检测血清抗核小体抗体水平在SLE诊断及转归中的研.doc

检测血清抗核小体抗体水平在SLE诊断及转归中的研.doc 检测血清抗核小体抗体水平在SLE诊断及 转归中的研 【关键词】 抗核小体抗体;红斑狼疮;系统性;皮肌炎 ,摘 要, 目的:研究血清抗核小体抗体(AnuA)水平监测在系统性 红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。:采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定62例SLE，52例亚急性皮肤型红斑狼疮 (SCLE)，10例皮肌炎和30例健康人血清AnuA水平，采用SLE 疾病活动指数0.05)。AnuA水平与SLEDAI有明显相关性 (P=0.015,r=0.441)，SLE患者治疗后血清AnuA水平与治疗前相 比明显降低(P<0.05)。结论:AnuA水平高低对诊断SLE、监测 病情活动和判断疗效有意义。 ,关键词, 抗核小体抗体;红斑狼疮;系统性;皮肌炎 Examine the Level of Antinucleosome Antibody in Blood Serum in the Diagnostics of Systemic Lupus Erythematosus and The Research ine the level of Antinucleosome antibody (AnuA) in blood serum to discover the value in the diagnostics of Systemic Lupus Erythematosus (SLE) and pare the results from before and after treatments respectively.Methods Enzymelinked immunosorbant assay (ELISA) from 62 samples of SLE,52 samples of Subacute Cutaneous Lupus Erythematosus (SCLE),10 samples of Dermatomyositis and 30 healthy samples,respectively.In order to determine and grade the criterion of state of illness,the Systemic Lupus Erythematosus Activity Index (SLEDAI) has been adopted.Results The levels of AnuA in serum from the SLE samples the samples of atomyositis patients and healthy specimens (P<0.01).The levels of AnuA in serum from the active SLE samples,that are much higher than that from the samples atomyositis samples and the healthy ones (P<0.05).The difference bet dermatomyositis and healthy samples has notgot any statistic significance (P>0.05).There is apparent pertinence bet remarkably reduced ents had been given to SLE patients paring ents (P<0.05).Conclusion The levels of AnuA is valid to help to diagnose the SLE,monitor the disease and estimate the curative effect. Key e antibody;Lupus Erythematosus;Dermatomyositis; Systemic 系统性红斑狼疮(SLE)是一种临床比较常见的自身免疫性结缔组 织病。核小体是染色质的基本单位，在细胞凋亡过程中，核酸内酶 活化后切割核染色质释放出核小体，核小体是靶抗原，诱导抗核小 体抗体(AnuA)的产生,1,，通过研究发现，SLE患者体内存在 大量的抗核小体抗体，我们采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检 测SLE、SCLE、皮肌炎和健康人血清中AnuA水平的变化，了解和 研究AnuA在SLE诊断中的作用及与病情活动性的关系和治疗前后的变化。 1 资料 1998年1月至2005年6月我院门诊及住院病人确诊SLE、SCLE患者114例，女107例，男7例，年龄11岁~70岁，平均年龄31岁;病程30 d~9.5 a，平均2 a。其中SLE62例。根据其临床现及实验室的检查指标，进行SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分，活动期36例，非活动期26例;SCLE52例。诊断依据美国风湿病协会1982年修订的SLE分类标准，皮肌炎10例，其中女7例，男3例，年龄20岁~58岁，平均36岁，病程46 d~3 a，平均1 a。正常人对照组30例，为健康献血者，其中男2例，女28例，年龄18岁~45岁，平均26岁。有的住院病人经治疗后病情缓解后再次采血复查。 2 方法 2.1 仪器和试剂 Drganon Tekika公司生产的酶标检测仪，德国欧蒙医学实验诊断有限公司生产的抗核小体IgG抗体ELISA试剂盒。 2.2 ELISA法检测血清AnuA 微孔板用小牛胸腺纯化的天然核小体包被，血清标本用标本缓冲液1?201稀释。按加样方案向相应微孔分别加标准血清、阳性对照、阴性对照和稀释后血清各100 μl，室温温育30 min，缓冲液清洗3次，滴加100 μl酶结合物(过氧化物酶标记的兔抗人IgG)室温温育30 min，清洗3次，滴加100 μl色原/底物液室温避光温育15 min，加终止液终止反应。加完终止液后30 min内酶标检测仪450 nm比色，分别以3份标准血清的浓度和其吸光度为横、纵坐标作标准曲线，据此求出血清抗体的浓度。因尚无AnuA的国际参考血清，标准品以相对单位(RU)表示。德国欧蒙医学实验诊断有限公司推荐以20 Ru/mL为正常上限，高于此值则为阳性。 2.3 疾病活动性评分 治疗前后采血的同时，记录患者的临床表现及实验室检查指标，进行SLEDAI评分，对SLE的疾病活动性作总体评估。 2.4 统计学处理 采用SPSS统计软件包11.0进行统计学，计量资料以?s表示，组间计量资料比较采用单因素方差分析，治疗前后比较采用配对t检验，SLE患者的AnuA水平与SLEDAI的相关性采用Pearson相关检验。当P<0.05时为有统计学意义。 3 结果 3.1 血清AnuA定性检测结果 62例SLE患者中有36例AnuA阳性，阳性率为58.1%,36例活动期SLE患者病人中28例AnuA阳 性,阳性率为77.8%,26例非活动期SLE病人中有8例AnuA阳性,阳性率30.8%,其余62例结缔组织病患者(52例SCLE、10例皮肌炎病人)，只有4例SCLE病人为阳性，30例正常人对照组均为阴性。 3.2 SLE、SCLE病人血清AnuA水平 见表1。 表1 结缔组织病病人与正常人血清AnuA水平比较(略) 表1,SLE活动期患者血清AnuA水平与SLE非活动期、SCLE、皮肌炎和正常人对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);SLE非活动期患者血清AnuA水平与SCLE,相比差异无统计学意义(P>0.05),与皮肌炎和正常人对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);SCLE患者血清AnuA水平与皮肌炎和正常人相比差异有统计学意义(P<0.05);皮肌炎患者和正常人对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。 3.3 AnuA与SLE疾病活动性的关系 对SLE患者的AnuA水平与SLEDAI进行分析，结果表明，AnuA水平与SLEDAI有相关性(γ=0.441,P=0.015)。 3.4 SLE、SCLE患者治疗前后AnuA水平的动态变化。 表2 50例SLE、SCLE病人治疗前后血清AnuA水平比较(略) 30例SLE病人经住院治疗2周至1个月后,病情缓解,SLEDAI明显降低.与治疗前相比,AnuA水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);20例SCLE病人经治疗10 d后,病情好转,但治疗前后血清AnuA水平差异无统计学意义(P>0.05)。 4 讨论 有资料表明SLE病人淋巴细胞凋亡明显增加,导致大量核小体释放,2,，核小体作为免疫原,可被抗原提呈细胞如单核细胞提呈给CD4Th2细胞,Th2细胞增殖活化,激活B细胞产生AnuA,形成抗原抗体复合物参与SLE的发病,3,。有学者研究了不同结缔组织病病人抗核小体IgG抗体的分布,表明它们只出现于SLE和混合性结缔组织病。高水平的抗核小体IgG抗体几乎只是在SLE中出现,4,。我们的实验结果表明SLE活动期病人血清AnuA水平与SLE非活动期SCLE、皮肌炎患者和正常人对照组相比明显升高，SLE非活动期SCLE病人血清AnuA水平与正常人对照组相比有所升高，而皮肌炎病人血清AnuA水平与正常人对照组近似。因此我们认为AnuA的检测对SLE、SCLE，特别是对SLE的辅助诊断具有一定的临床应用价值。 本实验结果显示AnuA水平与SLE疾病活动有相关性，动态检测发现SLE病人治疗后血清AnuA与治疗前相比明显降低，说明通过监测AnuA水平可以判断SLE病人对药物治疗后的反应。SCLE 病人治疗后血清AnuA平均水平与治疗前相比绝对值有降低，但无统计学意义，分析认为SCLE病人治疗前后血清AnuA水平稍高于正常，治疗前后检测采血时间间隔较短，是治疗前后的差异无统计学意义的原因。今后治疗前后检测采血应延长间隔时间。