高效液相色谱法测定沉香化气丸中橙皮苷的含量

高效液相色谱法测定沉香化气丸中橙皮苷的含量 高效液相色谱法测定沉香化气丸中橙皮苷 的含量 中国药师2006年第9卷第10期ChinaPhamacist2006,Vo1.9No.10 高效液相色谱法测定沉香化气丸中橙皮苷的含量 周宜斌(潜江市药品检验所湖北潜江433100)冯海龙(湖北省药品检验所) 摘要目的:用HPLC法测定沉香化气丸中橙皮苷的含量.方法:Hype~ilCi8柱 (200mmx4.6mm,10m),流动相为:乙 腈一0,1%磷酸溶液(20:80),流速为1.0m1.min一,检测波长为283nm.结果:橙皮苷 在0.49—2.46g范围内呈良好的线形 关系,r=0.9999,平均回收率为98.6%,RSD为1.0%(n=5).结论:方法操作简便,重现性 好.可作为该药的质量控制. 关键词沉香化气丸;橙皮苷含量;HPLC 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1008-049X(2006)10-0907-02 DeterminationofContentofHesperidininChenxionghuaqiPillsbyHPLC ZhouYibin(HubeiProvinceQianjiangInstituteforDragControl,Hubei,Qianjiang433100, P.R.China);FengHailong(HubeiProv. inceInstituteforDrugcontro1) ABSTRACTObjective:ToestablishanHPLCmethodfordeterminationofhesperidininche nxianghuaqipills.Method:AHypersil C18column(200mm×4.6mm,10I.Lm)wasused,themobilephasewasacetonitrile一 0.1%phospho6cacidsolution(20:80)the flowratewas1.0ml'ml,.Thedetectionwavelengthwas283nm.Result:thelinearrangeofhesperidinwas0.49—2. 46g(r= 0.9999),theaveragerecoverywas98.6%,RSD=1.0%(,毫 =5).Conclusion:Themethodissimple.accurateandCanbeusedfof qualitycontmlofchenxianghauqipills. KEYWORDSChenxianghuaqipills;Hespridin;HPLC 沉香化气丸收载于《中国药典}2000年版一部 由沉香,木香,广藿香,香附(醋制),砂仁,陈皮,莪 术(醋制),六神曲(炒),麦牙(炒),甘草十味中药 材加工制成,具有理气疏肝,消积和胃的作用?]. 标准中无含量测定项,不利于质量控制.橙皮苷为 方中陈皮的主要成分,橙皮苷的测定方法有薄层扫 描法J,高效液相色谱法等,现用高效液相色谱 ,准确, 法测定橙皮苷的含量,结果表明该方法简便重复性好,可作为该制剂含量测定方法,并被《中国 药典}2005年版收载. 1仪器与试药 高效液相色谱仪日本岛津LC.10ATVP泵,岛 津SPD.10AVP紫外检测器,CTO.10ASVP柱温箱, 江申色谱工作站;橙皮苷对照品由中国药品生物制 品检定所提供(含量测定用,批号0712.200010);沉 香化气丸(湖北端药药业有限公司等单位提供,规 格:每瓶50g).乙腈为色谱纯,水为重蒸馏水,其 他试剂均为纯. 2方法和结果 2.1色谱条件 色谱柱:HypersilClR柱(200mm×4.6mm,10 Ixm),流动相:乙腈.1%磷酸溶液(20:80),流速为 1.0ml-min..,检测波长为283nm;理论塔板数以陈 皮苷峰计算为不低于2000. 2.2供试品溶液的制备 取本品适量,研细,取约0.5g,精密称定,置索 氏提取器中,加甲醇适量,加热回流提取3h,取提取 液,用少量甲醇分次洗涤容器,合并提取液,浓缩至 适量,转移至50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇 匀,用0.45m滤膜滤过,作为供试品溶液. 2.3对照品溶液的制备 精密称取橙皮苷对照品适量,加甲醇制成每1 ml含50g的溶液,用0.45m滤膜滤过,作为对照 品溶液. 2.4阴性溶液的制备 按处方量及照"2.2"项下方法制备不含陈 皮药材的阴性样品溶液,用0.45Ixm滤膜滤过,作为 阴性样品溶液. 2.5干扰试验 取上述对照品溶液,供试品溶液及阴性样品溶 液按上述色谱条件测定,橙皮苷峰和供试品中其他 组分色谱峰可达到基线分离,阴性样品溶液对陈皮 苷的测定无干扰,见图1. 2.6线性关系考察 精密称取橙皮苷对照品12.3mg,置50ml量瓶 中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取25 , 通讯作者:周宜斌,男,主管药师,从事药品检验工作.Tel:(0728)6243739 研究论文 ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密 吸取上述对照品溶液2.0,3.0,4.0,6.0,8.0,10.0 m1分别置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀, 分别取20l进样测得峰面积,以峰面积为纵坐标, 进样量为横坐标,回归方程为Y=8.68×10X+ 1.22×10,r=0.9999,陈皮苷在0.49,2.46ug之 间呈良好线性关系. 誊毫 =__ t(min) A A.对照品 ?; 1580000527l0.54l580 B.样品C.阴性溶液 图1橙皮苷色谱图 t(min】 C 1.橙皮苷 2.7精密度试验 取同一供试品溶液,连续进样5次,测定峰面积 的兄为0.3%. 2.8稳定性试验 取同一供试品溶液,在室温放置,间隔2h测定 峰面积,测定4次结果峰面积的RSD为0.2%,说明 供试品在8h内稳定. 2.9重复性试验 取同一批号(批号030401)样品同法制备5份 供试品溶液,依法测定峰面积进行计算,结果橙皮苷 的平均含量为4.34mg?g,,RSD为1.0%. 2.10加样回收率试验 精密称取已知含量(4.34mg?g)的同一样品 5份,分别精密加入一定量的橙皮苷对照品,按供试 品溶液的制备法制备供试品溶液,按所给色谱条件 测定峰面积,计算回收率,结果见表1. 2.11样品测定 收集不同生产厂家,不同批号的样品10批,每 批样品测定四次,按照供试品溶液制备方法制备供 试品溶液,按所给色谱条件分别取供试品溶液和对 照品溶液进样,测定峰面积,用外标法计算含量,结 果见表2. 表1加样回收率试验结果(n=5) 取样量样品含量加人量测得量回收率平均回收率RSD (g)(mg)(mg)(mg)(%)(%)(%) 050132.182.154.329953 0.50892.2l2.154.3l97.62 O.50452.192.154.3399.6298.61.O 0.50352.192.154.2897.53 0.50392.192.154.3l98.6o 表2样品含量测定结果(n=4) 样品平均含量RSD样品平均含量RSD (批号)(mg?g)(%)(批号)(mg?g)(%) 03051l5.521.30307033.681.7 0306O93.951.50308034.O30.9 02082l5.O51.20309054.681.4 0304245.3l1.502090l3.991.O Ol04O25.1l1.1O3O40l4.341.8 3讨论 3.1试验曾采用不同提取方式,不同提取溶剂,不 同提取~,-Jl司对样品进行处理,结果以用甲醇索氏提 取3h测定结果较满意,提取的杂质少,干扰小,橙皮 苷峰与其它组分峰能达到良好的基线分离,理论板 数大于2800. 3.2本实验采用了乙腈一0.1%磷酸(20:80)为流 动相,曾采用不同比例进行测定,结果以乙晴一 0.1%磷酸(20:80)为流动相进行测定,分离橙皮苷 的峰形良好,基线分离良女『. 3.3陈皮为沉香化气丸的主药,橙皮苷为陈皮的主 要成分,故可以橙皮苷作为本药的质量控制的定量 指标.本方法简便,灵敏,准确,重现性好,可用于本 品的质量控制. 参考文献 1中国药典[S].2000年版.一部.479 2旧筱铬,陈晓亮,王政峰,等.陈皮饮片中I54皮苷的高效薄层扫描 定量[J].中成药,1988,10:19 3唐志杰,刘丛盛,林小燕,等.高效液相色讲法测定陈皮中橙皮苷 的含量[J].中成药,1994,16(3):43 (2Oo6旬3-22收稿200658修回) ,, 欢迎订阅2007年《药物分析杂志》 《药物分析杂志》由中国药学会主办,中国药品生物制品检定所编辑出版.主要报道化学药物,中药与天然药 物,抗生素,蛋白质,多肽类药物,生物技术药物等的分析,质量标准研究,临床药物分析,药物分析基础理论与实践 以及新方法,新技术的应用,并及时报道国家重大研究课题的最新成果.该刊为我国自然科学核心期刊,被国内外 主要检索系统收录.月刊,大16开本,每期96页,国内外公开发行.每期定价15元,全年定价180元,国内邮发代 号:2-237.欢迎广大读者到当地邮局订阅,并欢迎有关专业人员集体订购,价格从优.地址:北京市天坛西里2号 (100050),联系人:刘小帅.电话(010)67058427,传真(010)67012819.E-mail:ywfx@nicpbp.org.cn.