【doc】洛索洛芬钠片在健康志愿者体内的生物等效性

【doc】洛索洛芬钠片在健康志愿者体内的生物等效性 洛索洛芬钠片在健康志愿者体内的生物等 效性 内蒙古中医药 洛索洛芬钠片在健康志愿者体内的生物等效性 余玲 摘要:日的:建立人血浆中洛索洛芬钠浓度的HPLC测定方法,研究健康受试者口服国产洛索洛芬钠片的药代动力学,以 进口洛索洛芬钠片作为参比制剂,计算两制剂的相对生物利用度,判断两种制剂是否等效.方法健康志愿者18名,用随机 双交叉试验方法.单剂量(60rag)口服洛索洛芬钠的试验或参比制剂,洗净期为1周;分别于服药后8h内不同时间点抽取 静脉血.用HPL法测定血浆中洛索洛芬浓度.用DAS2.1.1程序进行生物等效性评价.结果:最低检测浓度0.1t~g/rnl,回 收率大于80%,日间和日内的变异系数小于15.0%,线性范围为0.1,10.Ot~g/ml(r>O.99),符合生物样品分析的要求. 主要药动学参数分别为:国产洛索洛芬钠片:T1/2=1.671?0.470h,Cmax=4.580?1.457~g/ml,Tmax=0.713?0.307h, AUC(0—8)=9.519?2.994~g?h/ml,AUC(0一oo)=9.989?3.166~g?h/ml,AUC(0—8)/AUC(0一o.)=0.952? 0.027:参}匕制剂T1/2:1.654?0.389h,Cmax=4.310?1.259~gTml,Tmax=0.722?0.304h,AUC(0—8)=9.753? 3.015~g?h/ml,AUC(0一oo)=l0.299?3.20S~g-ti/ml,AUC(0—8)/AUC(0一oo)=0.948?0.024.结论:建立的 HPL法简单快速,定量可靠准确,适合于洛索洛芬钠临床研究.洛索洛芬钠受试制剂的AUC(0一t)相对生物利用度为 98.0?12.0%,AUC(0一oo)相对生物利用度为97.7?12.6%.经统计学分析,两制剂生物等效. 关键词:洛索洛芬钠;HPLC;药代动力学;相对生物利用度;生物等效性 中图分类号:R971.1文献标识码:A文章编号:1006—0979(2008)05—0012—03 洛索洛芬钠(Loxoprofensodium)系前体型的苯丙酸类 非甾体消炎药,由日本三共株式会社于1986年获准上市. 它具有优良的镇痛消炎作用,特点为镇痛作用强,消炎,解 热作用和其它同类药相似,对慢性炎症活性较弱.洛索洛芬 钠片用于慢性关节炎,变形性关节炎,腰痛,肩周炎,颈肩 综合征及手术后,拔牙后的镇痛和消炎.该品种具较好的临 床疗效和较少的副作用,是我国"九五"及2010年医药科 技发展规划推荐品种.本品的作用机制为阻碍前列腺素合成 酶(环氧化酶)的活怪,抑制前列腺素的合成,从而达到镇 痛,抗炎作用.研究显示,洛索洛芬钠的抗炎镇痛作用是吲 哚美辛,酮洛芬及萘普生的4,6倍,口服药物后,在胃肠 道迅速吸收,1小时左右血药浓度能达到峰值,且不良反应 小,尤其是对胃肠道的耐受性较好.关于该药的测定方法国 内外采用HPLC和HPLC—MS方法的均有报道.但流动相 配制复杂或血浆预处理方法繁琐且成品高.本实验建立了一 种新的高效液相色谱紫外检测法,简单,准确,快速地测定 了人血浆中的洛索洛芬钠浓度,比较了国产与进VI洛索洛芬 钠片(各60mg)的人体药动学参数,进一步对两种制剂的 相对生物利用度进行了等效评价. 1实验方法 1.1材料 1.1.1药品与试剂:?供试制剂:洛索洛芬钠分散片,批 号:060813,规格:60mg/~C,有效期:暂定二年,由江苏 万高药业有限公司提供.?参比制剂:洛索洛芬钠片,批 号:070050,规格:60rag/YC,有效期:三年,上海三共制 药有限公司生产.?标准品:洛索洛芬钠标准品,批号: *合肥市第一人民医院药学部(230061) 2008年3月18日收稿 100638—200401;酮洛芬标准品,批号:100337—200502, 均由中国药品生物制品检定所购买.?试剂:磷酸二氢钾, 分析纯,宜兴市展望化工试剂厂;磷酸,分析纯,上海苏懿 化学试剂有限公司;三乙胺,色谱纯,天津市光复精细化工 研究所;乙腈,色谱纯,美国n,D试剂公司;纯净水, 杭州娃哈哈集团有限公司. 1.1.2仪器:日本岛津公司高效液相色谱仪:LC一10ATvp 溶剂输送泵,SPD一10Avp紫外一可见检测器,20定量 管,Chromato—SolutionLight色谱中文数据系统,VP—ODS C18色谱柱;DELTA320型精密PH计(梅特勒一托利多仪 器(上海)有限公司);TDL80—2B型离心机(上海安亭 科学仪器厂);GL一16G—lI型高速冷冻离心机(上海安亭 科学仪器厂);SZ一1型快速混匀器(江苏金坛市金成国胜 实验仪器厂);FCD一238GS型冷藏冷冻冰柜(青岛海尔股 份有限公司);ALl04/01型电子分析天平(梅特勒一托利 多仪器(上海)有限公司);金花牌系列取液器(北京青云 航空仪表有限公司)等. 1.2洛索洛芬钠血浆样品测定方法 1.2.1色谱条件:色谱柱:?一OBSC18色谱柱4.6mm ×150mm,5;流动相:0.05mol/L磷酸二氢钾一乙腈= 58:42用三乙胺调PH=5.68;流速:1.0ml/min;柱温: 室温;波长:230nm.灵敏度:O.005AUFS~进样量:20. 1.2.2血浆样品的预处理:精密量取血浆2O0l置2.0ml 具塞试管中,精密加入内标酮洛芬20(50~g/m1)混匀, 加20(10%)硫酸锌和180~1甲醇,于快速混匀器上混合 2min沉淀蛋白,置于高速冷冻离心机以12000r/min离心 10min,取出上清液再置于高速冷冻离心机以12000r/min离 心10rainl,取20直接进样分析,以内标法峰面积比定量. 1.2.3血浆中洛索洛芬钠标准曲线:精密吸取不同浓度的 2008年5期13 洛索洛芬钠标准贮备液20,置2.0ml具塞试管中,加入空 白血浆2o0,配制成每毫升血浆含待测物洛索洛芬钠分别 为0.1,0.25,0.5,1,2.5,5,10g?ml一1的标准血浆样 本,按上述"血浆样品处理方法"项下自"精密加入内标酮 洛芬20(50t~g/m1)混匀"起同法操作,并以上述色谱条 件进行测定,建立洛索洛芬钠的标准曲线.以待测物洛索洛 芬钠浓度(X,9g/m1)为横坐标,待测物洛索洛芬钠色谱 峰面积()与内标酮洛芬色谱峰面积()的比值(Y= /)为纵坐标,用加权(1/X2)最小二乘法进行线性回 归运算,求得的直线方程即为标准曲线.三天方法学确认结 果为:Y=0.004+0.143X(r=1.000)Y=0.002+ 0.147X(r=0.998)Y=0.004+0.148X(r=1.000). 洛索洛芬钠在血浆中的最低检测浓度为0.1g?一1. 1.2.4回收率测定:取空白2.0ml具塞试管分别精密加入 不同浓度的洛索洛芬钠的标准溶液20及空白血浆200~1, 配制成低,中,高三个浓度(0.25,1和5~g/m1)血浆样品 各三份,按上述血浆样品处理方法,自"精密加入内标酮洛 芬20(50~g/m1)混匀"起同法操作,得到洛索洛芬钠与 内标酮洛芬峰面积之比值(H)/Ai(H);另取空白 2.0ml具塞试管,分别精密加入不同浓度的洛索洛芬钠标准 溶液及内标酮洛芬的标准溶液配制低,中,高相同浓度的对 照品溶液各三份同法进样分析,得到洛索洛芬钠与内标酮洛 芬峰面积之比值(D)/Ai(D).按下式计算提取回收率 (%)=[(H)/Ai(H)]/[(D)/Ai(D)]× 100%.结果见表1 表1血浆中洛索洛芬钠回收率 0s 1100.72899.204104.590 21o4.70995.075107.135 399.205101.805106.542 MEAN101.54798.695106.089 SD2.84223.39361.3316 :RSD(%)2.7993.4391.255 1.2.5精密度试验:按"回收率测定"项下配制低,中, 高三个浓度(0.25,1和5~g/m1)的血浆样品各200~1,按" 血浆样品处理方法"项下自"精密加入内标酮洛芬20 (50t~g/m1)混匀,"起依法操作,在不同天内连续制备并测 定3个分析批,每批样品三个浓度水平,每个浓度5份样 品,计算批内和批间的相对标准差(RSD)均小于15%,测 定结果见表2,测定结果表明,血浆样品分析的精密度良 好. 表2洛索洛芬钠血浆样品批内与批间精密度 1.3受试者的选择和实验方案 1.3.1受试者选择:18名男性健康志愿受试者,体重 65.61?5.63Kg,年龄23.2?1.13岁,,在充分了解该药相 关药理,毒理及可能与药物有关的不良反应后,分别进行知 情同意谈话,自愿签署知情同意.经体检证明心肝,肾功 能指标在正常范围内,实验前两周及实验期间停用其它任何 药物,实验期间统一饮食.研究方案经医学伦理委员会批 准. 1.3.2给药方案:采用双周期两制剂交叉试验设计;男性 健康受试者18名,根据身高,体重相近原则,两两配对, 编成9个层次组,组内按随机数字逢单编为A组口服参比 制剂,逢双编为B组口服试验药物,服药方法:禁食12h后 温开水送服.受试者在服 于次日清晨单次口服实验药品,用 药抽血期间禁烟,酒,服药2h后可以饮水,服药4h后给予 低脂肪标准饮食.受试者于服药后在I期临床病房观察室中 停留12小时.受试者试验期间始终在主管医师和护理人员 的监护下,试验室内备有常用的抢救设备及药品.一旦出现 严重的不良反应,应采取相应的急救措施和治疗,并及时记 录.受试者在服药后避免剧烈活动,亦不得长时间卧床.1 周后再交叉服药. 1.3.3血样的采集:每例受试者均于服药前5min在前臂静 脉安置留置针,抽取空白血样3ml.并分别于服药后10rain, 20min,30rain,45rain,1.0h,1.5h,2.Oh,3.Oh,4.Oh, 6.0h,8.0h各采血3ml,血标本收集于洁净,干燥的玻璃管 内,室温静置后离心分离血浆,血浆样本置一20?低温冰 箱避光保存备测. 1.3.4数据分析:及均为实测值;消除半衰期一曲线下 面积分别按下式估算: 0.693 1/2一T AUCo一=?(G+I+G) AUCo一..=?(c+1+c)+ 为末端消除常数,用对数血药浓度一时间曲线末段直 线部分斜率求得,Cc为最后取样点血药浓度.所得参数 (AUCo一,AUCo一..)先进行自然对数转换,再用交叉试验 设计的方差分析,并进行单双侧检验(显着性水平= 0.05).TI直接进行非参数检验. 2结果 2.1色谱行为:本研究建立的方法专属性好,血浆中杂质 不干扰样品测定,洛索洛芬钠保留时间约为4.6min,酮洛 芬(内标)保留时间约为5.6min(见图1).最低检测浓度 可达0.1txg.一1,在0.1,10?ml一1浓度范围内,呈现 良好的线性关系,可满足临床药代动力学和血药浓度监测的 要求. 2.2血药浓度C一时间曲线T:18名健康受试者单次口服 60mg洛索洛芬钠片受试制剂与参比制剂的血药浓度C(g? I一1)一时间T(h)曲线如图2. 14内蒙古中医药 ABC 图1洛索洛芬钠色谱图 A:空白血浆样品;B:空白血浆加入洛索洛芬钠和酮洛芬(内 标);C:受试者口服洛索洛芬钠片后血浆样品 均数对比 时问oI) 图218名健康受试者单次口服60m~g洛索洛芬钠片受试 制荆与参比制剂的血药浓度C一时间T曲线图 2.3药代动力学参数:按"1.3.4"部分内容估算的18名 健康受试者口服洛索洛芬钠受试制剂和参比制剂的主要药动 学参数,结果见表3. 2.4生物等效性 2.4.1相对生物利用度:根据:相对生物利用度F= AUC(0一t)/AUC(0一o.)×100%计算洛索洛芬钠受试 制剂的AUC(0一t)生物利用度和AUC(0一o.)相对生物 利用度,结果见表3. 2.4.2生物等效性考察:用DAS2.1.1程序对受试制剂与 参比制剂的AUC(0—8),AUC(0一o.),Cmax,经对数 转换后进行方差分析和双单侧检验,90%可信限考察,1n (AUCI)一8),In(AUCI)一o.),ln(Cmax)的90%双单侧 检验结果分别为92.5%,102.4%,91.9%,102.3%和 99.9%--112.1%,结果表明,两制剂生物等效. Tmax-~参数法检验(配对Wilcoxon法),结果见表4 表318名志愿者单剂量口服 60rag洛索洛芬钠片后的药动学参数 表4Tf非参检验(配对Wilcoxon法)结果 表明两者无显着性差别(P>0.05). 3讨论 本实验经过对色谱条件的多次优化,最终选定 0.05mol几磷酸二氢钾一乙腈=58:42用三乙胺调PH= 5.68作为流动相,不仅配制简单,且色谱基线平稳,峰形, 分离度及保留时间均令人满意.我们参考文献,在对蛋白沉 淀剂浓度及加入量的选择中,单纯的使用甲醇和乙腈作为沉 淀剂,结果不理想,杂质多且基线不平稳.因此,本实验选 择加入20(10%)硫酸锌和180t~l甲醇为沉淀剂,可以在 很大程度上排除杂质的干扰和提高检测灵敏度.与文献方法 比较,建立的},_Uv测定方法影响因素少,无需特殊 的检测器,灵敏度较高,能满足临床血药浓度检测与药代动 力学研究要求,且适用性更广. 隔姜隔盐灸治疗剖宫产后尿潴留的临床观察 高明清吴林瑾 摘要:目的:探讨隔姜隔盐灸治疗軎】宫产后尿潴留的疗效与安_金性.方法:将87例产后尿潴留患者(軎】宫术后菝除留置 尿管?5h不能自行排尿的),按入院顺序随机分为治疗组和对照组.治疗组45例,使用隔盐,隔姜灸;对照组42例,采用 传统的热敷,诱导,按摩等排尿方法,观察两组排尿时间及产后出血的情况.结果:治疗组在30,60Il1in排尿率达 88.89%.对照组排尿率为61.90%,明显低于治疗组,组间差异具有统计学意义(P<0.01),且两组在产后24—48h内阴 道出血量没有显着差异.结论隔盐,隔姜灸是一种安全有效的治疗剖宫产后尿潴留的护理措施,大大降低了因产后尿潴留 而留置尿管的导尿率,减轻了产妇痛苦,减少了院内感染的发生率. 关键词:隔盐,隔姜灸;治疗;剖宫产;产后尿潴留 中图分类号:R473.71文献标识码:A文章编号:1006—0979(2008)05—0014—02 *都江堰市中医院针灸科(611830);**成都中医药大学七年制 针灸英语专业毕业生 2008年3月20日收稿 65432l0 一_【目/80世蠖