【doc】吗啡和海洛因等生物碱的高效液相色谱化学发光测定

【doc】吗啡和海洛因等生物碱的高效液相色谱化学发光测定 吗啡和海洛因等生物碱的高效液相色谱化 学发光测定 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 第u期 1295,1297 吗啡和海洛因等生物碱的高效液相色谱化学发光测定 ,万秀琴吕'n62./ ——?画西毳而学系,西安716061)L/:, , 6? l1r摘要研究丁吗啡,可待困,o单乙酰吗啡和拇括固等生物碱在多聚磷酸介质中与高锰酸7 钾的敖光行为和光谱现象.建立了厦相高赦液相色谱化学发光检测吸毒者尿液和鸦片中吗 一11虽低可测浪废)对于经酸解{尿样再经确机溶剂提取)的样品中吗啡,可待田等生物碱 l弓 关键词高锰酸钾'韭?可待围'逛堕里二单乙酰吗啡. 噬讯 吗啡和海洛旧等生物碱的测定在临床医学,法医科学,兴奋剂检测等领域内恩有重要意 义.其测定方法以包潜法较为常用."化学发光法对吗啡的检测已见过报道,但裂敏 度太低.丽海洛冈,可待因和O单乙酰吗啡的化学发光检测法还未见报道.本文研究了在酸 性赍质{,高锰酸钾与上进几种生物碱的发光行为建立了HPLC—CL检测生化样品中吗啡,r 待,海咯固和()单乙酰吗啡的快速,晁敏,准确的方法.方法的线性范围较宽(2,4个数 级).相对际准偏差均低于1.8,样品测定的回收率均在95,98问.流动相不需脱气处 理.脉动对发光信号不产生影响应用本方法对吸毒者尿液和鸦片等实际样品测定.取得满意 的赦果 2实验部分 2.1仪器和试剂 LC6A高效液相包谱仪(Shimadzu,Japan).7125型进样器(上海科学仪器厂).LS一50发 光仪(PE,U.S.A).八通道蠕动泵(沈阳仪器二厂).化学发光检l捌仪(自制),记录仪(上海夫 华仪器厂).包谱流2Il液与发光试液经三通管混合后直接通入化学发光检1侧仪中 吗啡,海洛因,罂粟碱,可待因O单乙酰吗啡(赡自中国生化药物检测胼)皆用0.1mol/I 的盐酸溶液配制成1.0×10g/L的贮备液;高锰酸钾(GP),多聚磷酸(AR).硫酸(GP).硝 酸(AR).盐酸(AR).氯甲烷(AR).异醇(AR)甲醇(AR).所用水均为二次去离于水. 2.2操作步骤 取…定最1.O×10g/!的吗啡贮备诫.稀释成备数量级浓度的工作液,取251进忭. 洲峰高.绘制工作曲线. 19951121li商{199-a42z接量 乐国宋自然科学基金资助呵日. 一 \\ 巷j{}蚋茎1 l296分析化学第2l 3结果讨论 3.1发光条件选择 3.1.1高锰酸钾的浓度选择 范啊.本文在吗啡不同浓 度范日内.选取不同浓度 的高锰酸钾作为氧化剂 3.I.2酸介质及其浓度 的选择KMnO在酸性 介质条件下能与吗啡等生 物碱反应产生化学发光. 本文对:同的酸介质进行 T筛选,:硫酸,盐酸, 6I1酸和乙酸等介质中产生 的发光信号皆远小于在爹 聚磷酸中所产生的信号. 酸的浓度对发光也有影 KMnO的浓度不仅影响测定的灵敏度,而且还影响}碴I定的线州: 圈l多聚磷酸斌度对化学发光强度的影响 Fig.1Intem-fityofchemiluminescenceagainstHFP1O1|conceCTttrRtioH 1.在承溶制中(Watersolvent);z.在水一有机幌台溶剂中(Wftter—urga~iemixedsol wnt). uh图1).本文选择多聚磷酸的浓度为1,0mol/L.另外还发现环糊精对发光信号有明显的 增强效应.因此以0.O05moi/L的环糊精作为增敏剂. 3.2色谱条件选择 3.2.I流动相的优化选择通常对吗啡等生物碱的分离多采用反相色谱.其流动柑涵常为 乙腑.不仅价格昂贵.而且gCKMnO一HP0r吗啡化学发光体系产生扳大的抑制. 本文用甲 取代乙睛.在泵速为1.2mL/mln的情况下,以l乙酸胺作为缓冲溶剂(prt5.0,5.8),对f{J 醇在流动相巾的含量进行考查.发现lO甲醇的乙酸胺溶液作为流动相分离效果最好. 3.2.2实际样品的色谱分离本文在确立了检测体系和分离体系后,对实际样品f弁成 .,吸毒者眼液和鸦片)进行分离测定,效果较 为满意.困2为台成样品的分离情况,儿荼酚 脓,酸和Vc等不干扰删定. 3.3线性范围和检出限 搿椠中i三要的生物碱除嚣粟碱外均可用 KMnO.IhP…o悼系进行删定,几种生物碱的 皎准[IIf线方程及捡出限等有关参数列于见表 1. 3.4样品分析 对经预处理过的样品..在HPI.c上分离. 化学发光舱洲其古量.表2为鸦片及吸毒者尿 液中吗啡禽培的测定结果. 图2台成样品的色谱图 Fig.2ChromatogramoFauthenticsample 1可待围(n);2.吗啡(morphin);3.t)啦己酰 吗啡(【)-m.noy1m~rphin){"海涪园theroin). 第11期朱龙等:吗啡和海洛困等生物碱的高效液相色谱化学发光测定 丧I4仲生物碱的线性范围 Table1Linearrangeofthefourdtledalkaloids 参考文献 森夏因.毒拍分析方法学.北京:群窳出版社.1983382 Mu]eSJtHushinPL.Aha1.Chem.1971.43:708,7ll Fasker.RAR.Naka帏uK.Anatyst.1986,LL1:563,568 Yoshii'umlN?ShioriH.KensukeN.NasahisaH..,.Chrontalogr..1980.190l25L,255 AristotelisBS.AntonyCC.Ar?.Chim.Acla,1991.255:403,4L1 Zhan~XR?l~eyensWRG,VaDderWekenGCalokerinosAC,lmaiK.4nee.Ckim./tcd.1995 303:137,l42 Abbot【RW.TO%VnshendA.A,f"加.1987-I12}397,401 DeterminationofMorphine.CodeineandOtherAlkaloidsbyHigh PerformanceLiquidChromatographyWith ChemiluminescenceDetection ZhuLong?FengManllang.WanXuqln.LnJiuru' (D~'parDneltttfChemistrb..Shaa~txiTeacher'sUniversil2~.Xian710062 AbstractChemdnmhaeseeneebehaviorofthereactionofpotassiumpermanganate.I1 polyphosphoricacidmediLimwithaseriesofaIkaloids,inch,dinngmorphine.codeinewas studied.AnovelmethodfOrdeterminationofthesealkaloidsinurineofdru口addictsanditl opiumwasestablishedltsiftgreversedphasehighperformanceliquidchromatographywith chemi[ttminescencedetection.Thedetection1imltformorphineis10×10"g/L.for codeine1.0×10g/L.f0romon0acetylmorphine1.0×10"g/Landforheroin1.0 10"g/I.Therelativestandarddeviationforminimumdeteetableconcentrationoftheseal kaIoldswasbelow1,8.Therecoxrcryinvarioussampleswasbetureen95and98.The Presclltmethodhasbeensueeessfullyappliedtoclinica【analysis. KcvW(Ir 【IIlighper[ormaneeLiquidchr0n1atography?chemiluminescence.potassitlmper morphine.codeine.monoacety[morphine.heroin cReceived2lNo.tuberl995;accepted22AprilIqt)