肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用

肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用 作者:吕圭源 陈素红 张园 陈雁虹 吕秀娟 华波 颜美秋 【摘要】 ,目的,研究肿节风挥发油(SGE)对环磷酰胺(CTX) 治疗 H22、S180小鼠的增效和减毒作用。,方法,建立小鼠体内移植性肉瘤、肝癌模型，通过两种给药途径，观察肿节风挥发油与环磷酰胺联合用药对荷瘤小鼠抑瘤率的影响;观察SGE拮抗CTX引起血小板、白细胞及血红蛋白下降。,结果,肿节风挥发油与CTX合用时，对肝癌H22、肉瘤S180两种肿瘤均有不同程度的抑瘤增效作用。CTX(10mg/kg或15mg/kg)分别联用iv.SGE(36.6mg/kg)，对小鼠H22、S180的抑瘤率均高于相应剂量的单用CTX(P<0.05);CTX(20mg/kg)联用ig.SGE(73.2mg/kg)，对H22的抑瘤率高于单用CTX(P<0.05)。肿节风挥发油能明显拮抗CTX引起的血小板、白细胞下降(P<0.05,0.01)。,结论,肿节风挥发油能增强CTX的抗肿瘤作用，同时减轻CTX的毒性。 【关键词】 肿节风挥发油 环磷酰胺 增效 减毒 肿节风是金粟兰科草珊瑚属植物草珊瑚Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai的干燥全草,1,，又名草珊瑚、九节茶、接骨木。肿节风味苦、辛、性平，归心、肝经。辛能行散，苦凉泄热，即除外侵之风湿，有解内蕴之热毒。肿节风注射液具有抗肿瘤、抗菌消炎、抗病毒作用，适用于肌肉注射，其生产以水煎煮提取，酒精沉淀去杂质。临床前需要稀释，有可能造成二次污染。为寻找新的抗癌增效、减毒剂，本课组提取得到肿节风挥发油，通过H22、S180两种荷瘤模型，采用两种给药途径，观察与CTX联合应用对肿瘤的影响。 1 1.1 药物 肿节风药材，浙江国镜药业有限公司;肿节风挥发油(SGE)，取肿节风药材经水蒸气蒸馏法提取挥发油，临用前配制成剂量为1.83mg/ml、2.75mg/ml、3.66mg/ml;注射用环磷酰胺:江苏恒瑞医药股份有限公司，批号为06070721;氯化钠注射液:国营张家港制药厂，批号06061503。 1.2 瘤株 小鼠肉瘤S180、小鼠肝癌H22，浙江中医药大学生命 科学 院提供。 1.3 仪器 Heraeus Biofuge冷冻离心机，德国Heraeus;Power Wave340酶标仪，美国BioTek。 1.4 动物 昆明种小鼠，体重18,22g，雌雄各半，浙江中医药 大学动物中心提供，动物许可证号为SCXK(沪)2003-0003。 2. 方法 2.1 两种给药途径对CTX的增效作用实验,2, 动物分组:昆明种小鼠，体重18,22g，随机分成7组。?SGE iv:模型对照组(NS)、两组单用CTX1、2组(10mg/kg、15mg/kg)，另设CTX+SGE1、2组(10mg/kg、15mg/kg)分别加用SGE(18.3mg/kg、36.6mg/kg)，每组12只小鼠。模型对照组iv生理盐水，CTX组ip.，SGE给药组iv.，0.1ml/10g，连续12天。?SGE ig:模型对照组(NS)、两组单用CTX组(10mg/kg、20mg/kg)，另设CTX+SGE3、4组(10mg/kg、20mg/kg)分别加用SGE(18.3mg/kg、36.6mg/kg)，每组12只小鼠。模型对照组ig生理盐水，CTX组ip.，0.1ml/10g，SGE给药组ig.，0.2ml/10g，连续12d。取昆明种小鼠S180/H22细胞腹腔内接种8d的种鼠，无菌条件下吸出1,2ml牛奶状、较粘稠的腹水，先用0.4%苔盼蓝染色，计活细胞率>90%，血球计数板计数癌细胞数，以DHanks稀释调整细胞浓度为1×107个/ml，每只小鼠0.1ml右前肢腋窝皮下接种。于末次给药后的第2天脱处死小鼠，完整剥取瘤块，称重，比较单用CTX治疗组与联用SGE组间抑瘤率的差异，观察SGE的增效作用。 抑瘤率(%)=(对照组平均瘤重,给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%。 2.2 SGE对CTX致荷瘤小鼠血细胞下降的影响,3, 取昆明种小鼠60只，随机分成5组，即正常对照组，模型对照组(CTX)，SGE剂量组(18.3mg/kg、27.5mg/kg、36.6mg/kg)，每组12只。除正常对照组外，各组动物均ip.60mg/kgCTX，1次/d，连续7d。SGE组按照剂量iv.，0.1ml/10g，于停药后24h自小鼠眼眶静脉取血，EDTAK2抗凝，测白细胞数量、血小板数量、血红蛋白浓度。 2.3 统计学处理 数据采用t检验，以x?s示。 3 结果 3.1 SGE iv给药与CTX合用对S180荷瘤小鼠增效的影响 表1显示，与模型对照组比较，CTX无论是单用还是与SGE合用，均能明显减小S180荷瘤小鼠的瘤重(P<0.05,0.01)。当CTX(10mg/kg或15mg/kg)分别与SGE(36.6mg/kg)合用，其抑瘤率均较相应剂量的单用CTX升高(P<0.05)。CTX10mg/kg、15mg/kg单用的抑瘤率分别为45.24%、49.74%，联用SGE36.6mg/kg的抑瘤率则分别为68.13%、69.81%，提高抑瘤率为50.60%、40.34%。结果表明肿节风挥发油iv给药与CTX合用对S180荷瘤小鼠具有增效作用。 表1 SGE iv给药与CTX合用对S180荷瘤小鼠增效的影响(略) 与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01;与CTX组比较:?P<0.05,??P<0.01 3.2 SGE iv给药与CTX合用对H22荷瘤小鼠增效的影响 表2显示，与模型对照组比较，CTX无论是单用还是与SGE合用，均能明显减小H22荷瘤小鼠的瘤重(P<0.01)。当CTX(10mg/kg或15mg/kg)分别与SGE(36.6mg/kg)合用，其抑瘤率均较相应剂量的单用CTX升高(P<0.05)。CTX10mg/kg、15mg/kg单用的抑瘤率分别为43.80%、40.91%，联用SGE36.6mg/kg的抑瘤率为59.93%、62.04%，提高抑瘤率为36.83%、51.65%。结果表明肿节风挥发油iv给药与CTX合用对H22荷瘤小鼠具有增效作用。