低张性缺氧对家兔血压

低张性缺氧对家兔血压 低张性缺氧对家兔血压、呼吸和ECG的影响 【实验目的】 1. 复制由于外呼吸功能障碍造成的低张性缺氧(又称呼吸性缺氧)的动物模型 并了解其原理。 2. 观察缺氧过程中循环、呼吸系统的代偿适应性变化并探讨其机制。 3. 对比乏性缺氧的发生机制和机体的代偿反应，加深对缺氧的理解。 【实验原理】 常压下，空气中氮含量增高时(>84%)可排除空气中氧，引起吸入气中氧分压过低，感觉呼吸不畅，窒息感，引起循环系统、呼吸系统活动的改变。而高浓度氮(>90%)可引起单纯性缺氧，动物可表现出肌张力增高，阵发性痉挛、紫绀、瞳孔缩小，对光反应减弱等危象症状，严重时死亡。 外呼吸主要由两部分，即肺通气和肺换气，本实验采用使家兔吸入大量氮气的方法造成肺换气功能的障碍。最终会造成机体以低张性缺氧、进行性酸中毒为主的功能障碍。 【实验对象】 家兔(性别_______、体重______Kg) 【实验药品与器材】 20%乌拉坦，1% 肝素钠生理盐水，生理盐水，兔手术台，婴儿秤，哺乳动物手术器械一套，铁支架2个，双凹夹2个，动脉插管1个，MR-6240生物采集实验系统1套，低氧盒(内含钠石灰)1个，气管插管，氮气瓶，压力换能器，张力换能器各1个，注射器(5ml、20ml)2支，打印机。 【实验方法与步骤】 1(麻醉及固定:家兔称重，20,乌拉坦(5ml/Kg体重)耳缘静脉麻醉，背位固定于兔台上， 颈部胸部备皮。 2(颈部手术:，分离气管、分离一侧颈总动脉，分离两侧主动脉神经，穿线备用。 3(肝素化 1% 肝素1ml/kg静脉注射。 4(颈总动脉插管，通过换能器连接到MR-6240生物采集实验系统。 5(气管插管，与缺氧系统相连，(氮气瓶与缺氧盒相连)。 6(上腹部手术:暴露膈肌，通过张力换能器与MR-6240生物采集实验系统相连，呼吸变化。 1 7(心电图导联连接:固定记录心电活动的电极，连接到MR-6240生物采集实验系统，记录心电图。 【实验项目】 1(开启MR-6240生物采集实验系统，描记对照呼吸、血压和心电图。观察家兔 唇颜色变化，记录呼吸、血压和心电图。 2(轻度缺氧对呼吸、血压和心电图的影响 开起氮气瓶阀门，向缺氧盒注入 0.5-1MP氮气，持续轻度缺氧5-7分钟，观察对呼吸、血压和心电图的影响。a 7分钟左右关闭氮气瓶阀门。 3(中度缺氧对呼吸、血压和心电图的影响 开起氮气瓶阀门，向缺氧盒注入 1-1.5MP氮气，持续中度缺氧3-5分钟，观察对呼吸、血压和心电图的影响。a 然后关闭氮气瓶阀门。 4(重度缺氧对呼吸、血压和心电图的影响 开起氮气瓶阀门，向缺氧盒注入 2-3MP氮气，持续重度缺氧0.5-1分钟，观察对呼吸、血压和心电图的影响。a 然后关闭氮气瓶阀门。 5(窒息对呼吸、血压和心电图的影响 打开缺氧盒上盖，关闭缺氧盒内口，窒 息3-5分钟，观察对呼吸、血压和心电图的影响。然后开放缺氧盒内口。 6(断双侧主动脉神经，重复实验项目2。 7(实验结束后，处死动物。 【实验结果】 表 低张性缺氧对家兔血压、呼吸和ECG的影响 项目 血 压心 率 呼吸频率及ECG 口唇颜色及瞳 (mmHg) 幅度 孔变化 项目1 项目2 项目3 项目4 【注意事项】 1. 缺氧盒与气管插管连接管越短越好，以防止无效腔 的影响。 2. 每次实验前要有对照呼吸、血压和心电图。 3. 缺氧之后，要密切注意动物状态，动物呼吸有可能暂停，及时行人工呼吸。 2 4. 系统标记采用实时标记，以方便查找。 5. 开启时间显示，拆分示波功能(显示对照)。 【思 考 题】 1. 为什么说我们复制的缺氧模型属于低张性缺氧,此模型有何优缺点, 2. 不同程度的缺氧引起呼吸、血压、心电图改变的机理如何, 3. 不同程度的缺氧对循环的影响及机理探讨。 4. 剪断两侧主动脉神经前后，缺氧对呼吸、血压、心电图的影响为何不同, 3 急性心功能不全的药物治疗 【实验目的】 学习制作急性心功能不全的动物模型;观察急性心功能不全时心脏血流动力学参数的变化;观察抗急性心功能不全药物的作用。 【实验动物】 雄性家兔4只，体重2.5kg左右。 【药 品】 20%氨基甲酸乙酯，1,肝素，3%戊巴比妥钠，生理盐水，0.025%毒毛旋花子苷K、速尿、多巴酚丁胺、硝酸甘油、酚妥拉明 材】 【器 D951生物信号采集系统1套，微循环观察仪，压力换能器2个，粗剪刀1把，14cm直手术剪1把，14cm止血钳4把(直、弯各2把)，10cm眼科剪1把，10cm直眼科镊1把，玻璃分针1支，动脉夹1个，静脉夹1个，动脉插管1根，静脉导管1根，气管插管1根，动物呼吸机1台，恒流泵1台，婴儿秤1台，兔手术台1个，纱布，手术丝线，头皮针1支，1ml注射器5支，5ml注射器1支，20ml注射器1支。 【方 法】 、家兔称重，以以头皮针经耳缘静脉注入20%氨基甲酸乙酯5ml/kg麻醉后，1 留置针头，将家兔仰卧固定于兔手术台上。 2、膀胱插管:用充满生理盐水的导尿管(蘸少许液体石蜡)，从尿道插入8cm左右，见有尿液滴出即可。 3、剪去颈部兔毛，沿正中线剪开颈部皮肤，钝性分离皮下组织和肌肉，暴露分离气管及左侧颈总动脉。并于腹股沟分离一端股动脉。 4、经耳缘静脉注入1,肝素1ml/kg。 5、股动脉插管，连接2通道，观察血压曲线。 6、将左侧颈总动脉远心端结扎，近心端以动脉夹夹闭。在结扎点和动脉夹之间靠远心端1/3至1/2间任选一处用眼科剪做一斜行切口，将已注满肝素液的动脉插管朝心脏方向插入血管(注意管内不应有气泡)，连接1通道。 7、用剪刀在气管壁上做一倒T形切口，插入连接呼吸机的气管插管，结扎固定。开启呼吸机，呼吸频率设定为45次/min，呼吸时程比为1.5:1，潮气量为4.5L/min。 8、打开D951实验系统，进入“药理”——“血压”，选定通道，设定灵敏度为1，走纸速度200ms，压缩比例1:1。打开压力换能器的三通阀，点击“采样”。小心松开动脉夹，继续将动脉插管沿动脉方向小心推入左心室(至血压突然下降为“0”，出现陡锐的上升支、波峰平缓为止，此时能明显感觉到导管随心脏跳动而抖动)。 9、测定HR(心率)、LVP(左室内压)、LVEDP(左室舒张末期压)、+dp/dtmax(左室内压最大上升速率)、-dp/dt(左室内压最大下降速率)、t-dp/dt(左maxmax室开始收缩到左室内压上升速率达到峰值的时间)。以+dp/dt作为判断心衰出max现的指标。 10、经耳缘静脉缓慢注入3%戊巴比妥钠，至+dp/dt下降为正常水平的max 4 30%,40%，且5min内无上升趋势，即为急性心功能不全造模成功。继续恒速灌注3%戊巴比妥钠0.25mg/(kg?s)维持心衰状态，收集20min尿量，记录上述各项心脏血流动力学参数的变化，并观察微循环、尿量情况。 11、各组分别经耳缘静脉缓慢注入0.025%毒K(0.25mg/kg)、速尿(2 mg/kg)、多巴酚丁胺(20μg/kg/ml)、硝酸甘油(20μg/kg/ml)、酚妥拉明(1 mg/kg)。观察记录上述各项心脏血流动力学参数及微循环、尿量的变化。 【结 果】 药时间 LVP LVEDP +dp/dt -dp/dt t-dp/dt HR 尿微循maxmaxmax 物 量 环 给药 前 给药 后 【注意事项】 1. 向左心室插心导管时应顺应动脉方向，缓慢轻柔以免刺穿心脏。 2. 使用戊巴比妥钠造模时，速度应缓慢且用量应根据实际情况调整。 【思 考 题】 治疗急性心功能不全药物对心脏血流动力学参数及微循环影响的差异及临床。 5 家兔失血性休克及其实验性治疗 【实验目的】 ? 学习复制家兔失血性休克动物模型。 ? 观察失血性休克家兔的循环、泌尿系统功能和肠系膜微循环改变。 ? 探讨失血性休克的发病机理。 ? 观察高渗高胶对家兔失血性休克的治疗作用并探讨其可能机制。 【实验原理】 休克微循环学说的建立主要基于失血性休克动物模型的研究。失血性休克属于低血容量性休克，是临床上最常见的休克类型。休克的主要病理生理变化 引起重要生命器官血液灌注不足,微循环障碍,导致细胞是有效循环血量锐减, 功能紊乱。因此，改善微循环灌注是治疗休克的重要手段。 本实验采用压力控制出血性休克模型复制家兔失血性休克，观察休克家兔的循环、泌尿系统功能和肠系膜微循环改变，并探讨其发生机制。通过输入高渗高胶溶液抢救休克，观察其疗效并分析其可能的作用机制。 【实验对象】 家兔(性别_______、体重______Kg)。 【实验药品与器材】 氯化20%乌拉坦，0.5%肝素钠生理盐水，生理盐水，微循环灌流液，7.5%钠+ 6%低分子右旋糖酐混合液(即高渗高胶溶液)。 410生物机能实验系统，兔手术台，婴儿秤，大动物手术器械一套，BL- BI-2000A微循环观测系统(恒温水浴灌流盒、解剖显微镜)，静脉输液装置，动脉导管及静脉导管，三通管，输尿管插管，100ml烧杯，储血瓶，注射器(1ml、5ml、20ml、50ml)。 【实验方法与步骤】 ? 实验分组:每实验室分3小组，各取家兔1只，随机分为:?失血性休克组;?高渗高胶溶液治疗组;?生理盐水治疗组。 ? 术前准备:准确称重，由耳缘静脉注射20%乌拉坦(按4ml/kgb.w.剂量)全身麻醉后，将家兔仰卧固定于兔台上，剪去手术野被毛。 ? 颈部手术:切开颈部皮肤，按常规操作，分离气管、左侧颈总动脉和右侧颈外静脉，各穿双线备用。 ? 股三角区手术:左侧或右侧股三角区剪毛，在触及股动脉搏动处沿动脉走向做长约3cm切口，游离股动脉，穿双线备用。 ? 盆腔手术:在耻骨联合上方作下腹部正中切口(长约5cm)，找出膀胱，排空尿液后将膀胱从腹腔轻轻拉出，在背面膀胱三角区找到双侧输尿管入口，分离输尿管，插入输尿管导管，记录每分钟尿滴数。 ? 回盲部肠系膜微循环标本制备:在右侧腹直肌旁作长约6cm的纵行中腹部切口，钝性分离肌肉，打开腹腔，找到盲肠，沿盲肠上寻45cm，轻轻拉~~~出此段回肠及肠袢，平铺并固定于微循环恒温灌流盒内，用显微镜观察肠系膜微循环改变。 ? 静脉插管术:从右侧颈外静脉插入5cm长的静脉导管，以三通管连接输液装置、水检压计分别供抢救输液和测量中心静脉压用。抢救开始前缓慢滴 6 入生理盐水(810滴/分钟)，以保持输液管道通畅。 ~ ? 中心静脉压测定:将水检压计通过压力换能器连接到BL-410生物机能实验系统4通道以测量CVP。测量前先调整水检压计的高度，使其“0”位与心脏在同一水平面，控制三通开关即可直接读取CVP测量值(正常值0?2cmH0)。 2 ? 肝素化:通过右侧颈外静脉插管输入肝素(按2ml/kgb.w.剂量)。 ? 动脉插管术:肝素化后，将动脉导管分别插入左侧颈总动脉和股动脉。股动脉插管通过换能器与BL-410生物机能实验系统相连，以记录血压、心率的动态变化;左侧颈总动脉插管与储血瓶(瓶内装有肝素生理盐水)相连，以备放血用。 ? 观察、记录 手术完毕后5分钟家兔各生理指标:一般情况、皮肤粘膜颜色、血压、尿量、肠系膜微循环等。 ? 复制失血休克动物模型 打开股动脉与储血瓶相连的三通开关，并降 使动脉血压快速降至5.32KPa(40mmHg)，观察并记录低储血瓶高度以放血:? 放血后即刻和放血后5分钟各项指标的变化; ? 5分钟后继续放血，通过调节储血瓶高度控制出血量，使血压稳定在5.32KPa(40mmHg)水平1520分钟。仔细~观察失血期间家兔各指标的变化。 ? 抢救 休克模型复制成功后，停止放血。?失血性休克组不给予任何抢救，继续观察;?高渗高胶溶液治疗组从右侧颈外静脉输入高渗高胶溶液(按4ml/kgb.w.剂量，5分钟内输完); ?生理盐水治疗组同法输入生理盐水;抢救完毕后继续小剂量生理盐水维持静脉通道畅通。分别记录治疗后5分钟、15分钟、30分钟各项监测指标的变化情况。 【实验项目】 ? 一般指标 一般状况、生存时间、尿量 ? 血流动力学指标 动脉血压、脉压差、心率、中心静脉压 ? 微循环参数 微血管内血流速度、血细胞流态、白细胞附壁与嵌塞、微血管口径、毛细血管数/视野。 【注意事项】 ? 本实验手术操作多，应尽量减少手术过程出血，要钝性分离血管和肌肉，避免放血前即发生失血性休克。为减少手术创伤，同一实验室不同实验组可进行适当分工，以保证实验的成功率。 ? 麻醉深浅要适度，麻醉过深可致呼吸衰竭，过浅则不利于手术操作，甚至引起神经源性休克。在正常麻醉状态时,角膜反射抑制,并保持平稳的胸式呼吸。如出现呼吸抑制或深腹式呼吸,说明用药过量。以上麻醉剂量可维持2,3,较好的麻醉状态,如需要继续麻醉可追加原量的1/3。 ? 牵拉肠袢动作要轻，以免引起严重低血压，外周循环衰竭。 ? 注意肝素化，防止凝血，凝血块堵塞各种插管，致实验失败。 ? 保持灌流盒内观察部位肠系膜的温度、湿度、渗透压和PH值恒定，防止肠系膜干燥，以影响微循环结果的可靠性;观察微循环时，注意分清动、静脉和毛细血管，选好标志血管，固定视野，便于前后比较。 【实验结果】 (以下表格仅供参考，可以自行设计实验结果记录方式) 7 表1 家兔失血性休克的血液动力学指标变化 血 压心 率 中心静尿 量 微循环状态 (mmH(次/分) 脉压(滴/分) 血液流血管直血管数 g) (CVP速 径 量 ) T 1 T 2 T 3 T 4 注: T---第一次放血，血压为40mmHg时; T---第一次放血后5分钟; 12 T---第二次放血，血压为40mmHg时; T---第二次放血，血压为40mmHg后2034 分钟。 表2 高渗高胶溶液对家兔失血性休克的治疗作用 血 压心 中心静尿 量 微循环状态 (mmH率 脉压(滴/血液流血管直血管数 g) (次/(CVP分) 速 径 量 分) ) 5分钟 高 渗15分 高钟 胶30分 组 钟 生5分钟 理15分 盐钟 水30分 组 钟 【思 考 题】 ? 第一次放血使动脉血压降至40mmHg时，血压是如何改变的,为什么, ? 试根据本实验分析失血性休克发生、发展的过程及其机制。 ? 输入高渗高胶溶液抢救休克有无疗效，为什么, ? 自行设计几种失血性休克的抢救。 【参考文献】 ? 张希贤主编.病理生理学指导.北京:科学技术文献出版社，1988，7374 ~ ? 罗正曜主编.休克学.天津:天津科学技术出版社，2001，680687 ~ ? 梅建民.高渗盐水右旋糖酐抗失血性休克机理的研究进展.国外医学 创伤与外科基本问题分册，1994;15(1):1012 ~ 8 【英文专业单词】 shock，hemorrhagic;microcirculation;saline solution，hypertonic;dextrans;hypertonic-hyperoncotic solution，HHS;Central venous pressure, CVP . 附: 1.在微循环观察中,可清晰地观察到休克前后微动脉、微静脉的血流方向及血液流态,血液流态可分为七级:线流?(最快)、线粒流?(较快)、粒线流?(较慢)、粒缓流?(慢)、粒摆流?、血流停滞?、血流消失?。 2. CVP、BP、尿量变化的原因及处理原则 CVP BP 尿量 原 因 处 理 低 低 少 血容量严重不足 快速扩容 低 正常 好转 血容量相对不足 适当扩容 高 低 少 心功能不全或血容量相对不足 强心、利尿 高 正常 正常 心功能尚好、输液过多 限液、利尿、 正常 低 少 心功能不全或血容量相对不足 补液试验后用药 9