畜禽饮用水中总大肠菌群测定

畜禽饮用水中总大肠菌群测定 薪疆嘻旋2007年第2胡 畜禽饮用巾辽犬菌辫测定 库来汗,王玲 (新疆维吾尔自治区兽药饲料监察所,乌鲁木齐830063) 中图分类号:固52.6文献标识码:B 文章编号:1003-.4889(2007l02--0021--~ 在各种水体,特别是污染水体中存在有大量有 机物质,适于各种微生物的生长,因此水体是仅次 予土壤的第二种微生物天然培养基.水体中的微生 物主要来源于土壤,以及人类和动物的排泄物,水 体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约. 水体中的致病性微生物一般并不是水中原有微生 物,大部分是从外界环境污染而来,特别是人和其 它温血动物的粪便污染.在实际控制中,对水的卫 生质量的评价和控制,是无法对各种可能存在的致 病微生物一一进行检测,而一般利用对指示菌的检 测和控制来了解水体是否受到过人畜粪便的污染, 是否有肠道病原微生物存在的可能,从而评价水的 质量,以保证水质的卫生安全. 水中常见的致病性细菌主要包括:志贺氏菌, 沙门氏菌,大肠杆菌,小肠结炎耶尔森氏菌,霍乱弧 菌,副溶血性弧菌等.下面所讨论的是畜禽饮用水 中总大肠菌群的测定. 1总大肠菌群测定 1.1仪器设备 显微镜,革兰氏染色用有关器材,分析天平,高 压灭菌锅,恒温培养箱,平皿,吸管,试管,试管架, 橡皮乳头,接种环,等等. 1.2培养基 1.2.1乳糖蛋白胨培养液:蛋白胨1O.Og,牛肉膏 3.0g,乳糖5.Og,氯化钠5.0g,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 lml,蒸馏水1000ml,将蛋白胨,牛肉膏,乳糖及氯化 钠置于l000ml蒸馏水中加热溶解,调pH为7.2 7.4,再加入lml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液,充分混匀,分 装于装有导管的试管中,以115~C高压灭菌20min. 1.2.23倍浓缩乳糖蛋白胨培养液:按上述乳糖蛋 白胨培养液,浓缩3倍配制. 收稿日期:2007—03—02 圆 1.2.3伊红美蓝培养基:蛋白胨1O.Og,乳糖1O.Og, 磷酸氢二钾2.0g,琼脂20—30g,蒸馏水1000ml,2% 伊红水溶液20ml,0.5%美蓝水溶液13ml,先将琼脂 加蒸馏水至900ml,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾 及蛋白胨,混匀使之溶解,再以蒸馏水补足至 1000ml,调pH7.27.4.趁热用琼脂棉或绒布过滤, 再加入乳糖,混匀后定量分装予三角烧杯内,以 115oC高压灭菌20min. 1.3分析步骤 多管发酵法检测总大肠菌群,分为3步:即初发 酵试验,平板分离,复发酵证实试验.初发酵试验,采 用3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液37.c培养24h,观察 产酸产气情况.对阳性管培养物,接种于伊红美蓝培 养基,观察菌落特征,并进行革兰氏染色和镜检.对 典型和可疑菌落,接种于普通乳糖蛋白胨培养液, 进行复发酵证实试验,并根据证实有总大肠菌群的 阳性管数查每升水样中的总大肠菌群数. 2试验结果 2.1如果初发酵试验经培养24h后两支100ml水 样管,1O支10ml水样管都没有任何反应(未产酸产 气)试验结果为零(阴性),看表中两支水样管零对称 的数字,则试验结果每升水样中总大肠菌群数为<3. 2.2如果初发酵试验经培养24h后两支100ml水 样管有1支阳性管(产酸产气),1O支10ml水样管 有5支阳性管(产酸产气),将产酸产气的管进行平 板分离接种于伊红美蓝培养基上,培养1824h.挑 选菌落的一小部分进行涂片,革兰氏染色,镜检.如 果涂片镜检的菌落为革兰氏阴性无芽孢杆菌,则挑 取菌落另一部分再进行复发酵证实试验. 2.3如果复发酵试验经培养24h后两支100ml水 样管有1支阳性管,1O支10ml水样管有5支是阳 性管,看表中1和5对称的数字,则试验结果每升 水样中总大肠菌群数为3O. 3讨论 3.1初发酵试验时用大试管3支各加3倍浓缩乳 新疆李教业2007年第2朝 胚胎移植受体牛个体差异对生产性能的影响 张卫平,耿明阳 (1.新疆农四师兽医站,伊宁市835000,2.新疆伊犁州畜禽改良总站,伊宁市835000) 摘要:本次试验选用检查合格的受体牛1800头,采用统一的饲养管理, 发情处理方式,有组织成规模移植性控胚胎,适时 统计处理数据,根据爱体牛个体差异分类选取试验组,预试期为3个月,正试期为1年,通过对比试验表明某些受体牛个体 差异对生产性能确实有一定的影响. 关键词:受体牛;个体差异;生产性能 中图分类号:岛23.13’6文献标识码:A 文章编号:1o03—4889(2007)02-43022-432 本试验通过在合格受体牛性控胚胎移植基础 上,根据受体牛个体差异区别成若干试验组,记录 试验数据,进行统计分析处理,得出相关受体牛个 体差异因素对受体牛生产性能的影响,为以后更好 推广此项技术奠定一定的基础. 1材料与方法 1.1试验时间和地点 试验时间:2004年1月一2005年6月. 收稿El期:2007—01--08 试验地点:新疆呼图壁小土古力村原德隆爱德 牛场,阜康原德隆爱德牛场. 1-2试验动物及分组 试验所用的受体牛大部分来源于伊犁,小部分来 源于阜康周边,品种是当地土牛和改良杂交牛.在这 些牛中选取无较大疾患,正常发情,有适时移植内环 境的受体牛进行性控胚胎移植,以及定期孕检.分组 根据体高(105115era)相近下的体重,年龄,阴道炎, 左右子宫角输胚4个方面的标准分别独立进行对照. 1.3试验方法 试验对象采用统一的饲养管理模式,同期发情 处理方法,黄体检查移胚孕检标准.年龄区分以口 总大肠菌群数检数表 O 每升水样中总大肠菌群数 <3 3 7 11 14 18 22 27 31 36 40 每升水样中总大肠菌群数 4 8 13 18 24 3O 36 43 51 6O 69 每升水样中总大肠菌群数 11 18 27 38 52 7O 92 12O 161 230 >230 糖蛋白胨培养液50ml,小试管11支各加3倍浓缩 乳糖蛋白胨培养液5ml,接种水样总量为300ml,即 100ml接种2管,10ml接种l0管,采用两个稀释度, 同时用灭菌蒸馏水做空白对照. 3.2分离培养时伊红美蓝培养基上菌落特征为:深 紫黑色具有金属光泽或紫黑色不带或略带金属光 泽或淡紫红色中心色较深的菌落. 3.3总大肠菌群数系指每升水样中所含有的总大 国 肠菌群数目. 3.4在畜禽饮用水中的上述监测中,普遍采用正常 的肠道细菌作为粪便污染指标,而不是直接测定肠 道致病菌.水样中总大肠菌群数的含量,表明水被 粪便污染的程度,表明有肠道致病菌存在的可能 性.一般要求总大肠菌群成年畜?l0个/100ml,幼 畜和禽?1个/100ml.只有这样才能保证畜禽安全. O123456789加