HPLC法测定香莲化滞片中阿魏酸的含量

HPLC法测定香莲化滞片中阿魏酸的含量 HPLC法测定香莲化滞片中阿魏酸的含量 ? 58? 现代中医药 ModernTraditiona1ChineseMedicine 2008年1月第28卷第1期 Jan.2OO8Vo1.28No.1 -fg.滞片中FO"魏酸的含量 HPLC法测定香莲 肖培云杨永寿刘光明 (云南大理学院药学院,云南大理671000) 摘要:目的建立HPLC法测定香莲化滞片中阿魏酸的含量.色谱条件:AgilentZORBAXSBC色谱 柱(4.6×150mm,5I.Lm),流动相为甲醇一0.1%磷酸水溶液,在0,15rain内梯度洗脱(20:80至45:55),检测波 长为322nm,流速为1.0mL/min,柱温为30?.结果阿魏酸在0.0101—1.O1Ia,g范围内线性关系良好,r值为 09999,平均回收率为99.66%,RSD为0.57%.结论本法操作简便,快速,分离效果好,稳定性高,重现性好, 为全面控制香莲化滞片的质量提供了一个可靠的方法. 关键词:高效液相色谱法:香莲化滞片;阿魏酸 中图分类号:R284.2文献标识码:B文章编号:1672—0571(2008)01—0058—02 DeterminationofFerulicAcidinXianglianhuazhiTabletsbyHPLC XiaoPeiyun,YangYongshou,LiuGuangming (FacultyofPharmacy,DaliUniversity,DaliYunnan671000,China) Abstract:0bjectiveToestablishedamethodfordeterminationofferulicacidinXianglianhua zhiTablets.Method ThechromatographicconditionforferulicacidwasthattheAgilentZORBAXSBCJ8(4.6× 150mm,5m)wasused,the mobilephaseconsistedofCH3OH—H2O(0.1%H3PO4),gradientelution(CH3OH%:Omin20%,15.rain45),the UVwavelengthofferulicacidwas322nm,theflowratewas1.0mL/min,thetemperatureofco lumnwas30?.Reset ferulicacidwasgoodlinearityovertherangeof0.0101—1.O1Ia,g,(r=0.9999)ITheaveragerecoverieswasintherang— erof99.66%,RSDwas0.57%.ConclusionThemethodissimple,sensitive,accurate,reprodu cibleandcanbeused tocontrolthequalityofXianglianhuazhiTablets. KeyWords:HPLC,XianglianhuazhiTablets,ferulicacid 香莲化滞片是由黄芩,当归,白芍,木香,陈皮, 槟榔等十二味中药经加工制成的中药制剂.具有 调中化滞,止痛止痢的功效.用于红白痢疾,里急 后重,肚腹绞痛,停滞不消,效果显着.现行部颁标 准中无含量测定项.且处方中当归中所含的阿魏酸 为主要有效成分?J,本实验根据阿魏酸的理化性 质,建立了高效液相色谱法测定香莲化滞片中阿魏 酸的含量.结果表明,此法操作简便,结果准确可 靠,可用于该药的质量控制. 1仪器和试药 Agilent1100高效液相色谱仪,G1315A/BDAD 检测器,G1313AALS自动进样器,Agilent1100色 谱工作站(美国安捷伦科技有限公司);梅特勒电 子天平AE240(瑞士);SZ一97自动三重纯水蒸馏 器(上海亚荣生化仪器厂);超声波清洗器(上海科 导超声仪器公司).甲醇(色谱纯),水(重蒸馏纯 净水),阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所, 批号110715—200413);香莲化滞片(大理白族自 治州中药制药股份有限公司). 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:AgilentZORBAXSBC (4.6×150mm,5Ixm);流动相:甲醇一水(含 0.1%磷酸)的比例在0—15min内由20:80至45: 55;流速:1.0mlMmin;柱温:30oC;检测波长为 322nm_2J.在该色谱条件下阿魏酸被洗脱且达到 基线分离,保留时间约为12.812min.按阿魏酸峰 计算理论塔板数不低于5000.对照品,样品及阴 性对照色谱图见图1. 2008年1月第28卷第1期 Jan.2008Vo1.28No.1 现代中医药 ModernTraditionalChineseMedicine?59? A 图1高效液相色谱图 A.对照品;B.供试品;C.阴性对照 2.2对照品储备液的制备精密称取阿魏酸对照 品5.05mg置5mL的容量瓶中,加甲醇溶解并定 容,摇匀,作为储备液. 2.3供试品溶液的制备取供试品10片,精密称 定,求出平均片重,研细,过5号筛,取约0.5g,精密 称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,密塞, 称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,并用 甲醇补足损失重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得. 2.4阴性溶液的制备按处方制备不含当归的片 剂,再按供试品溶液的制备方法制成阴性溶液. 2.5线性关系的考察精密吸取阿魏酸对照品贮 备液,用甲醇配制成质量浓度为0.00101,0.00505, 0.0101,0.0505,0.101mg/mL系列对照品溶液. 取上述5种溶液在选定色谱条件下分别取10 进样,记录峰面积.以质量浓度为横坐标,峰面积 为纵坐标,绘制曲线,并进行线性回归,阿 魏酸的回归方程为: C 5e !?; J—一,舱\.I…, 二::二至:二蠹二莶 线性范围为0.0101—1.O1g. 2.6精密度试验取阿魏酸对照品溶液(0.0101mg/ mL),连续进样6次,分别测定峰面积,计算得RSD 为0.11%.表明精密度良好. 2.7重复性实验按上述供试品制备方法及色谱 条件操作,取同一批样品(批号070417),制备5份 供试品溶液,依次进样测定阿魏酸的含量,结果阿 魏酸含量平均值为158.1I~g/g,RSD为1.54%. 结果表明本实验重复性良好. 2.8稳定性试验取同一供试品溶液分别于0, 2,4,6,8h进样10,按上述色谱条件测定阿魏酸 的峰面积,RSD为2.01%.结果表明供试品溶液 在8h基本稳定. 2.9加样回收率试验取已知含量的样品(批号 070417)粉末约0.25g,分别精密加入阿魏酸对照品 溶液,按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液,依 法测定,计算回收率,结果见表1.结果表明,本实验 Y=3560.5X+0.07,r=0.9999;确立的提取方法与处理方法回收率较好. 表1回收率试验结果(n=5) 2.10样品含量测定采用上述供试品溶液制备 方法及色谱条件,对3批样品中的阿魏酸含量进行 测定,结果见表2. 表2样品含量测定结果(n:3) 3讨论 本实验为确定测量波长,对阿魏酸对照品溶液 在200—400nm范围内进行扫描,阿魏酸在320nm 处有最大吸收.为了使各组分达到吸收强,干扰小 的目的,选择在322nm测定阿魏酸. 本品组方较复杂,相互干扰因素多,经多次试 验,采用本文所报道的色谱条件分离效果好,理论 塔板数高,重现性好,能有效控制本品质量. 本实验曾采用乙腈一水(0.1%磷酸)作流动相 进行梯度洗脱,结果表明,分离度较差.用甲醇一水 (0.1%磷酸)进行梯度洗脱,分离度和峰形均较好. 参考文献 [1]中华人民共和国卫生部药品标准.中药成方制剂(第15 册)[S].1997:131. [2]国家药典编委会.中国药典(一部)[M],北京:化学工 业出版社.2005:89. (收稿日期:2007—09一O5) |!}???_,}__I耵 .H?.z1搿 ? l