3)振荡机的振荡频率最好是约180r/min，但150~250r/min的振荡机也可使用。 (4)如果土壤有效磷含量较高，应改为吸取较少量的滤出液(如土壤有效磷在 -1-1-130~60mgkg之间者吸5ml，在60~150mgkg之间者吸2ml)，并用0.5molLNaHCO浸提剂3补足至10.00ml后显色。 (5)当显色液中磷的浓度很低时，可与标准系列显色液一起改用2或3cm光径比色杯测定。 (6)钼锑抗比色法磷显色液在波长为882nm处有一个最大吸收峰，在波长为710~720nm处还有一个略低的吸收峰。因此最好选择波长882nm处进行测定，此时灵敏度高，且浸出液中有机质的黄色也不干扰测定。如所用的分光光度计无882nm波长，则可选在波长为 660~720nm处或用红色滤光片测定，此时浸出液中有机质的颜色干扰较大，需用活性碳粉脱色后再显色。 (7)如果吸取滤出液少于10ml，则测定结果应再乘以稀释倍数(10/吸取滤出液体积，ml)。 作业题 1(土壤中磷的形态有哪几种,有效磷的含义是什么, 2(土壤中磷素的分布特征是什么,南北方土壤中磷的固定因子有何不同, 3(施用磷肥应注意什么问题, 4(用Olsen法测定土壤有效磷有何优点,