【doc】用选择培养基自牛外阴和阴道前庭分离棒状杆菌

【doc】用选择培养基自牛外阴和阴道前庭分离棒状杆菌 用选择培养基自牛外阴和阴道前庭分离棒 状杆菌 国外兽医学一畜禽停荣病第卷9第2j9II9B?年5 用选择培养基自牛外阴和阴道前庭分离棒状杆菌 TakashiHiramune等 摘要将20g/m1磷霉索和2g/m1两性霉索B 自污染粪或碌的母牛标本分 离屎棒状扦菌.采用谈培养基对2tn头外观照康的母牛涮定 了棒状杆菌在阴门和阴遭前雇的分布情况.多毛棒长杆菌 曲分离率为l6.2.肾棒状杆茁的分离卑分剐为5.T弦和 6.6.由阴门憧出的菌数高于阴遭前斑的蕾鼓.结果 明牛碍门可能是适于多毛棒捩杆菌和肾棒状扦菌的牺息部 位-这与宴验中棒状杆菌在外阴上皮细艟醺附最好相一致. 过去的实验表明,牛泌尿系统中棒状杆 菌和多毛棒状杆菌与阴门上皮细胞吸附力最 强已有报道多毛棒状杆菌和肾棒状杆窟分 布于外观建康的母牛尿道口和外阴道前庭 中,但对牛阴门内存在碌棒状杆菌却未作过 研究.由于粪或碌的污染,需要一种选择培 养基.分离棒状杆菌. 车研究旨在制备一种选择培养基,用以 自牛阴门中阴遭前庭检出棒状杆菌. 材料和方法 菌株以肾棒状杆菌ATCcI94l2), 多毛棒状杵菌(ATCC29592),,膀胱炎捧 状杆菌(ATCC29593),.金黄色葡萄球菌 (Kitami.8.9D),无乳链球菌(ATCC 27956),枯草芽孢杆菌(ATCC683)和埃 希氏大肠杆菌(NII-IJ)用作药敏试验: 培养基含5马血的心浸液(HI)琼 酯作药敏试验. 抗生素敏感性分析和筛选试验一样, 每块滤纸圆片浸醵下列不同抗生素;磷霉素 (FOM),氨苄青霉素,苄青霉索,磺苄青 霉索,四环索,土霉素,卡那霉素,庆大霉 素,链霉素,角沙霉素,头孢塞吩,氧霉索, 新生霉素,多粘菌素E,丁胺卡那霉素. 筛选试验后,以琼脂稀释法检铡对FOIvl 的最低抑菌浓度(MIC)除孵育棒状杆菌48 小时外,37?下培养24d',时的一铂耳胰蛋白 酶解酪蛋白大豆肉汤(BBL)培养物,在含 不同浓度FOM的?琼酯平板中划线,于3? 孵育24,48小时后,记录FOM的MIC, 由牛阴门和阴道前庭分离尿棒状杆茵 1986年3月,5月,对北海道Ebetsu市和其 周围5群牛中的210头外观德康母牛进行了 检查.3群有膀胱炎或肾盂肾炎发病史,2 群无此病史.用无菌拭子揩擦明门和阴道前 庭表面.拭子采样后冷存,于3小时内送到 ' 血清2型侵入易感种猪群通常继之以急 性爆发,然而有些猪群感染岛.开始即呈隐 性.在这样的一个猪群中,23份种猪血样有Jr 5份血清2型抗垮沛.度为1:1,:40,18 份有相同水平的血清6型抗体. 小结 在控制种猪群兔受App感染及为棍除这 一 感染而实施的捡疫一屠宰程序中,应考虑 到血清型问的交叉免疫.猪群中存在2种以 ?, 上的血清型时会影响到临床发病率和血清学 犀同时适应认到交叉免疫可使它血 清型存在于鼻腔或其它呼吸系统粘膜而不发 生血清阳转这提示我们携带这一血清型的 猪比血清学检验预测的要多. (参考文献I5麓从略) , ? C0n.Vet.J.,1988,29(7) 580,582(英文) 武占烬译梁威校 实验室作细菌培养.将拭子放入5ml无菌盐 水中,以洗液连续1O倍稀释,将10,1O—s 稀释液各0.1m1分别接种到选择培养基,37? 孵育48/J~时后,计算菌落.每份标本取4, 8个菌落检查尿棒杆菌的存在. 结果 在检1冽的15种抗生素中,只有FOM对 碌棒状杆菌生长无干扰,但却抑制其它细菌 生长. 尿棒状杆菌对FOM有明显的抗药性, MIC为25000,75ooo~g/ml.而其它菌种 对FO.VI敏感,MIC范围为12.5,25.0~g/m;. 根据这一结果制备选择培养基,配方由 胰蛋白酶解酪蛋白大豆琼酯(BBL),FOM 200vg/ml,两性霉素B2~g/ml和5脱纤马 血组成 采用FOM,两性霉素B抑制真菌生长; 将胰蛋白酶解酪蛋白大豆琼脂经高压灭菌后 保存于5O?.加入马血清混匀倒入平皿内, 平板用于自母牛分离尿棒状杆菌. 自210头母牛中的l2份阴门标本(5.7) 和l4份阴道前庭(6.6)标本分离出肾 棒杆菌.从阴门和阴道前庭分别有34份 (16.2)分离出多毛棒状杆菌.从外观健 康母牛的标本中未分离出膀胱炎棒状杆菌 以十,抖和卅表示由10_.,1O和10 标本检出尿捧状杆菌数.从阴门分离菌落数 达卅的为10.9,高于++或+的分别为 8.5和2.3.从阴道前庭分离菌落数达卅 的为4.7,低于抖或+的分别为7.6和 10.5. 讨论 FOM和抗生素一样可抑制细菌肚聚糖的 台成.Kahan等证实,FOM可侵害丙酮酰 (Pyruvy1)转化酶,这是干扰细菌胞壁台 成的第一步. 本研究结果表明,尿棒状杆菌对FOM有 明显的耐受性,而金黄色葡萄球菌,无乳链 球菌,枯草芽孢杆菌和埃氏大肠杆菌敏感. 由此推测,尿棒状杆菌和测定的那些细菌胞 壁台成步骤存在差异. 含FOM的选择培养基可发现牛阴门内 的多毛棒状杆菌和肾棒状杆菌,然而因为该 培养基不抑制尿棒状杆菌和其它种棒状杆 菌,有必要区分生长的菌落是否为尿棒状杆 菌.由阴门分离棒状杆菌的数量高于阴道前 庭表明,阴门是适于多毛捧状杆菌或肾捧状 杆菌生存的部位,并象Hayash[等所讨论的 那样,泌尿系统组织中,阴门可能是细菌首 先侵入部位.患膀胱炎或肾盂肾炎的母牛排 泄含有大量尿捧状杆菌的碌液,在畜舍地板 上和圈栏土壤里直接或间接污染临近母牛的 阴门. Hayashi等报道,土壤内有活的尿棒状 杆菌.过菌的圈栏土壤中,肾棒状杆苗和 膀胱炎捧状杆菌分别可存活56~R63天,多毛 棒状杆菌至少可存活210天.然而,在未灭 过菌的圈栏土壤中,肾棒状杆菌和多毛状杆 .菌至少可存活l8天,可检出1O个菌,以后 由于污染增加而无法算出存活的菌数.目前 我们正采用这种选择培养基对未灭菌土壤, 术屑和母牛粪便分离存活菌 本文f选择培养基不仅明确尿捧杆菌在 母牛中的分布情况,且可用于作为重要 污染源的土壤和畜台地板内的棒状杆菌. Jpn.J.Vet.Sci.,1988,50(1)I111 ,ll4(英文) 齐杖英译陈乃昌柱(本予J删节)