温州地区女性感染人乳头瘤病毒型别的流行病学调查.doc温州地区女性感染人乳头瘤病毒型别的流行病学调查.doc
温州地区女性感染人乳头瘤病毒型别的流行病学调查
摘 要:目的 调查引起温州地区女性泌尿生殖道感染的人乳头瘤病毒(HPV)的基因型别分布状况,为该地区HPV感染的诊断和防治提供依据。方法 采用多重PCR和毛细电泳技术对临床送检的613例存在泌尿生殖道疾病女性的宫颈脱落细胞标本同时进行25种HPV型别的检测。结果 613例标本中有416例为HPV阳性,HPV总感染率为67.86%,其中单一HPV型别感染的标本量为278例,感染率为45.35%,两型HPV共感染的标本量为9...
温州地区女性感染人乳头瘤病毒型别的流行病学调查.doc
温州地区女性感染人乳头瘤病毒型别的流行病学调查
摘 要:目的 调查引起温州地区女性泌尿生殖道感染的人乳头瘤病毒(HPV)的基因型别分布状况,为该地区HPV感染的诊断和防治提供依据。方法 采用多重PCR和毛细电泳技术对临床送检的613例存在泌尿生殖道疾病女性的宫颈脱落细胞标本同时进行25种HPV型别的检测。结果 613例标本中有416例为HPV阳性,HPV总感染率为67.86%,其中单一HPV型别感染的标本量为278例,感染率为45.35%,两型HPV共感染的标本量为98例,感染率为15.99%,多型(3型及3型以上)HPV共感染的标本量为40例,感染率为6.53%。25种HPV型别均被检测出不同程度的感染率,型别分布情况为:HPV 52型别19.71%、HPV 16型别12.26%、HPV 58型别11.06%、HPV 81型别10.82%、HPV 33型别7.93%、HPV 53型别7.69%、HPV 42型别6.25%、HPV 51型别6.25%、HPV 39型别6.01%、HPV 18型别5.29%、HPV 56型别5.77%、HPV 66型别6.01%、HPV 31型别5.29%、HPV 11型别5.05%,其他HPV型别的感染率均低于5.00%。对不同年龄段女性而言,HPV的感染率没有显著差异。结论 温州地区女性HPV感染率高,且以HPV单一型感染为主;HPV 52为高危型HPV感染的主要型别,其次为HPV 16和HPV 58;HPV 81为低危型HPV感染的主要型别;温州地区女性HPV的感染率与年龄没有关系。
关键词:人乳头瘤病毒;基因型;宫颈癌
人乳头瘤病毒(HPV)是一种嗜黏膜和皮肤上皮,与肿瘤的发生、发
展密切相关。根据致病力能力大小的不同,在临床上将HPV各型别分为低危型和高危型。目前已知,低危型HPV(如HPV6、11、42、43、44等)常引起生殖道湿疣等良性病变;而高危型HPV(如HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、82等)则与子宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌的发生密切相关[1]。研究资料显示,CIN和宫颈癌HPV感染型别和分布在国家、地理及民族等方面有一定差异[2-3],通过对温州地区女性HPV的基因型别分布进行研究分析,以对该地区HPV感染的诊断和防治提供依据。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
2013年11月至2014年6月在温州医学院附属第二医院育英儿童医院门诊和住院部因泌尿生殖系统疾病就诊的女性患者(相同患者不重复计入)613例,年龄20,77岁,平均(40.75 ? 11)岁。
1.2 研究方法
1.2.1 标本采集
医护人员先以窥阴器或阴道扩张器暴露宫颈,用棉拭子将宫颈口的分泌物擦去;将宫颈刷置于宫颈口,顺时针旋转5圈以获得足量的上皮细胞样本;将宫颈刷头部放入细胞保存液,沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断,旋紧洗脱管盖,做好样本标识,并保持洗脱管直立放置。标本一经采集,应马上进行DNA提取;无法及时处理的标本需置2,8?于2周之内进行处理,或在-20? (? 5?)长期保存。
1.2.2 仪器和试剂
采用多重PCR和毛细电泳技术,对6种低危型别6、11、42、43、44、81和19种高危型别16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83进行检测。PCR扩增仪使用Applied Biosystems
的Veriti PCR仪,毛细电泳平台为贝克曼库尔特GenomeLabTM GeXP多功能遗传分析系统,核酸提取试剂及分型试剂为由宁波海尔施基因科技有限公司提供的核酸提取试剂盒(磁珠法)(P/N: 1060056)和HPV分型检测试剂盒(P/N: 1060005)。
1.2.3 检测方法
主要包括标本DNA提取、PCR扩增、毛细电泳分离和结果的判定等步骤,各步骤均严格按仪器和试剂盒说明
进行操作,每次实验都设置阴性和阳性对照。
1.3 统计学分析
采用SPSS 19.0 统计软件进行数据处理,计数资料以百分率表示,组间率的比较采用Χ2检验,检验水准为α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 HPV感染率
HPV的总感染率为67.86 %(416 / 613);其中只有高危型HPV感染的检出率为47.30 %(290 / 613),只有低危型HPV感染的检出率为9.30%(57 / 613),高、低危型HPV混合感染的检出率为11.26 %(69 / 613)。
2.2 HPV各亚型感染的分布情况
在被检测的25种HPV型别中,所有型别均有检出。在HPV感染者中,
高危型主要以HPV 52、HPV 16和HPV 58为主,分别占19.71 %、12.26 %和11.06 %;其余按所占比例依次为HPV 33(7.93 %)、HPV 53(7.69 %)、HPV 51(6.25 %)、HPV 39(6.01 %)、HPV 66(6.01 %)、HPV 56(5.77 %)、HPV 18(5.59 %)和HPV 31(5.29 %)。低危型主要以HPV 81和HPV 42为主,分别占10.82 %和6.25 %。所有HPV感染标本中,单一型别感染的标本量要多于2种或2种以上型别的标本感染量。但是,感染标本中,2种或2种以上型别的混合感染的型别总量要多于HPV单一型别感染的总量。见表1。
表1. 416例HPV感染者的型别分布
HPV类型 单一感染(n)
混合感染(n)
所占比例(%)
高危型
HPV 16
30
21
12.26
HPV 18
13
9
5.29
HPV 26
0
2
0.48
HPV 31
9
13
5.29
HPV 33
18
15
7.93
HPV 35
8
5
3.13
HPV 39
13
12
6.01
HPV 45
6
7
3.13
HPV 51
13
13
6.25
HPV 52
33
49
19.71
HPV 53
17
15
7.69
HPV 56
10
14
5.77
HPV 58
20
26
11.06
HPV 59
8
11
4.57
HPV 66
9
16
6.01
HPV 68
8
12
4.81
HPV 73
3
6
2.16
HPV 82
5
10
3.61
HPV 83
1
2
0.72
低危型
HPV 6
4
12
3.85
HPV 11
9
12
5.05
HPV 42
14
12
6.25
HPV 43
6
12
4.33
HPV 44
2
8
2.40
HPV 81
19
26
10.82
2.3 HPV单一、双重、多重感染的分布
416例HPV阳性感染者中,单一HPV型别感染278例,占66.83 %;双重HPV型别感染98例,占23.56 %;多重HPV型别感染40例,占9.62 %,其中三重感染26例(6.25 %),四重感染9例(2.16 %),五重及五重以上感染5例(1.20 %)。单一HPV型别感染者以HPV 52、HPV 16、HPV 58,其次为HPV 81、HPV 33、HPV 53、HPV 42、HPV 51、HPV 39、HPV 18和HPV 56,见表1。双重HPV型别感染者中,出现较多的为HPV 6 / 52(5 / 98)、HPV 58 / 52(4 / 98)、HPV 52 / 81(4 / 98)双重感染。
2.4 年龄与HPV感染的关系
20,< 30岁、30,< 40岁、40,< 50和> 50患者的HPV感染率分别为67.74%、69.74%、65.53%、68.91%,见表2。通过SPSS 19.0分析,不同年龄段患者HPV感染率的差异不具有统计学意义(χ2=0.89,P=0.83)。
表2 不同年龄段受检女性HPV感染率的比较
年龄(岁)
n
HPV阳性[n(%)]
20,< 30
93
63 (67.74%)
30,< 40
195
136 (69.74%)
40,< 50
206
135 (65.53%)
> 50
119
82 (68.91%)
3 讨论
人乳头瘤病毒( HPV) 感染是宫颈癌的主要致病元凶,研究表明99.7%以上的宫颈癌患者存在HPV 感染。现有研究都强有力地支持了HPV感染与宫颈癌之间的因果关系,表明HPV 感染是宫颈癌发生的必要病因条件。宫颈癌已成为发展中国家妇女健康和生命的“头号杀手,是目前唯一能早期发现早期预防治疗的肿瘤[4]。关于HPV感染全国性的发生情况还没有明确的研究资料,北京、辽宁、四川东北地区、重庆、深圳、天津、山西各地区的报道均有差异。本研究中,温州地区女性HPV的总感染率为67.86 %(其中,均为高危型HPV的感染率为47.30 %,均为低危型HPV的感染率为9.30 %,高低危型HPV混合感染率为11.26 %),高于四川东北地区(49.12 %)[5]、重庆(37.21 %)[6]、深圳(24.49)[7]、天津(29.20 %)
[8]、陕西(18.70 %)[9]、北京(55.22 %)[10]、辽宁(45.60 %)[11],这可能与本研究中的研究对象为泌尿生殖系统疾病有关的宫颈脱落细胞有关。 在该研究中,25种HPV型别均被检出。在HPV感染者中,高危型主要以HPV 52、HPV 16和HPV 58为主,低危型主要以HPV 81和HPV 42为主,分别占10.82 %和6.25 %。这样的感染型别与其他的地区不尽相同。成都地区常见的高危HPV感染型别为HPV 52,其次为HPV 16和HPV 58,这与本研究一致[12]。四川东北地区HPV 16、HPV 58、HPV 33、HPV 18、HPV 52为主要的高危型别感染,而低位型别感染以HPV 6和HPV 11为主[5]。北京地区主要的高危感染型别为HPV 16、HPV58、HPV 33,主要的低危感染型别为HPV 6和HPV 11[10]。辽宁地区主要的高危感染型别为HPV 16、HPV 58、HPV 18、HPV 52和HPV 33[11]。这进一步说明了HPV型别的感染存在地域性差异[13]。
本研究地区HPV感染包括单一HPV型别感染、双重HPV型别感染98例,占23.56%和多重HPV型别感染。其中,单一HPV型别感染(66.83 %)要多于双重HPV型别感染(23.56 %)和多重HPV型别感染(9.62 %)。该研究说明单一HPV型别感染占HPV感染的主要感染类型。这与四川东北地区[5]、成都地区[12]研究结果一致。
温州地区不同年龄段20,< 30岁、30,< 40岁、40,< 50岁和> 50岁存在泌尿生殖系统疾病的女性的HPV感染率均超过65 %,分别为67.74%、69.74%、65.53%、68.91%。通过统计学分析发现,患者的年龄段与HPV感染率之间不存在相关性,建议年龄在20以上、有性生活经历的女性要定期进行HPV筛查,以减少宫颈癌的发生。
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