中药丁香体外抑制人巨细胞病毒作用研究

中药丁香体外抑制人巨细胞病毒作用研究 粥御' 解放军医学杂志1997年2月第22卷第1期MedJChinPLAVol22No11997 中药丁香体外抑制人巨细胞病毒作用研究 100039北京解放军第302医院刘洪貌吩勇洪世重鞠连才白雁平 -__?—一 关键词植物,药用人巨细胞病毒{体外抗病毒作用 中国图书资料分类号R2827 人巨细胞病毒(HCMV)感染播及广泛,它可引 起肺炎,肝炎,胃肠炎,新生儿疾病等.对于免疫功能 尤其是器官移植和艾滋病患者,一旦发生 低下, HCMV肺炎则病死率极高.目前尚无特效药物能够 预防和控制其感染.作者在寻找抗病毒中草药的体 外实验中,发现丁香水煎剂有明显的抑制HCMV 增殖的作用 1材料与方法 细胞使用本室筛选对HCMV敏感的人胚肺纤 维细胞培养物.HCMVAD株由中国预防医学科 学院病毒研究所提供. 丁香(SA)煎剂含生药4O,以3000r/rain离 心3Omin去沉淀,经除菌过滤后置4C保存备用.实 验时用维持液稀释至不同浓度.将SA作不同浓度 (1:10,1:50,l:1OO,1:200,1:500,1:1000,1:2000) 稀释后,分别加入生长良好的单层细胞中作用4天, 同时设不加SA的对照细胞.取无明显细胞毒性 现的SA最低稀释度为抗病毒试验的起始浓度. 药物抗病毒试验分4组.第1组病毒和SA混合, 置37.C水浴作用2h后,加入细胞管,第2组SA处 理细胞24h后弃原液,洗30:后接种病毒;第3组SA 与病毒同时加入细胞层;第4组感染后给药,即先加 病毒液,37.C作用2h,洗去病毒后加SA分别作用 不同时间. 2结果 21SA对细胞的毒性作用SA1:1oR1:50稀释 时,对人胚肺纤维细胞显示明显的毒性,细胞普遍圆 缩,有的甚至脱落;1:100稀释时胞浆颗粒增多,纤维 变宽;1:500以上稀释,细胞形态与对照管无明显区 别. 2.2SA对病毒直接杀灭作用试验结果见表1. 表1SA对HCMV的直接杀灭试验结果 2.3SA对病毒感染的阻断作用用不同浓度的 ?73? 尺27一 SA处理细胞24h后再感染病毒,结果除1:100组 CPE出现迟缓且病毒数量很少外,其余几组与病毒 对照组接近. 2.4SA抑制病毒增殖的作用SA能明显抑制 HCMV的增殖,且抑制强弱与药物浓度l及作用时间 有关,这一结果与实验中SA和扁毒同时加入细胞 并持续用药组所出现的抗病毒效果相吻合(表2). 表2不同SA浓度和作用时间对HCMV感染滴度的抑制 3讨论 中药丁香为桃金娘科植物丁香的花雷,主含丁 香酚,,丁香烯,乙酰丁香酚,具有抗菌消炎,抗肿 瘤等功效,临床上用于治疗胃脘作痛,消化不良,急 性黄疸性肝炎及乙型肝炎等疾病. 本实验设两组在病毒接种前以不同浓度的SA 处理细胞或病毒,试图封闭细胞受体或病毒抗原,结 果显示,在无细胞毒性作用的范围内,该药不能直接 杀灭病毒或阻止敏感细胞的侵染.但当SA浓度大 于1:100倍以上时,SA具有直接灭活HCMV作用; 用1:100稀释的SA处理细胞后再接种病毒,能明显 地延缓CPE出现并降低病毒感染滴度,这可能是由 于SA对细胞的毒性作用使细胞不敏感而引起的 "抗病毒"现象. 另两组实验表明,在病毒接种的同时或吸附后 持续给药或作用不同时间,均可明显抑制HCMV 的增殖.且抑制作用随药物浓度的提高而相应增高, 其有效抑制浓度是于1:500,1:1000之间,对 HCMV抑制滴度为100TCID根据SA在感染细 推测该药可 胞内作用不同时间所出现的不同效果, 能抑制了HCMV复制环节而发挥抗病毒作用.提 示,当体内发生HCMV感染时,持续服用丁香小煎 剂可能具有治疗作用. (1996-03—18收椿) (本文编辑李恩江)