【doc】二阶导数光谱法测定脑活素注射液中色氨酸的含量

【doc】二阶导数光谱法测定脑活素注射液中色氨酸的含量 二阶导数光谱法测定脑活素注射液中色氨 酸的含量 7 瑶酸, 氨睦,,/,7 二阶导数光谱法测定脑活素注射液中 色氨酸的含量 胡国华周望珍(武汉市药品拴礁) /一硬{互一 摘要用二阶导数光谱法测定脑活素注射液中色氨的含量,可以消除谈注射 液中其它成份对其干扰.以水作曲参比t波长遗:~282.0rim(峰),285.2rim(谷), 色氯酸测定浓度0,05mglml,线性头系良好,回归方程D=94.585C--=0.OIIl r=0.9999平均回收率.()100.6(n=5CV()=1.2) 脑活素注射液(奥地利依比威公司生 产)是由动物器官经水解提取制得,内含16 种氨基酸,对其含量可采用氨基酸分析仪测 定,但色氨酸不能测定l做甩偶台}匕色. 法"测定,但烦琐费时,而直接分光光度 法】[测定因受该注射液中其它蛆分的干 扰,本文用二阶导数光谱法测定色酸含' 量,能除去干扰,获得满意结果. 一 ,仪器与试药 岛津UV一260分光光度计一 十六种氧基酸t均待台日本味之素质量 1983年的规定) 样品脑活素注射液(奥地刹) =,实验条件的选择' 1.零阶光谱与二阶导数光谱的测定, 取脑活素注射液适量,加水制成每ml含色氯 酸为0.03rag的溶液[溶液I],取l6种氮基 酸,榛拟脑活素注射液中氨基酸的配方制成 含色氮酸0.03mg/ml的溶液[溶液I]'取色 氨酸适量加水翩成每m1含0.0,3mg的溶液,溶 液I]1分别精密称取l6种氨基陵(不含色 . 氨酸)犋拟处方氨基酸浓度配制成溶液[溶液?].取上述四种溶液在200~300nm波长 范围内扫描零阶导数光谱图(见图1)和二 阶导数光谱图(见图2).由图l看出' 固I图2 [溶液I]与[溶液1],[溶液I]的零阶导数 光谱图不同}(溶液1]在278?II'.111波长 处不显示色氨簸的最大吸收.由图2看出 [溶液I),(溶液?],[溶液I]的二 阶导数光谱图几乎重合.(溶液?]在该波 长范周内为一直线. 2.测定信息的选择及仪器条件,由实 验结果表现,选择282.0nm(峰)与285.2rim (谷)为测定波长,以这两个波长峰,谷闻 的距离一导数振i幅D值为定量依据,扫描速 度l快速:波长10nm/cm狭缝1.0cm. 3.线性关系试验 精密称取色氨酸适量,用水制成一系列 色氨酸浓度LO,O.05mE/me)的水溶液, 按上述所选定的波长测定振幅D值,结果见 表一,以浓度C(mg/mI)对振幅D计算回 归方程为D=94.585C—O.0111r=O.9999 囊一', 鼍器m1)"叫0.92t11"娟 振幅D恒JI.i.}?.J0.3i0J.?oe?轧' 4.加样回收试验 精密量取脑活素注射液2ml(含色氨酸 约0.9mg),另精密加色氨酸约0.9mg,置 50ml量瓶中,加水稀释至刻度,按本文拟定 的条件测定.(模拟处方配制i崭氟基 酸溶液(不含色氮瞍)在285.2nm及282.Onm 波长处测定振幅D值为零),结果见表二. 囊二 D.87BO.BTTlOO.I D.942O.9481OO.B ioo.B?I.2 0.口45o.9621OI.8 ?盯o.口曲1O0.2 O.9iZ0.9i5l0O.3 ?为已诫击注射捕赢古有色氟畦]to.9Btmg(2mt) 三,实验方法和结果 1.对照品溶液的制各t精密称取色氨 酸约O.03g,置100mI量瓶中,加水适量使 溶解并稀释至刻度t精密量取5mI,置5n mI量瓶巾,加水稀释至刻度(O.03mg/m1), 摇匀,即得. 2.供试品溶液的制备t精密量取脑潘 素注射液5ml(0.3mg/m!),置6OmI最瓶 中,加水稀释至刘度(0.o3m~/m1)摇匀, 印得. 3.测定法分别取对照品和供试品溶 液在275,300nm波长范围绘制二阶导数光 谱图,读取282.O11111与285.2nm波长处的振 幅D值. 按本文拟定的方法(三,实验方法和结 果项下)测定了5批进口样品,结果见表 兰.其结果与国外厂商的分析结果吻合. 毫三 批号定粜?(mz/=1)臭地利依比威 日2O28IO.4To. ?2Js30o.46O.48 ?j0S8:'.47D.6I 9203BS0.4TO.6Il ~i786[O.440.B' ?为=元平均擅 四,小培. 1.脑活素注射液中的色氨酸取其它组 份的干扰在紫外【278?1nm)无特定吸 收,故不能用紫外分光光度法直接钡0定. 2.用二阶导数光谱法测定,消除了其 它蛆份对测定的干扰. 3.本洼具有操作简便,灵敏,快速等 优点. 参考文越 I.林癌走崩萍屠《氟基觳帮意》3.口一is.I98s. 2.酾北省药品标准ic鞠6'两.l981年. 3.酾北省药品标准jT'.175甄.198晦. '.鬻?堆辱I苛袖井折囊宣I?:"):I晦.ills&