超声对红花籽油性质影响及其提取与分离研究（可编辑）

超声对红花籽油性质影响及其提取与分离研究（可编辑） 超声对红花籽油性质影响及其提取与分离研究 分类号: 学校代码: 研究生学号: 密级:秘彩机密、绝密 超声对红花籽油性质影响及其提取与分离研究 专业名称:食品科学 指导教师姓名:胡爱军 。 研究生姓名:冯棋琴 申请学位级别:工学硕士 ,, 、 提交同期:年月 论文课题来源:国家十一五科技支撑项目 学位授予单位:天津科技大学\ ,‘曩, ? ?\一天津科技大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的 研究 成果。除文中特别标注引用的内容外,本论文不包括任何其他个人或集体已经发 表或撰写的成果内容。对本文研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方 式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名: 歹弓虺骂 期:为扣年弓月,同 专利权声明 本人郑重声明:所呈交的论文涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归天津科 技大学所有。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名:馏砖豸 期:叼。年弓月?日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并 向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授 权天津科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 /年解密后适用本授权书。 保密囹请在方框内打“?”,在 本学位论文属于 不保密 请在方框内打“?”。 作者签名: 够 日期:咖年亏月,? 导师签名:气碉 目:弼舞:;其 栅褥 男孚 气 』川一?川 他 ?,摘 要 本研究以红花籽及其油脂为原料,对红花籽油的性质、组分、提取及分离纯 化工 艺进行了研究。 研究内容主要包括四部分,第一部分,参照相应的国家方法,测定红花籽 油 的相关理化指标,并分析不同条件的超声处理对红花籽油理化性质的影响。 试验结果 显示,原料红花籽油的酸值为.士./,过氧化值为.. /, 皂化值为.士. /,其中含有棕榈酸、硬脂酸、油酸、极少量反式油酸、 亚油酸五种脂肪酸;当超声温度控制在?以下,超声功率为~,超声时 问为.时,对红花籽油进行超声波处理,其上述理化性质基本无显著变化, 当超声功率高于时,对红花籽油的酸值和过氧化值影响较显著。 第二部分,采用索氏抽提法测原料红花籽的含油量;分别研究了常规和超声 提取 红花籽油的工艺条件;测定了两种方法制备红花籽油的分子组成;建立提取 动力学模 型,并对模型进行验证。结果表明,原料的含油量为.%;超声提取的较优条件 为:提取溶剂正己烷、温度?、时间、液料比:,超声功率,红花籽 油提取率为.%;常规提取的较优条件为:提取溶剂正己烷、温度?、提取时 间、液料比:,红花籽油得率为.%;上述两种方法制备的红花籽油分子 组成相同,含量无显著差异;超声提取动力学模型为: ‘ ,, 一%’七竹】二罴,常规提取动力学模型为: ? 位一%‘万而,模型经验证与试验结果能很好的相吻合。 第三部分,红花籽油经皂化、酸化、尿素包合法富集制备高纯度的亚油酸。 试验 结果表明,较好的皂化条件为:超声功率,温度?,超声时间,碱用 量%,皂化率为.%;较优的纯化条件为:温度?,尿素溶度./,脲脂 比:;包合时间,红花籽油纯度为.%,得率为.%。 第四部分,红花籽油经甲酯化、柱层析法纯化制备高纯度的亚油酸甲酯。结 果表 明,超声功率,温度?,时间,.甲醇:油:.:,甲酯化 率为.%;洗脱剂乙酸乙酯/石油醚%.%共,上样量./样品. /硅胶,流速 /,上样溶度%%,所得样品纯度.%,得率.%; .%,%, 其他条件保持不变,换为梯度洗脱:洗脱剂乙酸乙酯/石油醚%, %,%各时,所收集样品纯度为.%,得率为.%。. 关键词:红花籽油;超声提取;提取动力学模型;尿素包合;银化硅胶柱层析 善。.? , , , . 耽 : 、 , .. ..士./ /, .士. /; :,, ? : , ; ’?, ~ 哪 一, . ; ;; . . %; ., ,? :, .%: . ?, . “ :, ,? .%;‘. : ,【揣 锄 . 唧锄 缸一%朋万; 删,,, .: ?,, , %, : .%; ,./,?. :; , 、 .%.%. 。 ~? , 弋 , ? 。、 夕 , , .?, ?::.:, %% , .%: / , /// .% .%; %%,: /, , %,.%,%,%,% ,.%. .%, , :卜 ~ 目 录 前言 .红花籽油的概述..。。。.?.”.?。?.。......。?..,。。。.。。...。?...。。。??.。 ..红花籽油的理化性质及组成。一...。?。. .红花籽油的营养保健及医疗作甩 ..红花籽油的应厝。??...?.。 .红花籽油的提取方法 ?:.:?.::??. .亚油酸概述..亚油酸的生理活性。 ..亚油酸的来源.??..:. ..不饱和脂肪酸的分离方法 , ..亚油酸的应用?:? .本论文的研究意义及主要研究内容、创新点...?.:。 与方法??.??.. .实验材料?. .超声处理对红花籽油理化性质的影响。 ..红花籽油化学指标的测定?.,??. ..红花籽油脂肪酸组成分析?.. .红花籽含油量测定??。.. .红花籽油提取工艺的优化??一..不同溶剂对提取的影响? ..液料比对提取的影响..提取时间对提取的影响??. ..超声功率对超声提取的影响..温度对常规浸提的影响?。 ..正交实验:。??.:? ..两种方法提取的红花籽油组分比较.红花籽油提取动力学的研究。 ..动力学模型的建立~ ..动力学模型的验证 .红花籽油混合脂肪酸的制备? ..皂化反应??..?:.. ..酸化反应.亚油酸标准曲线绘制?. .亚油酸得率计算 .脲包法纯化亚油酸..尿素/甲醇溶液浓度对尿素包合亚油酸的影响?. ..脲脂比对尿素包合亚油酸的影响. ..包合时间对尿素包合亚油酸的影响??....?...??....一..正交实验??。 一??...??。 。.一?。?~. .脂肪酸甲酯的制备??。 ........ ..超声功率对甲酯化反应的影响叩? ..超声时闻对甲酯化反应的影响??。~. .. 甲醇与油比对甲酯化反应的影响??。 . .超声温度对甲酯化反应的影响.. ..正交实验?。 .硝酸银一硅胶吸附法纯化亚油酸甲酯??. ..亚油酸甲酯得率计算“..红花籽油脂肪酸甲酯的薄层色谱分析??. ..硝酸银硅胶柱层析法分离纯化红花籽油中亚油酸甲醑 结果与讨论.超声处理对红花籽油理化性质的影响. 。. .红花籽含油率?. .红花籽油提取单因素实验结果??:??.:??。 ..不同溶剂对红花籽油得率的影响 ..液料比对红花籽油得率的影响? ..提取时间对红花籽油得率的影响???? ..功率对超声提取红花籽油得率的影响??....?. ..温度对常规浸提红花籽油得率的影响? 红花籽油提取正交实验结果..常规浸提红花籽油正交实验。:?. .超声提取红花籽油正交实验.两种方法提取的油分子组成比较结果??.. .模型验证结果.. .超声波促进红花籽油皂化反应单因素实验结果?。 ..超声时间对红花籽油皂化反应的影响? ..温度对红花籽油皂化反应的影响?...?. ..超声功率对红花籽油皂化反应的影响?. ..碱用量对红花籽油皂化反应的影响.超声波促进红花籽油皂化反应正交实 验结果??一 .红花籽油超声促进皂化反应与常规皂化反应比较结果?...脲包法纯化亚油 酸单因素实验结果.. ..亚油酸标准曲线 ..尿素/甲醇溶液溶度对尿素包合亚油酸的影响??。??:.. ..脲脂比对尿素包合亚油酸的影响??。一..包合时间对尿素包合亚油酸的影 响?。 .?。。..?。 .脲包法纯化亚油酸正交实验结果??。 .脂肪酸甲酯的制备单因素实验结果。 ..超声功率对甲酯化反应的影响。 ..超声时间对甲酯化反应的影响。 .. .甲醇与油比对甲酯化反应的影响. ..超声温度对甲酯化反应的影响? .脂肪酸甲酯的制备正交实验结果?。 .硝酸银硅胶法纯化亚油酸甲酯条件优化结果..薄层层析展开剂的确定?. ..银化硅胶对亚油酸甲酯静态吸附曲线的绘制? ..银化硅胶对亚油酸甲酯动态吸附曲线的绘制? ..洗脱剂对分离效果的影响 ..流速对分离效果的影响.. ..上样量对分离效果的影响.:??.. ..上样浓度对分离效果的影响?.. ..硝酸银.硅胶柱层析纯化亚油酸甲酯的梯度洗脱结果. 结论., 展望. 参考文献??一攻读硕士学位期间发表论文情况致谢.弋 矗天津科技大学硕::学位论文 前 言 .红花籽油的概述 红花 .,又名桔红花、红兰花、刺红花、草红花、红花缨子 等,为菊花科属一年或越年生的草本植物,双子叶,茎直立,叶互生,植株高因 品种 不同而异,平均株高,高的可达,如图.所示: 图一红花 .. 红花源于南欧及地中海周边国家,主要分布于西班牙、希腊、法国、荷兰、伊朗 和印度,尤以伊朗和西班牙产量最多【】。现在,红花种植遍及世界五大洲多个国家 和地区。我国红花栽培历史悠久,多年前,张骞已将红花从西域引入我国进行栽 培,故我国又叫做西红花。目前,我国约有个省、市、自治区有红花种植,从亚寒 带边缘的黑龙江到热带边缘的广东,从青藏高原到东部的江、浙、闽沿海地区都有。 其中新疆、西臧、云南、河南、四川为主产地【】。 红花对防治冠心病、心肌梗塞和脑血栓等心脑血管疾病有较好疗效。研究表明, 红花中黄色素、腺苷是红花防治心脑血管疾病的主要活性部位或成分【,,,。 红花籽为成熟红花结出的三角状卵形的白色种子,习称“白平子”,医学上又称“血 平子”,如图.所示。李时珍在《本草纲目》中称其“功能与花同”。 图.红花籽. 红花籽含油率一般在%.%,高于大豆,油的碘值.;油中含有大量不 饱和脂肪酸及维生素,其中人体必需脂肪酸哑油酸含量高达?%【引,有“亚油酸之前言 王”之称。二次大战后,红花籽的食用价值才引起人们的注意,开始用作食用 油料。 年,联合国粮农组织正式把红花作为一种油料作物列入生产年鉴的统计项目之内 。世纪年代,由于推广新的、含油量高的优良品种,红花在我国才成为一种 新的油料作物得以发展【。 红花籽油 ,是从红花干燥成熟果实中提取的一种营养价值和经 济价值都很高的食用油,油色草黄至金黄,澄清透明如图一。 一 翻 乜滔 图.红花籽油 . 欧美发达国家普遍选择红花籽油作为日常食用油。红花籽油的脂肪酸组成以油酸 和亚油酸不饱和脂肪酸为主,还含有丰富的维生素等,很容易被人体所吸收,它的 吸收率高达%;它本身不含胆固醇,人们在长时间的食用过程中,可使皮肤得到不 断的滋养,全面补充肌肤营养成分。 ” ..红花籽油的理化性质及组成 油脂的理化特性是对油脂品质的反映,其中比重、折光率是油脂的特征常数,皂 化值高低可以反映油脂熔点高低,还可以反映油脂平均分子量大小,皂化值大小与油 脂平均分子量成反比。碘价可以说明油脂组成中不饱和脂肪酸含量高低和不饱和度大 小【。因此,油脂的理化特性对反映油脂品质高低十分重要,红花籽油的理化常数见 表.: 动 粘稠 。温度低于? 免长时间高温加 热红花籽油。红花籽油的组分如表.: 表红花籽油组分【】 由上表.可知,红花籽油中不仅不饱和脂肪酸含量高达%以上,其维生素含量 也非常丰富,尤其是含量达至/,所以红花籽油除其实用价值外,还可用 作防治脂肪肝、心脑血管疾病,改善微循环,恢复神经功能等的保健药。 ..红花籽油的营养保健及医疗作用 ...保健作用 红花籽油中含有大量的亚油酸,亚油酸在机体内能转化为花生四烯酸。花生四烯前言 酸是人体大脑和视神经发育的重要物质,对提高智力和增强视敏度具有重要作用;花 生四烯酸还具有酯化胆固醇、增加血管弹性、降低血液粘度,调节血细胞功能、预防 心血管疾病、糖尿病和肿瘤等一系列生理活性;高纯度的花生四烯酸是合成前列腺素 ,血栓烷素和白细胞三烯等二十碳 衍生物的直接前体,这些生物活性物质对人体心血管系统及免疫系统具有十分重要的 作用。此外,亚油酸、花生四烯酸等不饱和脂肪酸能促使.脂蛋白的形成以代替脂 蛋白【。 ...药用作用 , 治疗动脉粥样硬化 蔺新英【】等人考察了红花籽油对动脉粥样硬化家兔血脂及脂质过氧化 作用的影响,试验结果表明,能明显降低模型家兔血浆、、?,升高 ,并能降低血浆和肝脏的含量,得到给予模型家兔?的有明显 改善血脂及降低脂质过氧化用的结论。武继彪【 】等人也对红花籽油对鹌鹑实验性动脉 粥样硬化的预防作用进行了研究,结果表明,高剂量的红花籽油在试验第周时能明 显升高鹌鹑血清.,降低及/比值。 调节血脂 夏勇【】等人研究了西红花籽油对实验性高脂血症大鼠脂质代谢的影响,采用高血 脂模型法进行研究。结果表明,./、./体重剂量组均能明显降低高脂血 症大鼠血清胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量,./体重剂量组 能明显降低高脂血症大鼠血清甘油旨含量、肝体比和致动脉粥样硬化指数。 说明西红花籽油具有调节血脂的作用。 抗炎作用 王仁媛【】分别通过小鼠耳廓肿胀实验和足趾肿胀实验观察红花籽油的抗炎功效, 结果显示,红花籽油能明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,明显抑制蛋清导致的大 鼠足爪肿胀。说明,红花籽油具有明显的抗炎作用。 ..红花籽油的应用 ...在食品中的应用 红花籽油是已知植物油中含亚油酸最高的油脂,还含有肛胡萝卜素、黄酮类物质 等功能性成分,因此是一种功能性营养保健油。它与普通植物油类?样,可用于?拌 和热食。热食用有多种途径,煎、炒、炸、烤等,但需将温度和时间分别控制在 和以内。此外,红花籽油可通过浓缩加工制成人造奶油、起酥油、色拉油等多种食 用品和食品添加剂,可配制多种调味品,如。调味酱汁、色拉调料、冻甜点心、加脂 牛奶、仿制奶、仿酸奶、仿干蛋等。由于红花籽油具有较高的抗冻性,色味稳定,颜 色清亮等优越的理化特性,使得它在食品加工中还有许多用途,如可以使食品在较宽 的温度幅度下保持成型。 ...在医药中的应用 天津科技人学硕上学位论文 红花籽油除了含有高达%%左右的亚油酸外还含有丰富的维生素、磷脂、 和甾醇类等。亚油酸具有重要的医疗价值是公认的唯一的必需脂肪酸。亚油酸对人体 的功效主要表现在:软化心脑血管、促进血液循环、降脂降压、促进新陈代谢、调节 内分泌和减缓衰老等【,,】。加上红花籽油酸值低、粘度小、脂肪 酸凝点低、油色浅、清亮澄明,可作为药用注射油;此外,红花籽油还广泛用作抗氧 化剂和维生素、维生素的稳定剂;红花籽油还可制备亚油酸与亚油酸乙酯。红花 籽油中的亚油酸以及由它制备的亚油酸乙酯都有重要的医疗价值。两者医疗 效果相 同,只是亚油酸乙酯口感好,可以口服或制成滴剂。利用红花油制成亚油酸或乙酯, 扩大了药用和保健食品亚油酸及其乙酯原料来源。 ...在畜牧业上的应用 据国外有关报道,对奶牛喂以红花籽油和经过甲醛处理酪蛋白防止瘤胃氢 化作用的饲料,其牛奶中奶油含量增加约.%单位,奶油中亚油酸含量增加倍,而 其中的胆固醇却没有增加,可见,将红花籽油添加到奶牛饲料中可以增加牛奶中亚油 酸含量,还能增加牛奶中得脂肪含量【。绳贺军【】等人以只体况良好并处于泌 乳高峰期..的经产西农萨能奶山羊为对象,在饲料中分别添加不同水 平的红花籽油、共轭亚油酸,考查乳中脂肪酸组成的变化情况,实验结果表明,添加 红花籽油对乳脂中饱和脂肪酸的合成无显著影响,其中饱和脂肪酸的含量随添加水平 提高呈下降趋势,不饱和脂肪酸的含量却显著增加。 .王宝维【等人选用只周龄健康的罗曼蛋鸡,研究日粮中添加不同含量 的红花籽油对蛋黄中不饱和脂肪酸组成及胆固醇含量的影响。试验结果表明,在喂养 天后,日粮中添加%红花籽油喂养的鸡,蛋黄中亚油酸含量为.%,是对照组 的.倍;蛋黄和血清中胆固醇含量分别是.士./和.:./,比 对照组分别降低. %和.%. . ..红花籽油的提取方法 ..传统提取方法 红花籽油的传统提取工艺主要有压榨法和浸提法两种。 压榨法【 压榨法提油是一种古老的提油法,借助机械外力的作用,将分布于料胚细胞内的 油脂挤压出来的方法。按照提油设备来分,压榨法提油有液压机榨油和螺旋机榨油两 种,液压榨油机又可以分为立式和卧式两类,目前广泛使用的是立式液压榨油机。 压榨法的优点是操作工艺操作简单,生产设备投资低,易维修,产品无化学物质 污染,容易分离对小型企业或个体较为合适;缺点是出油率低,饼渣中残油量高, 对原料浪费严重,劳动强度大、动力消耗较大、成本高,且在榨油过程中有烘炒、蒸 胚等高温工序,由于功能性油脂比较热敏,在加工过程中受到高温影响时,容易产生 一些有害物质,在储存过程中也易受到氧的攻击而加速氧化。此外,高温会使 蛋白质 ’ 变性,使提油后的饼粕不能有效利用而造成浪费。 前言 浸提法【 浸提法提油过程实际上就是利用正己烷、二氯甲烷、乙醇、石油醚等能够溶解油 脂的有机溶剂通过润湿渗透、分子扩散等作用将油脂从料坯中提取出来,也称之为溶 剂提取法。它是从植物原料中提取油脂最常用的一种方法。 浸提法的优点是出油率高,粕中残油率低,油脂中有效成分不被破坏,劳动强度 低,生产效率高,容易实现大规模和自动化生产,所得粕中蛋白质变性程度小,质量 较好,可用于深加工;其缺点为浸提出来的毛油含非油物质较多,色泽较深,质量较 差,还需进一步精炼,浸出毛油中有机溶剂残留,且浸出所用溶剂易燃易爆,有一定 毒性,因而生产的安全性较差。 ...超声提取方法 超声波是指频率为一左右的电磁波,它是一种不引起听觉的弹性波。 它在介质中的振荡形式主要有横向振荡横波和纵向振荡纵波两种。超声波的 传播遵循声波传播的基本规律,但也有一些突出的特点:超声波频率可以很高,因 、 而传播的方向性较强,设备的几何尺寸较小;超声波传播过程中介质质点振动加速 度非常大;在液体介质中,当超声波的强度达到一定值后会产生空化现象【。许多 实验结果表明:超声波不仅可以改善反应条件,加快反应速度和提高反应产率【。目 前,超声波已广泛应用于医学【、食品工业【 砥,、工业焊接、废水处理】、和 化学如分析化学、电化学、光化学、物理化学、环境化学.伽等方面。 超声原理 现在普遍认为空化效应、热效应和机械作用是超声波技术在植物功能成分提取中 的三大理论依据‘】。 ?空化效应超声波对提取分离的强化作用主要来源于空化效应。由超声波发生 器发出的高频振荡信号,通过换能器转换成高频机械振荡而传播到介质中,超声波在 介质中疏密相间的向前辐射。在超声波纵向传播的负压区,介质分子间距离超过保持 介质液体作用的临界分子间距,就会形成空穴使液体流动而产生数以万计的微小空化 泡。但是在相继而来的超声波正压区内,这些空穴又将被压缩,其结果是在这些空化 泡内外产生了极高的瞬间压力差。当瞬间压力差超个大气压时,这些空化泡将 完全崩溃;而那些由于内外瞬间压力差较小不足以引崩溃的空化泡将进入持续振荡, 这就是超声波的空化作用【镐,,】。 空化现象包括气泡的形成、成长和崩溃过程,它能引起湍动效应、聚能效应、微 扰效应及界面效应。其中湍动效应使边界层减薄,增大传质速率;微扰效应强化了微 孔扩散;界面效应增大了传质表面积;聚能效应活化了分离物质分子。在超声作用下, 空化泡在瞬间迅速涨大并破裂,破裂时把吸收的声场能量在极短的时问和极小的空间 内释放出来,形成高温和高压的坏境,同时伴随有强大的冲击波和微声流,从而破坏 细胞壁结构,使其在瞬间破裂,植物细胞内的有效成分得以充分释放【】。 由此可见,空化现象是超声化学的主要动力,使粒子的运动速度加快,破坏粒子 天津科技大学硕:卜学位论文 的力的形成,使许多物理化学和化学过程急剧加速,对分散、提取等过程有很大的促 进作用。对植物样品提取而言,空化效应有利于加速待测物中有效成分进入溶剂,缩 短体系到达平衡的时间【’,,弱】。 ?热效应超声波是一种机械波,在介质内传播过程中会引起介质粒子的剧烈机 械振动,这种振动导致了介质粒子间相互碰撞摩擦,超声波的能量就会不断地被介质 吸收转变为热能从而使其自身温度升高。 当振动频率固定,超声波的强度愈大,产生的热作用愈强。因此,控制超声强度, 可使植物组织内部的温度瞬间升高,加速有效成分的扩散速度,改变目标物质在固一 液两相中的分配常数】。 ?机械效应超声波是机械振动能量的传播,可在液体中形成有效的搅动与流动, 破坏介质的结构,粉碎液体中的颗粒,能达到普通低频机械搅动达不到的效果。超声 波的机械作用主要是辐射压强和超声压强引起的。辐射压强可能引起两种效应:其一 是简单的骚动效应;其二是在溶剂和固体之间出现摩擦。这种运动可以使样品组织表 面变形。超声压强将给予溶剂和样品固体以不同的加速度,使溶剂分子运动的速度远 大于样品固体的速度,在它们之间产生摩擦,这种能量相当大,甚至能打开两个碳原 子之间的化学键,导致大分子物质分解或解聚晔。 当超声波在连续介质中传播时,根据惠更斯波动原理,在其传播的波阵面上将引 起介质质点的运动,使介质质点运动获得巨大的加速度和动能。质点的加速度经计算 一般可达重力加速度的倍以上。在油脂的提取中,由于介质质点将超声波能量作 用于油脂的质点上而使之获得巨大的加速度和动能,迅速逸出油脂基体而游离于介质 中的。此外,超声波的机械作用还能使样品介质内各点受力一致,使提取更均匀。 除上述原理外,超声波还具有聚集作用,能使悬浮于气体或液体中的微粒聚集成 较大颗粒而沉淀,凝聚作用对提高得率和缩短提取时、日均起重要作用。凝聚作用与超 声作用时间、强度、频率有关。频率一定时,声强高时,可在较短的时问取得 好的凝 聚效果。超声凝聚还与粒子的大小、性质和浓度有关。 超声特点【,,,】 在油脂提取中,与压榨和浸出工艺相比,超声波提取具有如下突出特点: ?提取效率高,如『所述超声波的主动力空化效应和机械效应及刺激效应使其对 欲提成分具有较高的提取效率。 ?性质稳定,超声波破碎过程是一个物理过程,浸提过程中无化学反应,被浸提 的生物活性物质的结构和性质在短时间内保持不变,生物活性不减。 ?节省时间,超色提取时间一般不超过,通常回流和煎煮提取时问大于, 浸渍和渗透提取时间更长。 ?提取温度低,超声所需提取温度较低,一般远低于。,而煎煮、回流其提 取温度接近。所以超声提取避免了长时间加热对有效成分的破坏。同时超声波 是瞬问稳定升高温度,对热不稳定成分影响较小,适用于对热敏物质的提取。 ?溶剂用量少,节省溶剂。 前言 ?节约能源,超声波提取的能耗较常规提取法降低%以上。 ?提取产品质量高,由于提取温度低,最大限度保持了物料中原有的各种有效成 分。同时,由于提取时间使提取产品中其它无用的杂组份含量减少,提高了提 取产品 品质,为后续分离纯化过程奠定了良好基础。 ?自动化程度高,操作简便。超声提取时间、提取温度、循环速度等主要参数均 可设定和自动控制,减少了人为因素对产品质量的影响,有利于保证产品质量。 ?适用范围广,超声提取同时适用于挥发性或非挥发性提取介质。 超声波反应器 . 目前常见的超声波发生器可分为以下几种: ?液哨式超声波反应器 液哨式超声波反应器又分气动式和液动式,是利用机械法产生功率超声,作用原 理分别是将空气流和液体流的机械能转变为声波振动,主要用于乳化和均化处理。图 是连续乳化器简图。 .小孔.调节嚣.簧片.共振晷 \ 一 图哨液乳化机. . ?超声清洗槽式反应器 超声波清洗机可分为分体式即发生器与水槽、换能器分开,如图.和整体式即 发生器与水槽、换能器为一体,不锈钢水槽底部有若干固定在底部的换能器,如图.?。天津科技人学硕学位论文 潦冼槽 承 , 一 月芦抉稚墨 图.分体式超声清洗器 图整体式超声清洗器. . 超声波清洗机的主要优点是设备造价低廉,易于控制温度,不会因空化腐蚀而造 成对反应液体的污染。目前广泛应用于各种实验仪器、机械精密零件、医疗器械等的 清洗。 ?声变幅杆浸入式反应器 此设备的特点是把发生超声波的“探头”直接浸入反应液体中,由换能器发出的超 声波,经过变幅杆的发射端面直接辐射到反应液体中,变幅杆端面的质点振动幅度或 声强,由改变输入换能器的电功率来控制,如图.。声强控制办法有:调功率和调 换变幅杆。 发生器 图声变幅杆浸入式反应器. 声变幅杆浸入式反应器的优点是可获得较高的声强;缺点是反应液体的温度 难于 控制,探头表面受空化腐蚀可能造成对反应液体的污染。常用于实验室研究 提取和化 学反应。 ?杯式反应器 前言 杯式反应器是将变幅杆式与清洗槽式相结合,如图.。其优点是声强可调,反 应温度可以控制,不会对反应溶液产生污染;其缺点是发射的声强没有探头 浸入式强, 反应容器的大小受到一定的限制。 溢出口 杯 冷却剂出 冷却剂入口 幅杆 图杯式反应器 . .亚油酸概述 ..亚油酸的生理活性 亚油酸 ,属于多不饱和脂肪酸中的.系歹,是人体不能自行 合成的必需脂肪酸,系统名为十八碳.,.烯酸顺,顺。其化学结构式为 ,相对分子量.。其结构式如图。 图亚油酸结构式. . 由于其分子结构中含有两个不饱和双键,因此具有特殊的生理活性和化学活性, 如:能降低胆固醇,亚油酸主要是与胆固醇结合成酯然后降解为胆酸排出体具有特殊 的生理活性和化学活性:外的生理过程中降低血浆中胆固醇浓度,进而降低冠心病的 发病率。亚油酸摄入量与血浆胆固醇水平负相关。膳食脂肪酸影响血浆胆固醇浓度的 预测方程如下图所示: . .. . 其中?一血浆胆固醇浓度的变化/ 天津科技大学硕士学位论文 ?和??分别表示有饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸所提供的能量百分数的 变化 ?膳食胆固醇含量的变化/ 由此,我们可以看出饱和脂肪酸升高血胆固醇,亚油酸等不饱和脂肪酸可以有效 降低血胆固醇【。 此外,临床试验表明,亚油酸还能和血液中的胆固醇结合,生成熔点很低的酯, 易于乳化、输送和代谢,不易在血管壁上沉积,具有预防动脉硬化、高胆固醇血症和 高血脂症的作用,是维护细胞柔性、强性和活动的重要物质。 亚油酸在体内能够代谢为花生四烯酸,进一步氧化为二十烷类,如白三烯、血栓 烷等,这些都是炎症的有效介质,对炎症以及免疫调节具有重要作用如调整免疫调节 细胞因子的分泌等。因此,亚油酸的缺乏会导致细胞免疫功能减弱。花生四烯酸除了 是构成类二十烷酸前体外,还是神经组织和脑组织中占有绝对优势构成的多不饱和脂 肪酸,能够影响胎儿和婴儿的智力和认知能力的发育,具有促进生长发育的功能,还能 影响神经系统以及视网膜,在舒张血管、影响免疫调节等多方面发挥重要作用。 此外,亚油酸还具有抗辐射、降低胆固醇和预防动脉硬化、促进生长发育、增强 机体免疫力以及美容美发等多种生理功能;还是代谢过程中有重要作用的激素类物质 前列腺素的前体,人体缺乏亚油酸会导致皮肤变红并增加脱水和感染的敏感性。婴幼 儿亚油酸缺乏会导致发育障碍。由于按照日常食用油的用量,不容易达到亚油酸每日 摄入量要求,因此,市场上有很多企业开发或者生产了高亚油酸含量的食用油。 ..亚油酸的来源 亚油酸是人体必需的脂肪酸,是维持生命的重要物质,但人体内不能合成,必须 从食物中摄取,亚油酸是最常见的天然油脂的二烯酸,普遍存在于半干性与干性种子 油中,在我们日常的食用油中其含量都在%以上,其中一些含量较高如红花籽油、 大豆油、棉籽油、菜籽油、花生油、米糠油、芝麻油等。常见油脂中亚油酸含量见下 表.。 表常见油脂亚油酸含量%【孔, 前言 ..不饱和脂肪酸的分离方法 目前,用于分离纯化亚油酸的常方法有: 低温结晶法; 超临界 法; 分子蒸馏法; 吸附分离法; 尿素包合法等。 ...低温结晶法 低温结晶法又称溶剂分级分离法,该方法是利用低温下不同的脂肪酸或脂肪酸盐 在有机溶剂中溶解度不同来进行分离纯化。一般来说在低温下,脂肪酸在有机溶剂中 的溶解度随碳链长度的增加而减小,随双键数的增加而增加,且温度越低,这种差异 越明显。所以可以通过将混合脂肪酸溶于有机溶剂,经降温、过滤除去其中大量的饱 和脂肪酸和部分单不饱和脂肪酸获得所需的多不饱和脂肪酸。据其它文献报道【豁】和白 引矧等人的研究表明,当高于?时,富集含两个或两个以上烯键的脂肪酸的效果 不明显,采用低温结晶法从鱼油中分离和,当温度为粕?、液料比为: 时,的含量从.%提高到.%;当温度为.?、液料比为:时,增 加幅度最大,含量达至.%;当温度为.?、液料比为:时,含量也只有.%。 可见,低温结晶法虽然工艺原理简单,操作简便,对多不饱和脂肪酸的分离较为温和、 产品不易发生氧化,但会耗费大量溶剂,常采用的有机溶剂主要有丙烷、甲醇、乙醇、 丙酮、乙醚和石油醚等,分离效率不高,一般与其他方法结合使用。 ...超临界法 超临界流体萃取是近几年发展起来的一种新的分离技术,它的基本原理是通 过调 节温度和压力使原料各组分在超临界流体中的溶解度发生大幅度变化而达到分离的 目的。超临界流体萃取常选用二氧化碳等临界温度低且化学惰性物质为萃取剂,它的 密度与液体相近,粘度与气体相近,而扩散系数却要比液体大倍,从而能使提取 效率大大提高。与其他方法相比,超临界流体萃取特别适用于不饱和脂肪酸等热敏物 质和易氧化物质的分离【。】等测定了不同温度和压力下多种脂肪酸酯在超临 界中的溶解度。实验发现,各种脂肪酸的溶解度随着密度的增加而增加,但 在相同条件下,短链脂肪酸酯的溶解度比长链脂肪酸酯的溶解度大,相同碳链长度脂 肪酸酯的溶解度随双键数的增加而减小,但这种变化不明显。研究表明,利用超临界 流体萃取可有效分离链长差别较大的脂肪酸,但若将碳链长度相近的脂肪酸分开,还 必须结合其他分离技术。 ...分子蒸馏法 分子蒸馏法是一种特种的蒸馏方法,其分离原理是利用混合物中不同组分的分子 在极高的真空条件下具有不同的运动平均自由程而得以分离。该法使用的绝对压强一 般为.一.。在这种压强下,脂肪酸分子问引力减小,分子运动的平均自由 程相对较大,与常规蒸馏相比,其蒸馏温度大大降低,可以有效防止不饱和脂肪酸受 热氧化分解。分子蒸馏过程中,饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸首先蒸出,而双键较多 的多不饱和脂肪酸最后蒸出。 分子蒸馏法的优点在于蒸馏温度较低,受热时间短,生产的产品色、臭指标较好, 天津科技大学硕士学位论文 缺点是需要高真空设备,能耗较高。对于高附加值的产品还是较经济可行的。任艳奎 【】等利用分子蒸馏对玫瑰精油的提纯进行了研究,结果显示,经过两级分离可将原料 中的低沸点和高沸点杂质脱除,所得产品玫瑰油的含量可以达到%以上,目的产物 中主要组分的含量?%,总收率高于%;徐世民等用分子蒸馏法富集海狗油中的 多不饱和脂肪酸,进料速率/,预热温度?,刮膜器转速/,蒸馏温度 ,压力时,经过一级分子蒸馏,得到和总含量为.%的海狗洫 产品,收率为.%,而且产品外观、色泽均很好,可与国外同类产品媲美。傅红 明 等也研究了多级分子蒸馏法制取鱼油中多不饱和脂肪酸的工艺,蒸馏温度?以上, 蒸馏压力以下时,经过三级串联分子蒸馏,得到高碳链不饱和脂肪酸占.%的 鱼油产品。 ...尿素包合法 . 尿素包合法是一种在工业上比较常用的多价不饱和脂肪酸分离方法。该方法的主 要原理是尿素可以与含有个以上碳原子的直链化合物如脂肪酸形成结晶型的包 化合物,尿素本身是一个四面体的结晶,当它与脂肪酸形成包合物时,由四面体转化 为六面体,如图.所示。 一 图尿素包合物六面体结构 .? 图?中上部分为六面体的横切面,尿素分子以螺旋状的方式构成包合物框架, 小于尿素框架的自由空间的脂肪族化合物就被包合在该框架内,反之则不能被包合, 包合物与尿素之间通过范德华力结合在一起,范德华力越大,包合物越稳定,在冷冻 条件下容易析出结晶。通常,饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸直径小于尿素框 架的自由 空间能够与尿素分子形成较稳定的晶体包合物析出,而多不饱和脂肪酸由于双键较 多,碳链弯曲,具有一定的空间构型,体积较大,不被尿素包合,而且不饱和度越高, 愈难与尿素络合。之后采用过滤方法除去饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸与尿素形成稳 定的包合物,就可得到较高纯度的多不饱和脂肪酸【。 赵文斌等利用尿素包合法富集红花籽油中的不饱和脂肪酸,试验结果表明, 脲包法能大幅度提高多不饱和脂肪酸含量,在酯脲比为:.:的条件下,红花籽油中 前言 不饱和脂肪酸的含量由.%提高到.%。顾小红【恻等研究了尿素/肪酸的质量 比、结晶时间和结晶温度三因素对尿素包合法富集海狗油中多不饱和脂肪酸效果的影 响。通过实验得到适宜的尿素包合条件为:尿素/脂肪酸的质量比:;结晶时间; 结晶温度,在此条件下不饱和脂肪酸中、和的总含量可从.%提高 至.%,富集得率为.%。李明脱等也研究了用尿素包合法纯化红花籽油中的 亚油酸的工艺。重点考察了溶液中尿素浓度尿素/甲醇、混合脂肪酸/尿素甲醇溶液甩 量、包合温度和包合时问对富集效率的影响。结果表明,当尿素/甲醇的浓度 为/、 混合脂肪酸/尿素甲醇溶液用量为.,在.?的条件下保存后,所得产品中亚油 酸纯度可以提高到.%,产品回收率可以达到.%。此外,崔凯【:’和肖红卫【叫 等人也分别采用尿素包合法从苏子油、橡胶籽油及红花籽油中富集不饱和脂肪酸。 尿素包合法是一种简便有效的方法,它的优点是成本低,设备简单,试剂便宜, 操作简便;整个分离过程均在低温下进行,能比较完全的保留其营养和生理活性,因 此,普遍应用于富含的热敏性油脂的处理,且非常适合大规模的生产,已有工 业应用。 ...吸附分离法 吸附分离法是目前获取高纯度多不饱和脂肪酸的一种常用方法,利用不同饱和度 的脂肪酸在吸附剂上的分配系数不同而得到分离。吸附分离法具有设备简单、易操作、 分离效果好、产品纯度高等优点【。年,与嬲【唧首先研究了烯 烃与银离子的络合现象,发现烯烃在水中溶解度很小,当有银盐存在时,溶解度就明 显加大。年,一傩】较好地解释了这一现象,他认为烯烃中的双键. 与银离子发生电子转移形成了络合键,包括由烯烃充满的?轨道和银离子的空轨道 重叠形成的键图.,和烯烃的空反键冗轨道和由银离子充满的轨道形成的?键 图.。 / ~~ ~~ / 图.烯烃双键.银离子间的。络合键 图.烯烃双键.银离子闻的耳络合键%‘ .?膏 . 、 . 根据的设想和通过拉曼光谱和核磁共振谱实验表明,烯烃与银离子形 成的络合物不会引起双键的很大变化,因此采用银离子吸附法分离脂肪酸时,形成的 络合物不会引起常见脂肪酸的分子结构的变化。 此后,人们在利用双键与银离子的络合作用分离饱和与不饱和化合物方面做了大天津科技大学硕士学位论文 量的研究。例如采用硝酸银.硅胶薄板分离不饱和脂肪酸以及硝酸银一硅胶柱层析法分 离不饱和脂肪酸等吸附分离法就常有报导。 采用硝酸银吸附法对甘油三 酯进行了分析研究;李和等人利用硝酸银.硅胶制备薄板与离心薄板法,从茶油和 菜籽油的混合脂肪酸的甲酯中,分离出油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯和芥酸甲 酯四种不饱和脂肪酸甲酯,其纯度分别为.%、.%、.%和.%,可 供气相色谱、高效液相色谱分析的标准样品使用。张汆【】等人采用银化硅胶柱层析 法,对花椒籽油中.亚麻酸进行了分离纯化,实验结果表明,实验结果表明,硝酸银 一硅胶柱层析法能有效地将花椒籽油中的.亚麻酸分离出来,最高纯度可达%;洳 亚麻酸的回收率也很高,可达到%以上。 ..亚油酸的应用 亚油酸具有特殊的生理活性,可广泛应用于食品、医药、化妆品、饲料等领域。 ...食品中的应用 亚油酸是人体不能自身合成的脂肪酸,必须从饮食中摄取,当人体缺少不饱和脂 肪酸时会引起肝脏代谢紊乱,血液浓度增稠,导致血液流动不畅,严重时引起血管堵 塞,胆固醇堆积,而使血管壁逐渐失去弹性,直至硬化。进而引起一系列心脑血管疾 病,如高血压、脑溢血、心脏病、心脑血稠、偏瘫、中风等。 大量的实验研究【, ’’‘表明食用足量的亚油酸具有软化心脑血管、 促进血液循环、降脂降压、促进新陈代谢、调节内分泌和减缓衰老等功效,因此,被 誉为“血管清道夫”。 在食品中,亚油酸主要用作食品添加剂或者营养强化剂制成功能性食品,人们长 期食用可改善饮食结构,增强人体机能。国内外一些食品公司已经研制和生产了添加 亚油酸的食品,如将亚油酸添加到食用油、奶制品、肉制品、面包等食物中。 ...医药中的应用 二十世纪年代,人们就发现亚油酸与人体平滑肌的收缩、脂类代谢中酶的活 性、中枢神经系统的活力、脉搏与血压的调整、类固醇激素的生理功能、前列腺素的 合成及其它生命机能有着密切关系。到二十世纪年代后期,人们又发现亚油酸在 治疗心血管疾病、抗癌以及促进大脑发育、调节植物神经等方面功效显著【?,?。 以亚油酸为主要原料生产的益寿宁、脉通、复方三维亚油酸胶丸等药物具有较高的疗 效,能防止动脉硬化、降低胆固醇,且副作用小。 共轭亚油酸简称是亚油酸的同分异构体,可以亚 油酸或富含亚油酸的植物油为底物,通过碱催化的异构化反应合成共轭亚油 酸。直到 上个世纪的后期,人们才发现了共轭亚油酸的重要生理功能,如具有抗肿瘤、抗氧化、 抗动脉粥样硬化、提高免疫力、提高骨骼密度、防治糖尿病等多种重要生理功能;还 能降低动物和人体胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇等,还可以降低动物和人 体脂肪、增加肌肉。我国国家海洋局第一海洋研究所从年就开始进行了的 研究与开发,目前已开发了大量共轭亚油酸系列产品如:乙脂型共轭亚油酸,共轭亚, 前言 油酸钙钙食品共轭亚油酸锌、共轭亚油酸微囊等。这些产品已出口到美国、加拿 大、巴西、澳大利亚以及西欧等诸多国家。 用亚油酸衍生物可制得磷脂的磷脂络合物,这种磷脂络合物无毒、无刺激 性,可使皮肤和头发光滑而无油腻感,有助于皮肤保持水分。还用于生产洗涤液和护 肤品,睫毛油、防晒霜以及护发品.并且还有灭菌作用,可用于生产有医疗作用的个 人卫生用品。高级化妆品中加入亚油酸。可美容护肤,以内养外,标本兼澍”。 ’ .本论文的研究意义及主要研究内容、创新点 目前,世界人均年消费食用植物油,发达国家,我国仅为, 在发展中国家也只是中低水平,全国油脂市场潜力十分巨大。而大宗油料已趋于饱和, 像红花籽油、茶籽油、橄榄油等高档营养油比较紧缺,还未能形成大规模工业化生产, 因此需要大力发展高档油加工业。 随着生活水平的提高,国内外对食用油脂的分类与级别要求也逐步提高。我国食 用油正由实用型向营养保健型转化,代谢和营养是当今国际油脂界研究的热门课题。 如上所述,红花籽油富含亚油酸、维生素和黄酮类物质,研究结果璩’】显示,长 期食用红花籽油,可以稳定血压,增强体质,促进微循环,间接恢复神经功能,降低 胆固醇,可预防心血管的发病率,特别对高血压、高血脂、动脉硬化、老年肥胖症等 防治极有利。因此,红花籽油是一种高营养的保健油。经过深加工,提高油品品质, 能满足当代油脂消费趋势,具有巨大的潜在市场。 然而,过去因为我国产的红花籽出油低,新疆红花耔主要是用作饲料,每年出口 量可达四千吨,当时每吨售价仅为元/吨。直到近年我国新疆红花籽才用于榨 油,而河南、四川、湖南、浙江、安徽、江苏等省的红花主要还是作药用,使得红花 籽有过剩积压现象。但市场上销售的食用红花籽油仍很少,价格昂贵,达到几十元/ 斤,很难在人们的生活中普及,其深加工产品更是不多见。因此,迫切需要新的技术 来提高得率、缩短提取时间,以降低红花籽油的生产成本。 本文采用超声强化法提取红花籽油。通过单因素和正交实验优化工艺参数。同时, 以扩散第一定律为基础,根据传质过程中的边界层理论,建立提取动力学方程, 为红花籽油的提取提供理论指导。然后将超声提取所得到的油及其甲酯分别采用尿素 、 包合法和硝酸银硅胶柱层析法进行分离精制,探索分离的最佳工艺条件以指导红花籽 . 油的精制,得到产品可直接用作保健产品或作保健产品原料,充分发挥这种保健油的 价值。 本选题将超声技术和尿素包合技术、硝酸银硅胶柱层析法应用于红花籽油的提取 和精制,可促进红花籽资源的开发和利用。我国有两大红花生产基地,分别是西藏的 藏红花和新疆的西红花,开发、利用红花籽,可增加新油种,充分利用大西北的丰富 物产,繁荣边疆的经济。因此,本研究具有一定的理论和现实意义。 本文的主要研究内容: 以酸值、过氧化值、皂化值、脂肪酸组成为评价指标,研究不同条件的超 天津科技大学硕士学位论文 声波处理对红花籽油理化性质的影响。 将超声技术应用于红花籽油的提取:考察不同超声功率、超声时间、溶剂、 料液比对油得率的影响,在单因素的基础上进行正交试验,优化超声提取工艺参数, 并与常规浸提法作比较。 建立提取动力学方程:在扩散第一定律基础上,结合超声场对固液扩 散的影响,建立超声强化提取和常规浸提红花籽油的动力学方程,并作比较。再利用 上述最佳提取工艺条件进行模型验证。 红花籽油的分离:分别采用尿素包合法分离纯化亚油酸,硝酸银硅胶柱层 析法分离纯化亚油酸甲酯,分析确定分离最佳条件及产品纯度。 本文的创新点: 研究了超声作用对红花籽油理化性质及分子组成的影响,从所查阅文献看, 目前还未见有相关内容的报导。 本文采用超声波辅助提取红花籽油代替常规提取,并建立了提取动力学模 型。实验结果表明,超声波提取红花籽油是一种高效的提取手段。从查阅文 献看,目 前也未见有相关文献报导。 本文研究了超声处理对红花籽油皂化和甲酯化反应的影响,从查阅文献看, 目前未见有相关文献报导。 薄层层析板硝酸银.硅胶为%时,以%的乙酸乙酯.石油醚或乙酸乙酯/ 石油醚/冰醋酸//为展开剂分离红花籽油中的脂肪酸包括饱和脂肪酸、单不 饱和脂肪酸、亚油酸,能较好的将其中三类不同饱和度的脂肪酸分离开,与所 查阅 文献中的洗脱剂不同。 材料与方法 材料与方法 .实验材料 表实验原料与试剂 】【丽删锄 天津科技大学硕士学位论文 表实验设备 名称 生产厂家 电热恒温水浴锅 北京市永光明医疗仪器厂 电子天平 北京赛多利斯仪器系统有限公司 电冰箱 安徽美菱集团 旋转蒸发器. 上海亚荣生化仪器厂 超声波细胞粉碎机 宁波新芝生物科技股份有限公司 气相色谱.质谱联用仪 美国瓦里安技术有限公司 气相色谱仪 电热鼓风干燥箱 天津市天宇实验仪器有限公司 索式抽提器 天津市北方天医玻璃仪器制造厂 层析柱.× 上海沪西分析仪器厂 型数控超声清洗机 昆山市超声仪器有限公司 循环水式多用真空泵 郑州长城科贸有限公司 标准分样筛 振兴筛具厂 微型植物粉碎机 天津市泰斯特仪器有限公司 微量高速离心机 湖南湘仪实验室仪器开发有限公司 ‘ 酸式滴定管 天津市北方天医玻璃仪器制造厂 碱式滴定管 天津市北方天医玻璃仪器制造厂 .水浴恒温振荡器 金坛市金南仪器制造有限公司 一次性滤器. 上海君创生物科技有限公司 .超声处理对红花籽油理化性质的影响 油脂的过氧化值和酸值是表征油脂中过氧化物和游离脂肪酸含量的主要指标。游 离脂肪酸和过氧化物是油脂发生水解和氧化酸败变质反应的主要产物。油脂的过氧化 值越大,酸值越高,说明其中所含的过氧化物和游离的脂肪酸的含量越多,油脂发生 变质的程度越显著【‘,。 本实验以市购的红花籽油为原料,考察不同条件的超声波处理对红花籽油酸值、 过氧化值、皂化值及其脂肪酸组成的影响,为超声波技术在红花籽油中的应用提供必 要的科学依据。 超声条件:超声波电功率分别为、、、、、、 、;超声时间分别为、、、、;温度控制在 以下。分别对处理后油样的酸值、过氧化值、皂化值以及脂肪酸组成进行测 定, 研究红花籽油理化性质随超声波电功率和处理时间的变化规律。 材料与方法 ..红花籽油化学指标的测定 酸值测定方法参照/中的冷溶剂法进行,具体操作为:取适量油脂 溶于适量的混合溶剂乙醚和浓度为