【doc】人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选的转基因小鼠研究

【doc】人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选的转基因小鼠研究 人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选 的转基因小鼠研究 掰蹙'畸变'突变1997年第9卷第6期CascinogeaesisTeratogenlsandMutagen~isVol9N061997 反应关系(尸>0o5).LK纯托粉备剂量组的精子畸形睾分别与阴性组比较,均无显瑶性差异(OO5),也夼讳 "剂量反应关系a各剂量组孕母鼠增重与阴性对照组相比较差异无显着性意义(O05).各剂量组窝均 着靡数窝平均胎块数,窝平均晚死胎数,窝平均活胎数阴性对照组相比较差异均无显着性意义CP>O05). 再剂量纽均来见外,内脏畸彤_和骨骼畸形.LK纯花粉对大鼠无致畸作用.各剂量组活胎体重和活胎身睦 .j性对照纽相比较.差异均无着忡意义(O05).但高剂量组胎鼠前肢掌骨骨化迟缓(缺失)j阴性对 照纽相比较差异肯显着性意义(KO05),低剂量组胎鼠胸骨化避缓(有两节以j:骑骨缺失或严重骨化迟缓 的)j阴性对继比技差异也青着性意义(005)虽无剂量反应关系.仍提示_lK纯花粉可能ql起胎鼠骨 傀迟缓,行一定的发育毒性. C-9 ,Ii-,重庆400042 升发大补酒对土鼠的致畸性试验研究一一. 歪鱼?盐盔.主刘小丽谭建(重庆市[J生防疫站重庆).) fl发火补酒是由大枣,杞,袄苓等而墟的l8度慷艇洒,对其敢畸性进行l,扭讨试验采用传绩熬l嘀 方法严格按照C,BI5】93.t94方法进行.将措了闭性豹star雌悄太鼠随机分成50001250.313mg/kg 一剂量组(舒别拥当十LD50的!/11/16干兀j/64).浒刺^{照为蒸馏水m性为O5mg儿g改竹取.蚯 笫6一I7fi进行溢肖日妊娠开始约每『1称体重一攻.十妊娠20天处凭孕鼠观察肝胎足船鼠生&发育拈 及畸形晴坫果0:母件增章卉荆量纽妊娠}辋丑净增熏与对照}转无显差异?肌:胎发茸,赡t 漓5000:qg,/kg器死,啦收肫I牟f对照e(_05外J打项指标与对照比较定^!蔫一@昭 仔生K发育:_一个荆【j量导长体重等j旨标吲潍j:=j比较无差异.?I畸形臻:再量姒胎融外观 峨橹盎朱蟑异常骨端收程低矗剂量纽投爱性对照可嘶家纠个制鼠j现鞠骨踏戋,肋晋异帮等峨蹙类形 {l尢剂量反?关系绩十学心史.口J为臼发衰变.述耍观臻指标,积帖霹{_L【均示骷结果 州比较善=盹差异(O.01).试验结果表明丁}发大l章}酒在5000mg/'kg剂量下对大鼠母体无鹰性作用, 剐胎尢数畸胎竹用,世刘髓吟发育白一定的毒性,鞭l能由于酒精晌毒性作用所数,酒精为已蜘胎儿发 ;颢俸两碡巷;闷翰司\ c一10人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选的转基因,j,鼠研究?7!/ 盛毅李建秀王新民潘星华胡平傅继梁t第二军医人学生J};=!教研室}:海20042.3) 哺乳功物糟了发育过程1分受杂,它涉嫂到浩体的精原地有趣分和分化,端母抛碱数分裂, 精了胞的变态等等.为毋f究发育fn分化提供了一个覃要又肯趣的系绩.近f多年发腰的转小鼠 体系蚪破用十衷廷谢拄的研究这?体内研究体系可以艇臻日的基个休发宵的l&和 ?曩l织}屿表达悄i5Lt义能"复杂的L"环境中i_j}究某一特姝了的生渤翘应由于鞘了技育体井 境下6'j能完l引此没件系对一【生特}{?胞特异表逃的璀常台适为面f究^顶作靳(h.~CR) 袭哒的[_分选机理,裁们分Bi'q业rl诅cR璀?5'州亭州,销1讣子聊搬告举WLac7flcj融台铡(拭 仆1业I,ACI'~t.r的融台照l捌f载体2J面过微外射受精浊制斋转小鼠,结 粜如F:戴什j:件射i.帖^H耻鼠一蒈删输管甲,4jj一,产仔1I—LI存活10{,_l『【1 SoulhelI1交Il整台柏外一_^:的性小鼠1只.性半l0,0%:了】化l(,耋雎PCI,'增外 泻!,H呈找件2射80H卵.移植入9,,IJ母鼠学删输管中,3H,产仔9H,活7 jj,蹦SOt]Itel一1杂交持…接.'外灏的小鼠1…件半】4%.了】4t:4,鼠1jH,Pf}厂 』{{外灏',LIxl,6一II呈…悍对闩个融f转?小鼠中的表达榆删中 78 癌变'畸变.突变1997年第9卷第6期CarcinogenesisTexatogoaesis~ndMutagenesis 【9No6tgq7 测定为土生一步在佧研究该其因的表返调控和蛋白分选的机理我们构建了以大肠杆菌B一半乳糖廿酶 阿(LacZ)为基的人顶体蛋白酶原基因片断与LacZ融台基凶先运用PCR方法从人白细胞DNA中扩增 hACR基因的5.侧翼序列和含信{,肚序列的第l外予,将扩增出的1.3Kb片断克隆到oGEM—T中,分别作 限制性酶训和DNA序列测定证实克隆片断确为hACR基因.牲p-G一4Z为中间载体,将hACR基因从】)G删一T 载体中经不同雕切回收,获得hACR基圈的5.侧翼序列,5侧翼序列和第1外显了的两J十斯.分别克簿人 IoGEW一4Z中.再从】)GE一4z中获得目的基因与质粒pSV一13~-alactosidase 经不同酶切得到的Lac%和13一内 酰胺酶基困的5弓两DNA片断体外连接转化细菌.最终获得的两个质粒经酶切鉴定和DNA序列测定分别为EACR 摹因5'侧翼序列.第1外显子与LacZ目一内酰胺酶基因的基因栽休,以及hACR 基因与LacZ.13一内酰JJ安酶 基困的融合基周载体. ?丰课获国家博十后科学基盘(中博基【L996]d号)和上癣市溥士科学摹金资助. 7苈涞陋0敌枕意穴错奄屹 C-12着床前大,小鼠胚胎暴露于敌枯双的发育毒性研究0 f&3 张天宝刘建毕洁(第一二军医大学卫生毒理学教研室上海200433) 颉}占双是一种已知的动物发育毒物.具有根强的致畸作用.丰研究的目的是观察着床前胚胎暴露于敞 枯双有无致畸等发育毒性试验采用ICR小鼠和sD大鼠.按常规方i击获取孕鼠,查见阴栓之f{为第零_灭 小鼠给药时问为妊娠第l,5天,染毒剂量分别为150和75mg/kg.大鼠给药时问分别为妊娠第2,6天.剂 量分别为15和75mg/kg给药途经均为经口.对照组采用1%拯甲基纤维素钠.孕鼠分剐于第l8无(小 鼠)和第lg天(大鼠)处死检查妊娠结果.按致畸试验方法检查内脏和骨骼有无发育异常.结果妊示.小鼠 在tSOmg/kg剂量下全韶胚泡束着床;在75mg/kg剂量下.观察到胚胎/胎鼠致死发生率l圳娃升高,吸收胎 率选23.5%.活胎率明显降低(73.5%):未观察到明显的外观和内脏异常,但骨骼的骨化迟缓大鼠在15mg/kg 剂量时可导致着床率下降.吸收胎和死胎发生率均增加(分为25%和10.23%),话胎率蜘显佯低(仅为 647%】;但75mg/kg剂量时对着床率,胚胎存活率无明显影响.在15mg/kg剂量组观察到脚骨,鹏椎, 骶推等骨化迟缓.上述两个剂量均未观察到明显致畸作用. s幢批爱777g0丁#,qj0M,^lsgn_厂木墨育tPE 0--I3TF一930,MNNG和氨基蝶呤着床前暴露对大鼠发育毒性的研究m…I 堡丝生生刘建(第二军医大学卫生毒理学教研室上海2004331 近年来的研究表明,着床前早期胚胎暴露于某些化学物可导致胎儿畸形等发育毒性.这对传统的 固 数l畸 理论和方案提出了挑战.因此,进一步阐明早期胚胎暴露于化学物与妊娠后果的关系无疑具有重要的 理论意义和实际意义.为此,我们对卜甲基州一(桥一甲基一9一氨杂二环[3.3.1]一壬一3一基)一卜H一吲唑一3一 羧酰眩(简称TF-$30),N-亚硝基一N一甲基一N'一亚硝基胍(简称)和氨基礤呤三种受试物在妊娠早期暴露 379