HPLC法测定猪胆汁膏中猪去氧胆酸含量
HPLC法测定猪胆汁膏中猪去氧胆酸含量 ?
42天津中医2002年12月第19卷第6期
HPLC法测定猪胆汁膏中猪去氧胆酸含量六
肖学凤,陈新培
(天津中医学院,天津300193)
摘要目的:采用HPLC法建立猪胆汁膏猪去氧胆酸的含量测定
.方法:色谱柱YWGLG.色谱柱
(4.6mm×250mm,10bem),流动相:甲醇一水(80:20),流速:1,0mL/min,示差折光检测
:平均加样回收 器.结果
率为98.83%,RSD=0.81%(=6),线性范围10--100beg,r=0.99960结论:本法操作简便,结果准确,可用于猪胆
汁膏的质量控制方法.
关键词猪去氧胆酸;猪胆汁膏;HPLC
中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1004—5392(2002)06—0042—02 猪胆汁膏系猪科动物猪Susscrofadomestica Brisson的胆汁的干燥品,是配制6种中药复方制剂
的原料.《广东省药品标准》(1987年版)收载,在其
标准中只应用重量法测定了胆酸的含量,猪去氧胆
酸是猪胆汁提取物中具药理活性且价廉易得的胆汁
酸,可将猪去氧胆酸作为猪胆汁膏定量指标,文
献[1'报道用薄层扫描法分析引流猪胆汁及清开灵
注射液中的猪去氧胆酸,洪南康等b报道用磷钼酸
比色法测定胆汁中的总胆汁酸,还有郭明旭等将
猪胆汁提取物薄层分离后用0.1%碘乙醇液喷雾定
位,洗脱后比色测定猪去氧胆酸.为提高其标准,笔
者采用高效液相色谱法测定猪胆汁膏中猪去氧胆酸
含量,具有分离度好,准确,快捷等优点.
1仪器与试剂
高效液相色谱仪(日本岛津);LC一10AD泵; DL一800色谱工作站(大连化物所).猪去氧胆酸对 照品由中国药品生物制品检定所提供(经高效液相 色谱法,化纯度为99.76%);猪胆汁膏经长春中医 学院中药系中药鉴定教研室姜大成教授鉴定为猪科 动物猪的胆汁的干燥品,试剂均为分析纯. 2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱:YWGLEl8(4.6mm×250mm, 10m);流动相:甲醇一水(80:eo);流速:
1.0mL/min;柱温:16?;示差折光检测器.
2.2线性范围用甲醇配制每mL含猪去氧胆酸 5mg对照品溶液.精密吸取上述对照品溶液2,5, 10,15,30L,分别注入液相色谱仪,依法测定,以 测得峰面积值(Y)为纵坐标,猪去氧胆酸对照品的 进样量(X)为横坐标作图,得回归方程为Y= 六基金项目:吉林省中医药管理局重点科研课~!(2ooo-jo5)
作者简介:肖学风(1968一),女,讲师,主要从事药物制剂的 研究工作.
10533+2886388.272X,7=0.9996.在10-100/zg 范围内线性关系良好.
2.3供试品溶液的制备取猪胆汁膏适量,研细, 精密称取4.5g,置索氏提取器中,加乙醇100mL 回流提取6h,提取液蒸干,加水25mL,加NaOH 5g,振摇溶解,于120?恒温加热4h,放冷,补充水 至25mL,加盐酸调节pH值2,3,用醋酸乙酯提取 5次(30,20,20,20,20mL),合并提取液,置水浴上 蒸干,残渣用甲醇溶解,并转移至10mL容量瓶中
稀释至刻度,摇匀备用.
2.4精密度试验取同一供试品溶液连续进样 5次(10tLL/次),测定峰面积值,结果计算出RSD= 0.59%(=6).
2.5稳定性试验取同一供试品溶液,每隔4h进 样10L,依法测定峰面积值,结果在48h内稳定, RSD=0.17%(=le).
2.6样品测定精密称取3种不同产地样品各 10g,按供试液制备方法制备,分别精密吸取对照品 溶液和供试品溶液各10L进样测定.外标两点法 计算含量,3种不同产地样品含猪去氧胆酸结果见 表1.
表13种不同产地样品猪去氧胆酸的含量 猪去氧胆酸含量测定结果表明:不同产地的猪 胆汁膏中猪去氧胆酸含量差异不大.
2.7加样回收率试验取同法测定已知含量的供 试品适量,精密加入猪去氧胆酸对照品适量依法测 定,结果见表2.
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天津中医2002年12月第19卷第6期
表2猪胆汁膏中猪去氧胆酸加样回收率试验结果 3讨论
猪胆汁性味苦寒,具有清肺热,凉肝胆,润肠燥, 解热毒之功效.猪胆汁主要含有猪去氧胆酸,胆酸, 石胆酸等,药理实验表明猪胆汁的主要作用是能提 高机体的抗炎能力,具有中枢性镇咳作用,能刺激胆 汁分泌,增加肠蠕动.在体外,胆汁对呼吸道常见的 甲型链球菌,金黄色葡萄球菌,百日咳杆菌等有较好
的抑制作用.目前对于猪胆汁的药理作用研究不断
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深入,临床应用亦愈加广泛I.本实验即为猪胆汁内
在质量控制提供了一种准确,可靠,快捷的定量检验
方法.
经过实验表明,由醋酸乙酯提取5次之后,猪去
氧胆酸已基本提取完全.使用猪去氧胆酸对照品,
以所列色谱条件进行归一化测定,进样量90L,结
果其归一化纯度为1o0%.
参考文献:
[1】张能荣.引流猪胆汁的分析[J】.中成药,1992,14(6):44. [2】张建军.双波长薄层扫描法测定清开灵注射液中牛胆酸及猪
去氧胆酸的含量[J】.中国医院药学杂志,1991,11(6):260. [3】洪南康.磷钼酸比色法测定猪胆汁中总胆汁酸[J】.上海医
学,1983,6(1):35.
[4】郭明旭.猪胆汁中猪去氧胆酸的薄层色谱比色测定[J】.中国
医药工业杂志,1995,26(10):512.
[5】刘涛.猪胆汁的药理与I临床应用[J】.南京中医学院,
1992,8(30):188.
(收稿日期:2002—06—10)
DeterminationofDeoxycholicAcidinPorcineBilePastebyHPLC
XiaoXuefeng.ChanXinpei
(Tia巧inUniversityofTCM,Tiain300193,China) Abstract0bjective:Toestablishthemethodfordeterminethedeoxyeholieacidinporcinebile
pastebyHPLC.Method:
YWGLCl8chromatographiccolumn(4.6ram×250mm,lOt~m)wasused.Themobilephasewasmethano1一water(18:20) withflowrate1.0mLpermin.Result:Theaveragesamplerecoveryratewas98.83%.RSD=0.
81%(n=6).Thelinear
rangewas10—100gwithQ=0.9996.Conclusion:Thisisamethodforqualitycontrolofporcinebilepastewit
hsimple
manipulationandaccurateresult. Keywords:porcinedeoxyeholieacid;porcinebilepaste;HPLC
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