紫外分光光度法和高效液相色谱法测定利巴韦林片含量的比较
紫外分光光度法和高效液相色谱法测定利
巴韦林片含量的比较
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胡晓珍
276300山东省沂南县孙组镇岱庄卫生院 摘要目的:本研究分别采用紫外分光
光度法和高效液相色谱法测定利巴韦林 片的含量,来观察这两种方法的优缺点, 为利巴韦林片的含量测定方法提供依据. 方法:分别采用紫外分光光度法和高效液 相色谱法测定利巴韦林片,对其溶液波长 的测定,标准曲线的制备,供试品含量的
测定,加样回收率的对比,稳定性试验,对
两种方法进行比较.结果:通过分别用紫
外分光光度法和高效液相色谱法测定利 巴韦林片的含量,通过t检验,P>0.05, 两种方法差异无显着性,结果可靠.结
论:两者均可用于利巴韦林片的质量控
制.
关键词紫外分光光度法高效液相色
谱法利巴韦林片含量测定
doi:10.3969/j.issn.1007—614x.2011. 24.004
利巴韦林(ribavirin)又名三氮唑核
苷,病毒唑,是一种单磷酸次黄嘌呤
(IMP)脱氢酶抑制剂,通过抑制单磷酸次 黄嘌呤,对多种DNA和RNA病毒有明显 的抑制作用,国内外均广泛应用于病毒性 疾病和肿瘤的治疗….利巴韦林片作为 常用抗病毒药物用于流行性感冒及疱疹 性口腔炎的治疗.利巴韦林片的定量分 析方法,报道?有凯氏定氮法,一阶导 数法,比色法,旋光法,也有紫外分光光度 法(MV)法H及高效液相色谱法(HPLC) 法.本研究分别采用紫外分光光度法 和高效液相色谱法测定利巴韦林片的含 量,来观察这两种方法的优缺点,现
如下
资料与方法
仪器:MV一160IPC紫外分光光度仪 (日本),SP8800高效液相色谱仪(美 国),AG245电子天平(中国上海), SP4400积分仪,SP100MV检测器. 试药:试验品利巴韦林片,氧氧化钠为 分析纯.利巴韦林对照品,水为超纯水. 紫外分光光度法:(1)测定波长的选 择:?试验品溶液的制备:取试验品利巴 韦林片20片研细,精密称取约相当于利 巴韦林50rag的试验品置50ml量瓶中,用 0.01mo//L氢氧化钠溶液溶解并稀释至 刻度,摇匀得试验品溶液(浓度为 1.00rag/m1).?对照品溶液的制备:精 密称取利巴韦林(置105?干燥至恒重) 50mg置于50ml量瓶中做对照品,用
0.Olmol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至 刻度,摇匀得利巴韦林对照组溶液(浓度 为1.o0~.g/m1).分别取上述2种溶液 】m1分置于50ml量瓶中,用0.01mol/L氢 氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀得20rag/ml 浓度的溶液,以0.01mo//L氢氧化钠溶液 为空白,在波长200—400nm的范围内利 用分光光度法进行扫描,确定214nm为 测定波长.?标准曲线的制备:取利巴韦 林对照品溶液0.1ml,0.25ml,0.5rr]l,
0.75ml,1ml和1.25ml,分别置于50m1量 瓶中,用0.01mol/LNaOH溶液稀释至刻 度,摇匀得2mg/ml,5mg/ml,10mg/ml,
15rag/ml,20rag/ml和25mg/ml6种浓度 的溶液.以0.01mol/L氢氧化钠溶液为 空白,在214nm波长处,分别测定溶液的 吸收度(A值),以吸收度A对浓度C进 行线性回归,得回归方程:A=0.042C+ 0.078,r=0.9998(n=6). 结果
明,在波长2—25mg/ml范围
内,浓度与吸收度呈良好的线性关系. 试验品含量测定:取利巴韦林片20 片,精密称定,研细.精密称取利巴韦林 片粉适量,加流动相稀释并摇匀,用蒸馏 水配置成含利巴韦林1mg/ml的溶液,用 干滤纸过滤,弃初滤液.取续滤液lml置 100ml量瓶中按上述色谱条件分别取样 10ml测定,重复3次,共测定6批样品的 含量,按外标法计算标示量(%),并与高
效液相色谱法测定的结果进行统计学比 较.
加样回收率测定:称取利巴韦林含量 粉末适量(约50rag)置于100ml量瓶中, 精密加入利巴韦林对照品40rag,50rag和 60rag各3份,用0.01mol/L氢氧化钠溶 液溶解并稀释至刻度,精密量取各滤液 1ml,分别置于100ml量瓶中,用0.01mol/
(第13卷总第285期 6中国社区医师?医学专业2011年第24期L氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,按含 量测定方法的方法测定,计算测定量及回 收率,见表1.
稳定性试验:取高,中,低浓度利巴韦 林对照品溶液,在室温下放置0,8和24 小时,在214nm波长处分别测定吸收度 (A值),其吸收度基本保持不变.结果 表明,待测液在24小时内质量稳定.见 图l
时间
波长
片粉适量(约相当于利巴韦林2mg),置 1OOml量瓶中,加流动相稀释并摇匀,用 干滤纸过滤,弃初滤液.取续滤液按卜述 色谱条件分别取样lOml测定,重复3次, 共测定6批样品的含量,按外标法计算标 示量(%),并与紫外分光光度法法测定 的结果进行统计学比较,见表3. 表3MV法翮HPLG法样品禽鼍测定结莱比较 f标添羹%,?
批号MV法HPLG法
2()o708i2it96i12~0~22971liO.29
2.o"llI3296.47tO.9761:l:0i32
2o0丸20312?.嬲?0稻辨+83~044 ~80i020897.【)7?O.9靠9O?l0.3 200802111897.36?0112397.33~0 2?80227'0il鲫.?0.196.98套0;35 注:MV法和HPLC法榴比较P》011:05 加样回收试验:在已知浓度的样品测
定液中,分别准确加入对照品溶液1.0, 3.O,4.0,5.0ml后照样品测定方法测定, 每次进样10ml,结果表明,本法回收率较 好.见表4.
稳定性试验:按样品测定方法处理同
一
标准批号样品进行测定5次,每次进样 1OMl,峰面积为1050212,1050339, 1053001,1049221,1054821,RSD=
0.87%,稳定性良好.
讨论
在本次实验中采用0.Olmol/L氖氧
化钠溶液作为溶剂,结果利巴韦林在波长 214nm处有较宽的吸收峰,所以选择
214nm为测定波长.测量结果是在波长 2,25mg/ml范围内,浓度与吸收度呈良 好的线性关系.在采用碱性条件下可减 少利巴韦林片中辅料的影响.本法平均 (上接第5页)
观察指标.能够较好地反映动物对疼痛
的耐受情况,从而验证药物的疗效. 本实验显示:复方乳没利多卡因缓释贴膜 剂,最佳止痛时段为1,3小时,这为复方 乳没利多卡因缓释贴膜剂外敷治疗各类 体表,关节疼痛提供了实验依据,但其镇 痛作用机制尚待进行深入系统的研究. 总之,本药物为能够渗透完整皮肤达 到真皮层的浅表镇痛剂.其功效在于对 浅表皮肤各种损伤起到镇痛的作用,对解 决体表疼痛有着不可替代的作用.对皮 肤瘙痒,疱疹病毒神经痛也有较好的止 痛,止痒作用,值得在进一步研发并在临 床推广应用.
回收率为99.8%.
紫外分光光度法可用丁利巴韦林片 含量测定,为基层单位进行利巴韦林片质 量分析提供参考.
高效液相色谱法专属性强,操作简 便,灵敏度高,重现性好,能有效控制产品 质量.紫外分光光度法操作简单,快速准 确也适合该产品的质量控制.
两种方法与常规的凯氏定氮法相比, 具有操作简单,省时省力,结果准确等优 点,为利巴韦林片定量分析的较好方法. 结果
用紫外分光光度法和高效液相色谱 法分别测定利巴韦林片的含量表明,其赋 形剂均无干扰,用紫外分光光度法比高效 液相色谱法测定利巴韦林片的含量偏高,
佣用统计学f检验检杏,两种方法差异无 着性,结果靠.两者均_不f用十利巴韦 林片的质量控制.
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