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尿蛋白定性与定量方法比较分析

2017-09-21 7页 doc 22KB 134阅读

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尿蛋白定性与定量方法比较分析尿蛋白定性与定量方法比较分析 摘要,目的 比较,UPRO,定性与定量方法测定尿 蛋白的符合率。评价尿蛋白的临床常见定性和定量检测方法 对蛋白尿的诊断价值。方法 用试带法,定性,和比浊法,定 量,、比色法,定量,测定尿蛋白。分别用两种方法同时检 测一定数量标本,进行符合率比较。结果 尿总蛋白低于 1.63g/24h时,其与尿蛋白定性实验的阳性符合率为 52.24%,微量白蛋白大于300mg/L时,尿蛋白定性实验的 阳性符合率为98.47%,微量白蛋白100,300mg/L的患者 共有61例,尿蛋白定性实验的阳性符合率为21.3...
尿蛋白定性与定量方法比较分析
尿蛋白定性与定量方法比较 摘要,目的 比较,UPRO,定性与定量方法测定尿 蛋白的符合率。评价尿蛋白的临床常见定性和定量检测方法 对蛋白尿的诊断价值。方法 用试带法,定性,和比浊法,定 量,、比色法,定量,测定尿蛋白。分别用两种方法同时检 测一定数量标本,进行符合率比较。结果 尿总蛋白低于 1.63g/24h时,其与尿蛋白定性实验的阳性符合率为 52.24%,微量白蛋白大于300mg/L时,尿蛋白定性实验的 阳性符合率为98.47%,微量白蛋白100,300mg/L的患者 共有61例,尿蛋白定性实验的阳性符合率为21.31%。结论 尿蛋白检测各种方法都存在一定的优缺点,在检测尿蛋白时 需要结合具体的临床情况来选择合适的方法 关键词, 尿蛋白,定性检测,定量检测 Comparative Analysis of Qualitative and Quantitative Methods of Urine Protein XUE Xia,SHEN Ying,SHAN Yong-mei,LI Dong ,Department of Clinical Laboratory,Shanghai Tongji Hospital,Shanghai 200065,China, Abstract,Objective To compare ,UPRO, qualitative and quantitative method for the determination of urinary protein. To evaluate the diagnostic value of urine protein in the diagnosis of proteinuria. Methods Using the method of the test with the method ,Qualitative, and the ratio of the turbidity method ,Quantitative,, colorimetric method ,Quantitative, for the determination of urinary protein. Two methods were used to detect a certain number of specimens, and the coincidence rate was compared. Results When total urinary protein lower than 1.63g/24h, the positive coincidence rate with qualitative urine protein test was 52.24%, microalbuminuria is greater than 300mg / L, uric albumen is qualitative experiment positive coincidence rate was 98.47%, albumin 100mg / L , 300 mg / L with a total of 61 people, uric albumen is qualitative experiment positive with rate was 21.31%. Conclusion There are some advantages and disadvantages of all kinds of methods for detecting urine protein. In the detection of urine protein, it should be combined with the specific clinical situation to choose the appropriate method. Key words,Urinary protein,Qualitative detection, Quantitative detection 在尿液的化学成分的检查中,蛋白质是十分重要的项目 之一。在正常情况下,由于肾小球滤过膜的滤过作用和肾小管的重吸收作用,终尿中的蛋白质含量是很少的,仅仅为30,130mg/24h。随机尿的尿蛋白定性实验一般是阴性的,含量为0,80mg/L。蛋白尿是指尿蛋白定性实验呈现阳性,此时,尿液中的蛋白质含量大于100mg/L或者超过150mg/24h[1]。蛋白尿的测定是管理肾病患者的核心部分,且在诊断和监测浆细胞病、血管内溶血性疾病、急性肌肉损伤、酶类增高性疾病有重要意义,还与膀胱以下的泌尿系统疾病有关,如结石、炎症、肿瘤等。在进行尿蛋白的测定时,应对具体情况进行具体分析,综合考虑到各种影响因素,选择最为适宜的方法。本文就目前尿蛋白检测的常用方法对蛋白尿的诊断价值进行评价,具有十分重要的临床意义 1资料与方法 1.1 一般资料 1.1.1 主要试剂 韩国盈东试带条,国药管械字2002第3040009号,由酚蓝试剂以双面胶黏附于聚氯已烯片基上构成,100根/筒,10筒/盒,、西门子白蛋白测定试剂盒,兔抗人血清白蛋白试剂,、尿总蛋白检测试剂盒,由,O道公司出品, 货号,UP1571,试剂盒主要成分包括60mol/l焦,,酸红 、40mol/l钼酸二钠、150mmol/l琥珀酸、1 mmol/l草酸钠、3 mmol/l安息香酸钠, 1.1.2 主要仪器 盈东尿液分析仪,URISCAN PRO, 、 西门子特定蛋白分析仪,BN II,、722分光光度计 1.2 方法 1.2.1 尿蛋白定性检测方法 试带法,在pH3.0的强酸环境下,蛋白质自身的阳性离子能与溴酚蓝的阴性离子反应生成复合物,生成复合物后会引起酸碱指示剂溴酚蓝的进一步电离,这时,指示剂将会发生颜色的变化。蛋白质的含量与指示剂颜色变化的深浅是呈正相关的。采集尿液时最好采集条件相对恒定的晨尿,应留取10ml新鲜的清洁尿液,需要置于一次性的清洁的有盖容器。 1.2.2尿蛋白定量检测方法 1.2.2.1比浊法,散射比浊法, 在免疫化学反应中,尿液中的蛋白质与相应的抗体在某种电解质溶液中发生特异性反应,形成小分子的免疫复合物,利用某种增浊剂使其迅速形成较大分子的免疫复合物微粒,>19S,,这些复合物会使得穿过标本的光束发生散射,散射光的强度与尿液中相关蛋白的浓度成正比。适用的标本为人的新鲜尿液,注意不得冷冻尿液,而且每份尿液在检测前都必须经过离心沉淀 1.2.2.2比色法 在含有钼酸盐离子的酸性环境中,焦,,酸红复合物与蛋白质反应。反应生成的蓝色复合物,该蓝色复合物在600nm处有最大吸收值。因此,标本在600nm测得的光密度与蛋白质浓度是成比例的。该方法需要采集24h尿液,放在以甲苯作为防腐剂的干净的容器中,且要准确量 出其体积 1.2.3研究方法 1.2.3.1比较24h尿总蛋白与尿蛋白定性实验 选取上海同济医院2015年2月,5月,在同一天进行这两项检测的患者且两项检测中有一项大于参考范围,共有67例,对检测结果进行分析 1.2.3.2比较微量白蛋白与尿蛋白定性实验 选取上海同济医院2015年2月,5月,在同一天进行这两项检测的患者且两项检测中有一项大于参考范围,共有368例,对检测结果进行分析 1.2.3.3比较微量白蛋白与24h尿总蛋白检测 选取上海同济医院2015年2月,5月,在同一天进行这两项检测的患者且两项检测中有一项大于参考范围,共有72例,对检测结果进行分析 2结果 2.1比较24h尿总蛋白与尿蛋白定性实验结果 67例患者检测中,当24h尿总蛋白未检出时,尿蛋白定性实验阳性患者为0例。24h尿总蛋白检出,当24h尿总蛋白低于1.63g/24h时,其与尿蛋白定性实验的阳性符合率为52.24%,结果见表1 2.2比较微量白蛋白与尿蛋白定性实验结果 微量白蛋白大于300mg/L时,尿蛋白定性阳性患者有129例,尿蛋白 定性阴性患者有2例,尿蛋白定性实验的阳性符合率为98.47%,微量白蛋白100,300mg/L的患者共有61例,其中尿蛋白定性阳性患者有13例,尿蛋白定性阴性患者有48例,在此微量白蛋白含量的范围内,尿蛋白定性实验的阳性符合率仅仅为21.31%,结果见表2 2.3比较24h尿总蛋白与微量白蛋白定量实验结果 同时进行24h尿总蛋白与微量白蛋白检测的72例患者中,24h尿蛋白阴性时,微量白蛋白大于30mg/L的患者有0例,24h尿蛋白阳性时,微量白蛋白大于30mg/L的患者有50例,而小于30mg/L的患者有22例。结果见表3 3讨论 尿蛋白定性实验中的试带法的最小检测量为100mg/L,而在微量白蛋白0,100mg/L的172例患者中,尿蛋白定性阳性患者有8例,而试带法检测的主要蛋白成分是尿液中的白蛋白,所以这8例患者可能出现了假阳性结果,或者存在其他可以检测的蛋白成分。微量白蛋白大于300mg/L时,尿蛋白定性阳性患者有129例,尿蛋白定性阴性患者有2例,尿蛋白定性实验的阳性符合率为98.47%。微量白蛋白100,300mg/L的患者共有61例,其中尿蛋白定性阳性患者有13例,尿蛋白定性阴性患者有48例,在此微量白蛋白含量的范围内,尿蛋白定性实验的阳性符合率仅仅为21.31%。由此,可以看出科室存在的尿白蛋白检测阳性而尿蛋白定性阴 性的问,并发现了300mg/L这个比较有意义的界限,即在微量白蛋白低于300mg/L时,尿蛋白定性实验存在较为严重的漏检现象,出现这一现象的原因有待进一步观察和探讨 同时进行24h尿总蛋白与微量白蛋白检测的72例患者中,24h尿蛋白阴性时,微量白蛋白大于30mg/L的患者有0例,24h尿蛋白阳性时,微量白蛋白大于30mg/L的患者有50例,而小于30mg/L的患者有22例,这是由于24h尿总蛋白除了可以检测出白蛋白外,还可以检测其他蛋白成分 尿蛋白试带法可用于尿蛋白的定性或者半定量检测,主要用于尿液分析仪,也可以用于肉眼观察。该方法操作十分简便、快速、也易于化。不同类型的试带的灵敏度是存在差异的,一般为70,100mg/L,这与使用的酸碱指示剂是有关的[2,3]。试带法对尿中白蛋白敏感,尿中球蛋白的灵敏度仅仅为白蛋白的1/100,1/50,这样会容易使得本周蛋白漏检 尿蛋白定量检测方法较多,常用的有比浊法、比色法、酶联免疫分析法、放射免疫分析法、尿蛋白电泳等。酸沉淀比浊法灵敏度高、操作简便,但缺点是存在较多影响浊度大小的因素,而且各种蛋白质形成的浊度也具有较大的差别,因此临床上大多使用免疫比浊法[4],以散射比浊法居多,该法检测速度快、稳定性好、灵敏度和精确度高,但是仪器和试剂价格比较贵,对抗体的质量要求也比较高。双缩脲比色 法特异性较好,各种蛋白质的呈色一致性也比较好。此法的检测范围是10,120g/L,灵敏度不高,适合血清总蛋白浓度和胸腹腔积液总蛋白浓度的测定,但是对于蛋白质浓度比较低的尿液来说并不是合适的定量方法[5]。酚试剂比色法的灵敏度高,但易受还原性化合物的干扰,如糖类、酚类、带-SH的化合物等,,而且由于各种蛋白质含有的酪氨酸和色氨酸的量不同,如球蛋白的色氨酸含量为2%,3%而白蛋白的色氨酸含量为0.2%,所以此方法不适合用来测定混合蛋白质,仅仅适合测定单一蛋白质。染料结合比色法简便、灵敏、快速,但存在试剂吸附于比色杯、不同蛋白质与染料的结合力不一致的问题[6]。酶联免疫分析法灵敏度、特异性高,可检测几乎所有可溶性抗原抗体系统,且标记试剂稳定,无放射危害[7]。放射免疫分析法法灵敏度、特异性、精密度、准确性高,但是放射核素有一定的危害性[8]。尿蛋白电泳主要用于确定尿液中蛋白质的种类及分子量大小,可用于诊断评估特定的临床疾病并了解肾脏病变程度 检测尿蛋白是肾病以及其他有蛋白尿指征患者管理的关键,因此选择合适尿蛋白的检测方法具有重要的临床意义。尿蛋白检测各种方法都存在一定的优缺点,在检测尿蛋白时需要结合具体的临床情况来选择合适的方法,像健康体检、初次就诊患者、疾病筛检、现场快速检测等,可以采用试带法或磺基水杨酸法,当进行疾病的确认诊断、疗效的观察或 者预后的判断时,最好采用尿蛋白定量检测和特定蛋白质的分析 参考文献, [1]寇筱囡. 尿蛋白定性与定量检测方法分析[J]. 中国现代药物应用,2012,05,43-44. [2]顾可梁,吴晓生. 尿蛋白检测方法的选评[J]. 临床检验杂志,1988,01,37-39. [3]宓方元,张永苗. 五种尿蛋白定量方法的比较[J]. 临床检验杂志,1988,02,75. [4]路顺德,张淑芳. 4种方法检测尿蛋白的体会[J]. 检验医学与临床,2005,01,23-34. [5]张晓梅,胡肇衡,梁红. 微量白蛋白尿不同测定方法的比较[J]. 中国医药导刊,2007,03,186-188. [6]张春兰,鲁春霞. 临床尿常规检验方法对比分析[J]. 医学信息,上旬刊,,2011,04,1986-1987. [7]万丹,高轶峰,齐艺. 不同尿标本尿蛋白的检测结果分析[J]. 保健医学研究与实践,2015,01,56-57. [8]周琼芝,王玉明,郭,,刘华,周胤余. 尿蛋白定性与定量检测结果的差异性和相关性分析[J]. 现代生物医学进展,2014,04,744-747.编辑/冯焱
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