HPLC法测定小儿止咳糖浆中甘草酸铵的含量

HPLC法测定小儿止咳糖浆中甘草酸铵的含量 HPLC法测定小儿止咳糖浆中甘草酸铵的 含量 江苏药学与临床研究2004年第12卷第1期 匀;精密量取1ml置5oIIll量瓶中,加氯仿一甲醇(1: 1)稀释至刻度,摇匀,即得. 对照品溶液(?)的制备:取对氨基苯磺酸对照 品5oIl】g,置5oIIll量瓶中,加氯仿一甲醇(1:1)稀释至 刻度,摇匀;精密量取1rnl置100ml量瓶中,加氯仿 一 甲醇(1:1)稀释至刻度,摇匀,即得. 测定:取上述供试品溶液和对照品溶液各5, 分别点于同一硅胶G薄层板上,按”2.2”项中测 定方法操作,结果见图5. 围5复方磺胺甲晤唑混悬剂薄层色谱图 1:样品(2Ir砌);2:磺胺甲嚼唑对照品(O.04Ir);3:磺胺对 照品(O.02Ir);4:对氨基苯磺酸对照品(O.01Ir) 4结果 最低检出量分别约为4o,2o,10ng. 4.2图4结果明,5种混合液中的磺胺甲曙唑与 磺胺,对氨基苯磺酸均可较好分离. 4.3图5结果表明,磺胺甲嗯唑主斑点的,值约 为O.72,有关物质的r值分别约为:0.16,0.21, 0.49.主斑点与杂质斑点分离较好,不拖尾.每个 杂质斑点的体积和强度分别相应小于2%磺胺甲曙 唑,1%磺胺,0.5%对氨基苯磺酸. 5讨论 5.1用TIE法检测复方磺胺甲嚼唑混悬剂中磺胺 甲嗯唑的有关物质,方法简便易行,不受仪器限制, 分辨清晰,重复性好;磺胺甲嘿唑的最低检出量为 40ng,磺胺的最低检出量为20ng,对氨基苯磺酸的 最低检出量为10ng. 5.2在研值约为O.21处,据文献资料是磺胺甲嚼 唑的降解产物N4一糖苷,由于N4一糖苷不易获得,所以 就用磺胺甲嗯唑作自身对照,最终得出N4一糖苷约相 当于磺胺甲嚼唑检出量40ng. 5.3USP24版(?)规定复方磺胺甲曙唑混悬剂中 磺胺甲嗯唑的有关物质总量不得超过3.8%,用本 法可控制. L 参考文献 4-,:. 紫 一 b3~’,lff(254 .l国家药典委员会.中华人民共和国药典[s]二部京:化学工 nm)T,除1%的磺胺甲嚼唑对照液,0?5%的磺胺对l’……”一J. 照液,0.25%的对氨基苯磺酸对照液无色斑外,其余2usP24~(11):1573 均显桃红色斑点,颜色随浓度从高到低而由深变浅,(收稿日期:2003-10-20) I-IPLC法测定小儿止咳糖浆中甘草酸铵的含量 仇雅静王建陈广字 泰州市药品检验所(泰州225300)南京中医药大学(南京21(X)29) 摘要:目的建立dxJL止咳糖浆(甘草流浸膏,桔梗流浸膏,氯化铵,橙皮酊等)中甘草酸铵的含量测定方法.方法高 效液相色谱法测定甘草酸铵的含量.采用Licha~rbC培色谱柱,流动相为水.乙腈.冰醋酸(65:35:2.5),检测波长为254am,流 速为1.0ml?min,.结果甘草酸铵线性范围为O.840p.g(r=O9994),平均加样回收率为97.4%,RSD为O5%.结论 该方法简便,可靠,准确,用于d,JL止咳糖浆的质量控制. 关键词:d,JL止咳糖浆;甘草酸铵;高效液相色谱 中图分类号R927.2文献标识码A文章编号1007.306(2004)01.20.03 , 20? 江苏药学与临床研究2004年第l2卷第1期 DeterminationofAmmoniumGlycyrrhizinatein InfantsCough—Suppre~ingSyrupbyHPLC QiuYa-jing.WangJian.ClamG岫ng. Tai~uInstituteforControl(Ta/zhou225300) UniversityofTraditionalChineseMedicine(Na,~ng210029) Abaract:ObjectiveToesiahlishamethodfordeterminationofAmmoniumGlycyrrhizinateinInfantsGs llppI髑Syrup(R~dk Glyeyn-hizaeFlowing-Fatmet,RadixPlatieodonisFlowing-Extract,AmmoniumChloride,Periearpi umdtrireficnlataeTmeture,ere.).Methed 1hecontent0fAnm~MliumGly~ThiZinatewasdeterminedbyHPLCwithLichro~rbCl8column.1he Water-Acetonitrile-AceticAcid(65:35: 2.5)W88used鹅themobilephase.”lhedetectionwavelengthwassetat254nnlandtheflowratewgs1.0ml?rain,.Result扭?lli啪 Gb一油la主e,thelinearityrangewas0.8—4.0ttgwithacor~lationcod~dentr=0.9994,theaveragerecoveryWaS97,4 %andtheRSD wasO.5%?C,ollldu~oRThemethodissimple,reliable,accurateandcarIbeusedfortheqIlalit)rcontrolo fInfantsCough-SuppressingSyl, KeyWords:InfantscI)ugI卜sIlppIessiI1gSyrup;AmmoniumGlycyrrhizin;HPLC 小儿止咳糖浆…1是卫生部《药品标准中药成方 制剂》第五册中收载的制剂,由甘草流浸膏,桔梗流 浸膏,氯化铵,橙皮酊等组成,具有镇咳,祛痰的功 效,主要用于治疗小儿感冒引起的咳嗽.部颁标准 对组方中的氯化铵规定了定量检查的方法,而对主 要组分甘草流浸膏中的甘草酸成分仅有定性鉴别, 没有含量测定要求,不利于对药品质量进行完全有 效的控制.为了进一步控制该制剂的质量,我们查 阅有关参考文献[3-5],建立了高效液相色谱法测定甘 草酸铵含量的方法.实验结果表明,该方法简便易 行,准确可靠. 1仪器与试药 日本岛津Lc.10.41”型高效液相色谱仪,SPD-10A型 紫外检测器,梅特勒托利多AG-135型电子天平(十万 分之一);乙腈为色谱纯;其它试剂均为纯. 甘草酸铵对照品(中国药品生物制品检定所,批 图1对照品图谱 号0731.9704);阴性对照品桔梗流浸膏(四川捷为制 药厂,批号870601);橙皮酊(上海美优制药厂,批号 910401);氯化铵(上海市松江县新滨化工厂,批号 880509);d,JD止咳糖浆样品(江苏健宁药业有限公 司,批号20020901;天子福国际药业?江苏有限公司, 批号0112041;盐城市第二制药厂,批号980121;国营 海安制药厂,批号9703~;江苏宝达制药厂,批号 010815). 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:LichrosorbCl8(150rniYl×6.0RqlTI,5/an); 流动相:水.乙腈.冰醋酸(65:35:2.5);检测波长: 254sln【;流量:I.0ml?rain-1;柱温:室温;进样体 积:10;理论板数以甘草酸铵色谱峰计算应不低于 5041.此条件下,甘草酸铵与相邻的峰已基本分离, 且阴性对照无干扰.结果见图1图3. 图2供试品图谱图3阴性对照图谱 a为甘草酸铵色谱峰 ? 21? 江苏药学与临床研究2OO4年第12卷第1期 2.2对照品溶液的制备 精密称取甘草酸铵对照品适量置于量瓶中,加 甲醇适量,超声5rain使溶解;再稀释至刻度,摇匀, 过滤,使配制成每毫升含0.4mg甘草酸铵的对照品 溶液. 2.3供试品溶液的制备 精密量取样品5IIll,置于25IIll量瓶中,加稀乙 醇(95%乙醇529ml加水至1000ml[2])适量,超声 5溶解;再稀释至刻度.摇匀.过滤,即得供试 品溶液. 2.4阴性对照溶液的制备 按处方比例称取桔梗流浸膏,橙皮酊,氯化铵 等,不加入甘草流浸膏,依照小儿止咳糖浆的制备工 艺和供试品溶液的制备方法制备,即得阴性对照溶 液. 2.5线性关系考察 精密量取对照品溶液2,4,6,8,10ml,分别置于 10IIll量瓶中,加甲醇适量,超声5rain使溶解,再稀 释至刻度,摇匀,过滤;精密吸取以上溶液10分别 进样,在上述色谱条件下,测得峰面积.以甘草酸铵 的量为横坐标,峰面积值为纵坐标,绘制标准曲线. 其回归方程为:Y=58602.49X+5997.31,r=0.9994 (,l=5).结果表明在0.84.0tzg范围内.甘草酸 铵的量与峰面积呈良好线性关系. 2.6进样精密度试验 精密吸取同一对照品溶液10.重复进样5 次.分别测定甘草酸铵的峰面积,其RSD为0.2%. 2.7样品溶液稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液10,每2小时进样 1次,连续5次,分别测得甘草酸铵的量(1.2933, 1.2892,1.2898,1.2905,1.2855tzg),RSD为0.3%. 2.8加样回收率试验 精密量取已知含量的样品(盐城市第二制药厂. 批号980121,含量0.8730nag?ml)2ml.置于20IIll 量瓶中,分别依次添加甘草酸铵对照品溶液1,2,3, 4,5IIll.再滴加稀乙醇适量,超声5rain使溶解,然后 稀释至刻度,摇匀,过滤,进行测定.结果见表1. 2.9不同生产厂家样品含量测定 精密量取不同生产厂家的样品,按供试品溶液 制备项下的方法操作.在相同色谱条件下.进行样品 ? 22? 含量测定.结果见表2. 表1加样回收率 厂家批号供试品含量样品含量 (mg.ml)(mg?ml一) 3讨论 3.1实验采用稀乙醇直接稀释的方法对样品进行 了预处理,操作简便易行,结果准确可靠. 3.2甘草酸是甘草流浸膏中的主要有效成分,且阴 性对照中无干扰现象发生,故选取甘草酸铵作为小 儿止咳糖浆的质量控制指标. 3.3从样品中甘草酸铵的含量测定结果看出,不同 厂家的产品之间存在很大差异,因此建议有必要采 取措施对该制剂的质量进一步加强控制.HPLC法 可作为参考. 参考文献 l中华人民共和国卫生部.药品标准中药成方制荆(第五册)[s]. 北京:人民卫生出版社,l992:l9. 2国家药典委员会编.中华人民共和国药典[s].一部,北京:化学 工业出版社.2O0O:附录102. 3王征,夏宇欣.HPI~法测定脑乐静中甘草酸铵的含量[J].基层 中药杂志,200l.15(2):11. 4陈建华,崔忠,崔波,等.I-IPLC测定六一散中甘草酸铵的含 量[J].中成药,200O,2=2(9):621. 5刘海静,翟西峰,郭欢迎.I-IPLC法测定强力宁注射液中甘草酸铵 的含量[J].西北药学杂志,2O0O,ts(2):53. (收稿日期:200”3-07-21)