近红外漫反射光谱法测定阿奇霉素分散片的含量

近红外漫反射光谱法测定阿奇霉素分散片的含量 近红外漫反射光谱法测定阿奇霉素分散片的含量 作者: 杨欣 贺浪冲 王娜 吴少平 郑旭【摘要】 目的 应用近红外漫反射技术和化学计量 学的方法对阿奇霉素分散片进行定量分析。方法 通过偏最小二乘法建立数学模 型，对预测集进行预测，并对实际样品的含量进行测定。结果 40个样品经内部交叉验证建立预测模型，内部交叉验证确定系数R2=99.86，内部交叉验证的均方差 RMSECV=0.504。用8个样品进行外部验证，预测值与真实值的相关系数达 0.9994。预测值的平均回收率为100.2%(RSD=0.85%，n=8)，方法精密度 RSD=0.89%(n=7)，方法稳定性RSD=0.90%(n=7)。结论 本方法快速简便，结果准确，适用于对模型涉及企业的药品进行快速检查或质量控制。 【关键词】 近红外; 漫反射光谱; 阿奇霉素分散片; 定量分析 ABSTRACT Objective To apply near infrared diffuse reflectance spectrophotometry (NIRDRS) and chemometrics for the quantitative analysis of azithromycin dispersible tablets. Methods Partial least squares (PLS) regression models were set up using a calibration set (40 samples). The validation set was set up by 8 samples. Applying this method to predict the validation set and detect the samples. Results The determination coefficients R2 was 99.86 as indicated from the cross-validation, and the true mean predictive error of Root mean square error of cross validation (RMSECV) was 0.504. The correlation coefficient from validation was 0.9994. The average of the true value and prediction value recovery of the prediction set was 100.2% (RSD=0.85%, n=8). Conclusion NIRDRS method was simple, rapid and accurate. The method could be applied in rapid qualitative and quantitative analysis of drugs of certain manufacturer. KEY WORDS Near infrared; Diffuse reflectance spectrophotometry; Azithromycin dispersible tablets; Quantitative analysis 阿奇霉素是目前临床应用广泛的新一代大环内酯类抗生素，具有广谱抗菌作用，在酸性环境中有较高的稳定性，并具有吸收好、生物利用度高、半衰期长、部分组织及细胞浓度高、能向病灶定向转运、毒性低及耐受性好等优点,1,，在 20世纪90年代被广泛应用，其原料及片剂、胶囊已收载于中国药典2017年版。阿奇霉素的含量测定中国药典采用微生物效价法,2,，美国药典使用高效液相色谱 法,3,。这些方法均耗时较长，预处理方法繁琐，需消耗大量的化学试剂，操作 周期长，难以满足企业实时在线控制的需求。 近红外光谱(near-infrared spectroscopy，NIRS)分析技术是近年来迅速发展和应用的一种绿色分析技术。由于该方法不需对样品进行任何预处理，操作快速简便且无污染，现已被广泛应用于农业、食品、饲料和烟草,4,6,等行业的产品品质分 析，也可应用于药物的定性和定量分析,7，8,。本文采用近红外漫反射技术和偏最小二乘法(PLS)对阿奇霉素分散片进行分析，方法快速简便，结果准确可靠。 1 仪器与试药 1.1 仪器 TENSOR37红外分光光度计(德国BRUKER公司)，AE-240电子分析天平(瑞士Mettller公司)，单冲压片机(上海天和制药机械有限公司)。 1.2 试药 阿奇霉素原料及辅料(西安利君制药有限责任公司提供)，根据处方量准确称取不同比例，配制成浓度范围在29%,73%(相当于标示量的50%,120%)的阿奇 霉素粉末样品，分别混合均匀，用压片机压片，共48份。另10批阿奇霉素分散片，由西安利君制药有限责任公司提供。 2 方法 2.1 基础数据的测定 阿奇霉素分散片以效价法测得的浓度作为理论含量，阿奇霉素自制片以配制浓度作为理论含量。58份样品中，校正集40份(均为阿奇霉素自制片)，另8份(均为阿奇霉素自制片)作为预测样品。以所得校正模型，对10批阿奇霉素分散片(实际样品)进行含量测定，并将其结果与经典效价法的结果进行比较。 2.2 光谱采集 从每份样品中随机取5片，用仪器的漫反射光纤探头压住药片，在12017,4000cm-1间对样品进行扫描，分辨率为8cm-1，扫描次数为64次，每片重复扫描3次，取平均光谱。 3 结果 3.1 近红外漫反射光谱 由图1可以看出，阿奇霉素原料与辅料光谱峰有重叠。 3.2 以校正集样本建立数学模型 以Bruker傅立叶变换近红外光谱仪附带的OPUS软件包对40个校正集样品光谱数据进行偏最小二乘回归，分别采用11种光谱预处理方法，经内部交叉验证，建立校正模型，得到最优回归条件: 回归浓度4200,5000和6000,9000cm-1;光谱预处理: 多元散射校正;主因子数10。内部交叉验证的均方差RMSECV=1: 阿奇霉素分散片; 2: 原料; 3: 辅料 图1 阿奇霉素分散片的近红外光谱图 0.504，确定系数R2=99.86。校正模型见图2。 3.3 外部预测结果 用建立的最佳校正模型，对预测集中的阿奇霉素含量进行预测。预测集结果见表1。 表1近红外测试的预测结果与真值之间建立回归方程 y= 1.0072x-0.473 预测值与真实值的相关系数达0.9994。表明校正模型预测的结果准确，因此可以认为该数学模型可靠。近红外预测值与理论值的对应关系见图3。