玉屏风散对衰老模型小鼠皮肤郎格罕氏细胞超微结构的影响

玉屏风散对衰老模型小鼠皮肤郎格罕氏细胞超微结构的影响 word格式 玉屏风散对衰老模型小鼠皮肤郎格罕氏 细胞超微结构的影响 作者,马卓飞, 张茂林, 覃兴乐 【摘要】 目的研究玉屏风散延缓小鼠皮肤衰老的作用机理。方法采用D-半乳糖连续6周颈部皮下注射造成亚急性衰老小鼠模型,中药各剂量组注射D-半乳糖同时灌服玉屏风散水煎剂,并以VitE-C组作为对照,电镜观察玉屏风散对衰老模型小鼠皮郎格罕氏细胞超微结构变化的影响。结果衰老小鼠表皮郎格罕氏细胞会出现线粒体肿胀、空泡样变,内质网、Golgi复合体肿胀等改变,玉屏风散能抑制这些改变。结论玉屏风散可抑制衰老小鼠表皮郎格罕氏细胞超微结构的改变,具有一定的延缓皮肤衰老的作用。 郎格罕氏细胞 【关键词】 玉屏风散, 皮肤, 衰老, word格式论文 Abstract,ObjectiveTo study the anti-aging function of Yupingfeng Powder .MethodsThe aged model was indceced by D-galactose subcutaneous administration for 6 weeks in mice. Chinese herb group was orally administerted decoction of Yupingfeng Powder and control group was orally administted the misture of VitE-C. The Ultrastnccture was obseored by electrominvscope.ResultsLcs of aged mice appeared mitochondria swelling ,vacuolar degeneration as well as swelling of endoplasmic resculum and golgi complex. ConclusionYupingfeng Powder can inhibit the Ultrastructural alteration of Lcs, and delay the aging of skin. Key words:Yupingfeng Powder, Skin aging, Langhan’s cell 皮肤是人体最大的器官,具有独特的免疫功能,皮肤衰老会引起皮肤免疫系 统功能失调,而与此同时皮肤免疫系统的功能失调又是导致或促进皮肤衰老的原 因之一,1,。郎格罕氏细胞(Langerhan’s cells Lcs )位于表皮,是皮肤免疫系统 中重要的抗原提呈细胞,在免疫调节、免疫监视、免疫耐受过程中起着重要的作 用,郎格罕氏细胞功能的正常与否决定了皮肤免疫系统功能,2,。本文通过观察 衰老模型小鼠表皮郎格罕氏细胞超微结构的变化旨在探讨皮肤衰老过程中郎格 罕氏细胞超微结构的变化,及玉屏风散对其的影响。 word格式论文 1 材料 1.1 动物选用3月龄昆明种小鼠,雌雄各半,体重,20?2,,,由湖北医学 科学 院动物中心提供。 1.2 药物及试剂玉屏风散由黄芪、白术、防风组成,购自湖北中医学院专家门诊部,经水煮、过滤、浓缩,配制成100%,每毫升含生药1g,的水煎剂,装瓶,冷藏备用。维生素E,浙江医药股份有限公司,、维生素C,湖北华中制药公司,配成1%的混悬液,冷藏备用。,-半乳糖(上海试剂二厂), 3%戊二醛,环氧丙烷,1?1的环氧树脂618,0.1%磷酸缓冲液。 2 方法 2.1 分组小鼠正常喂养一周后,随机分为5组:正常组、模型组、维生素E-C合剂组,以下简称西药组,、玉屏风散大剂量组,以下简称大剂量组,、玉屏风散小剂量组,以下简称小剂量组,,每组10只。 word格式论文 2.2 造模及给药模型组、西药组、大剂量组、小剂量组:每日颈部皮下注射12.5%D-半乳糖,1 000 mg/kg,,连续6周。同时大剂量组每日灌胃玉屏风散水煎剂,18 g/kg,,小剂量组每日灌胃玉屏风散水煎剂,9 g/kg,,西药组每日灌胃维生素E-C悬液,50 mg/kg,,连续6周。 2.4 观察指标第56天末次给药前禁食12 h,给药1 h后,小鼠背部脱毛,取背部正中皮肤约1 mm×1 mm大小的皮肤组织,用3%戊二醛4?保存,制作电镜组织切片观察并照像。 3 结果 电镜观察发现,与正常小鼠比较,模型组小鼠郎格罕氏细胞形态结构发生了明显的变化。正常组小鼠表皮郎格罕氏细胞胞膜完整,与周围细胞无桥粒结构,细胞核成分叶状,胞质中不含角蛋白丝,有较多的线粒体,有发达的内质网、Golgi复合体,丰富的核糖体,在胞质凹陷附近中可见Birbeck颗粒,呈杆状,中央有一细丝,如图1,2,。 模型组郎格罕氏细胞胞膜不完整,胞质内线粒体 word格式论文 肿胀、嵴变短、减少或消失,甚至形成空泡,内质网、Golgi复合体明显减少,内质网肿胀、空泡样变,Birbeck颗粒量少等,如图3,。玉屏风散组及VitE-C组的郎格罕氏细胞胞膜完整,细胞核成分叶状,胞质内虽可见线粒体肿胀,嵴排列稍乱,空泡样变,内质网肿胀,但程度较模型组明显减轻,内质网、Golgi复合体数量较模型组明显增多,如图4,6,。 4 讨论 衰老是指随着增龄,个体发生的功能性和器质性衰退的渐进过程,3,。皮肤是人体最大的器官,由于其结构和功能的特殊性,形成机体与外界环境之间的天然屏障,具有防御功能,是具有独特免疫功能的组织器官,故皮肤衰老时除了表现为皮肤松弛,皮肤弹性降低,产生皱纹等体表特征外,还会出现皮肤免疫功能的失调。而皮肤免疫功能的改变不仅是皮肤衰老的结果,反过来也会进一步导致并促进皮肤的衰老,使皮肤易患各种疾病。 郎格罕氏细胞是皮肤免疫系统(SIS)中的重要细胞,具有明确的抗原提呈功能,能在表皮中摄取、处理和提呈抗原,分泌细胞反应过程中所需的重要细胞因子,激活机体的细胞和体液免疫反应,参与免疫调节、免疫监视、免疫耐受,是参与皮肤免疫反应的主要细胞,2,。若郎格罕氏细胞功能出现异常,抗原提呈能 word格式论文 力下降,不能正常的摄取、识别、加工处理抗原, IL-1等细胞因子的释放亦减少,不能激活机体免疫反应,会导致皮肤免疫监视等功能下降,使其易受感染,甚至产生肿瘤,此外郎格罕氏细胞还参与和控制角朊细胞的角化过程,若其功能出现异常会使角朊细胞角化过程异常,使基底细胞增殖速度变慢,出现表皮变薄,表皮与真皮间界线变平等皮肤衰老的表现。实验证明,郎格罕氏细胞功能的异常是皮肤衰老的原因之一,4,。 皮肤表象的衰老反映在细胞水平即为细胞衰老。细胞衰老明显的特征是细胞内容物、代谢和形态学的改变,4,。正常郎格罕氏细胞呈 现代 谢活跃的细胞结构特点,电镜下郎格罕氏细胞不含蛋白丝及黑素小体,与周围细胞无桥粒结构,细胞核成分叶状,有较多的线粒体,有发达的内质网、Golgi复合体,并具有特征性的Birbeck颗粒,5,。Birbeck颗粒是郎格罕氏细胞所特有的细胞器,有学者认为Birbeck颗粒由Golgi复合体形成后移向细胞膜与胞膜融合将Birbeck颗粒内的物质分泌到细胞外,Birbeck颗粒可完成合成郎格罕氏细胞表面Ia抗原及调节各型皮肤反应的某些因子的任务,6,7,。而内质网是协调蛋白质合成、折叠、输出及降解的细胞器,主要功能则是产生外源性蛋白质,如各种肽类激素、酶类和抗体等,。二者皆为重要的细胞器,其功能的改变会对细胞功能产生较大的影响。本实验中由D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠模型表皮郎格罕氏细胞出现胞膜不完整,胞质内线粒体,肿胀、嵴变短、减少或消失,空泡样变,内质网、Golgi复合体肿胀,空泡样变等改变,数量明显减少,Birbeck颗粒量少。结果显示,衰老模型小鼠郎格罕氏细胞功能的衰退具有一定的形态学基础。使用玉屏 word格式论文 风散或维生素E-C后的小鼠表皮郎格罕氏细胞胞质内虽可见线粒体肿胀,脊排列稍乱,空泡样变,内质网、Golgi复合体肿胀,但程度较模型组明显减轻。说明玉屏风散能抑制衰老小鼠表皮郎格罕氏细胞形态学的改变。 玉屏风散是中医扶正固表的经典方剂,出自元?朱丹溪的《丹溪心法》,由黄芪、白术、防风组成,有补脾肺益卫之功。在中医理论体系中,卫气是人体内具有防御功能的气,有温分肉、肥腠理、充肌肤、司开阖的功能,与皮肤在病理生理上关系密切。已有研究发现郎格罕氏细胞与中医学中的卫气在功能和分布区域上具有一定的相关性,8,。根据实验结果,我们认为玉屏风散通过补益卫气,抑制郎格罕氏细胞结构的改变,减少郎格罕氏细胞结构出现功能异常,从而改善或防止皮肤免疫系统功能失调,在一定程度上延缓皮肤衰老。 参考 文献 】 【 ,1, 张开明,王 刚,尹国华,等.最新皮肤 科学 理论与实践,M,.北京, 中国 医药科技出版社,XXXX年小鼠皮肤及表皮Langerhan’s细胞的影响,J,.中国老年学杂志,1999,19(1),34. ,5, 张学军,刘维达,何春涤,等.现代皮肤病学基础,M,.北京,人民卫生出版社,2001,58. word格式论文 ,6, 陈洪铎. 郎格罕氏细胞,J,.中国医科大学学报,1982,11,4,,278. ,7, 朱正文.大鼠郎格罕氏细胞Ia抗原及ATPase的研究,J,.中华皮肤科杂志,1985,18,1,,9. ,8, 王普霞,孙 桐.卫气防御作用研究概览,J,.南京中医药大学学报,2003,19,5,,316.