[doc] 循环中狼疮抗凝物与检测方法进展
循环中狼疮抗凝物与检测方法进展
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【综述】
【Renews】
医学榆验杂志2008年2月第9卷第1期
ChineseJournalofMedicalLaboratory”Technology,Feb2008,Vo1.9No.1
循环中狼疮抗凝物与检测方法进展
ADVANCEMENTINRESEARCHES0FCIRCULATINGLUPUS
ANTICOAGULANTANDITSDETECTINGMETHODS
阳泽彬,综述王金良,审校
(大津市公安院,天津300042)
摘要m循环rfl的狼ds
ynZebin,WangJinliang.TianjinHospitalofPublicSecurity,Tianjin300042,Chim~
AbstractBothofthecirculatinglupusanticoagulantandtheantiphospholipidantibodyarethenecessaryindexesforthediagnosisof
antiphospholipidsyndrome.Basedontherecentforeignliteratures,thepossiblepathologicalanticoagulantsinthebodyandtheirrelateddis—
easeswereintroduced.Meanwhile,themechanismsofthrombosisformationwereexplored.
KeywordsCirculatinglupusanticoagulant;Detectingmethods;Indication;I
nfluencingfactor
[中分类]R446.6[文献怀码]A[义章编号]1606—8025(2008)01—038—02
体内的JF常抗凝系统之外【IJ’能的病理性抗凝物大休
}_?f分为类:,心仃?;f0L症状的,女II抗【大l子?,抗予
?,抗因子?,抗l天l子X,抗于?,抗vWF子,抗纤维蛋白
/纤维货,肝素样抗凝物.,忠者fIJ’能有程度同的出
血者,如抗子V.,忠本尢出血症状者,甚至易形成
血栓者,耍?狼疮抗凝物,抗【人l?.
狼疮抗凝物(LupusAnticoagulant,I,A)足町住体内一然产
乍或冈自身免疫In』产,I的质免疫球自,它可B2精蛋
白1(132GP1),凝血附原及』他柯负IU衙的磷脂结合lmf使磷脂
依赖性的凝时问延长..IAj10【清抗磷脂抗体两各均为阳
性是诊断抗磷脂抗综合的依据.适川于『f『L僻性血柃患
或习惯性流产和北胎的殳I女.TJA持续出现阳性常可提示10L
栓复发I而需继续fl服抗凝J翊J,长期服用抗凝剂会仃出血的
危险,此时的lJA{{;=测对决定继续服药起着关键性作用.
本文拟就TJA试验的进展与枪测巾的『廿J
作一介绍.为使内
容集中,不涉及抗磷脂抗体的问题.
lIA检测的适应症
(一)年轻((50岁)的静脉和/或动脉血栓的患者.柃塞
部位常住肺部或脏器质.
(二)伴有或尢f1身免疫病的患者(SLE,RA,自身免疫性
血小板减少,闩身免疫怍溶帆性贫血等)
(二)有惯性流产或死胎的女}女.
2LA和抗磷脂抗综合征的血栓形成机制
主要有:促发蛋fjC或蛋rjS途径的障碍,抑制组织因子
的活化途径,使内皮细胞的纽带素(Annexin)发生置换,促使咀
小板和内皮细胞的活化,诱发组织子的活化和合成,影响纤
维蛋白溶解功能,使纤溶酶原激活物的抑制物增多以及诱发
细胞凋亡等.
3LA试验的类型和选择
斟际栓j止血学会(ISqH)的抗磷脂抗体/狼疮抗凝物
分会提的诊断
为:
(一)1个或更KI』’_f『日J的磷脂依赖性凝血时问延长,即超
过_r参考值的I限.
(二)能址明此种时U延长址于标水中含有抑制物;而
不是山于凝『大1子缺乏.
(三)明此抑制物uf抑制负电荷磷脂蛋白复合物,而
是抑制某一凝『人i_『.
根据以f:标准而
f”旧层次的试验类型.
3.1筛查试验
3.1.1传统应用AIWF(部分凝血活酶时间)和KCT(白陶土
凝血时间)试验AI:qT试验用不ld厂家制备的试剂因磷脂的
成分和浓度不同而出现差异.如含磷脂酰丝氩酸量多的试
剂会减低榆出率.对磷脂成分的要求足最好能鉴别出LA和
凝血了抑制物,尤困难的是能攀别LA和抗?闪子抑制
物.
3.1.2KCT试验此法磷脂含景较低而比Am试验敏
感,fH白陶上试剂不能用于光学法的检测H’易于形成沉淀物.
此试验对凝血试验时问长的标小重复性差.近期有人硅微粒
子代替白陶土,试验的敏感件一致,可川于光学法检测且不形
成沉淀.
3.1.3稀释蝰蛇毒试验(dRVVT)此法的原理足以蝰蛇毒
激活因子X稀释的磷脂一起用于柃测.此法的特异性好,
在临床上应用较多.Galli等曾比较dRVVTjKCT试验.结
果前者对有血栓高危险性的患肯敏感性更佳』.Pengo等也
发现dRVVT对~2GP1抗体性的IJA更为敏感.检测为阳性的
患者更易形成动脉血栓,但并非所有厂家的试剂都能达此效
【『1国医学检验杂志2008年2月第9卷第1期ChineseJoumalofMedicalLaboratoryTechnolo.Feb20o8.voL9No.1
果J.
3.1.4稀释凝血酶原时问也曾作为筛查试验现已有基因
重绀的凝血活酶用于柃测.此法应用较少.l述各种筛查试
验均小能100%柃出I|A,最好廊用2个试验,即dRVVT结合
Am或KCT试验.女【l果只能作Am,需用1个敏感性高配
合1个敏感性低的试剂来检测.TA试验性的患者廊12
川后经再次榆测确定.
3.2混合试验等量混合患者血浆与正常者血浆进行柃
测.如凝『f『I.时问缩短,
明能由于缺乏某个或多个凝因
子.如仍不能纠,则表明患浆内有抑制物.此试验虽
简单,但fE常面l浆需}fl多个(3O人以l)健康者血浆混合制成,
冻存于一70~C,冻f的商Il1]I』l常血浆也应符合此要求.混合
试验的结果解释应慎重.判定心延长的凝血时问是否被纠
jFJ,遵循3个标准:
3.2,1纠正试验结果应达正常参考值以内参考值要依实
验室的仪器,试剂等条件I(1i门行测定Inj得.结果最好以患者/
健康者的凝时『u】比值来报{.
3.2,2正常血浆加患者血浆纠正试验的凝血时间比正常血
浆加非IA(凝血因子缺乏)血浆的凝血时间要长(>均值的
2s,
3.2.3要符合Rosner等提出循环抗凝物(ICA)的计算指
数
ICA=[(Ctmix—CTnpp)/CT患者]×100
CTmix混合凝血时.Npp]1-常混合10L浆
如ICA值越大,捉爪越有可能存在抑制物.此标准需由
实验室经测定决定其界限值(切点).混合试验的不足足可
有假阴性,对弱的IJA能榆【}|.
3.3确证试验有数种试验可供选择.
3.3.1以老化的血小板经反复冻融后作为磷脂,进行Am
或dRVVT或KCT试验.
3.3.2用人工合成的双层或立体结构的磷脂进行上述试验.
此类确1试验也行缺点,女I1含肝素的ff『L浆会有IJA样作
用,采取血标小时绝小能朋肝素抗凝.含抗凝冈子的If『【浆(如
血友病患者)会行IA样作用,必须仔细问讯病史以排除.
34复合试验即将筛_杏试验确证试验合并,分别jH1低
浓度(低)干?高浓度(高)的磷脂作2次ATrr或dRVVT或
KCT试验.试验结果进行计算:低浓度的时问一高浓度的时
间/低浓度的时问×100或计算低浓度时/高浓度时比值.
也有冉加作一患者血浆与正常血浆的混合试验.此法简单义
可靠,frI也需刚更多的患者标本进一步证实.
4检测前阶段的影响因素
检测血浆tI一所含的Ifl1.IJ~板量是重要的因素,儿其是当血
浆冻存后再复溶时,浆内的磷脂会明升高.Sletnes等观
察,常用的3000离心血小板的残留最高达16×10/L,而用滤
器过滤后可为0,故小经过滤会使检测的时间假忡缩短.用重
复离心法或川0.2m乙酸纤维素薄膜过滤的结果满意.
也有研究发现,过滤可引起高分子量凝血蛋白(vwF,因子?)
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的丢失,造成APrr时问的假性延长.
5LA试验尚待解决的问题
服用维生素K的拈抗剂(如Coumarin)的患者,其凝血时
问延长与IA相似,使上述的筛查,混合和确证试验结果难以
解释.冈此,必须存停药后检测,或将患者血浆j正常血浆混
合后柃测,也可分别用低浓度和高浓度的磷脂进行试验,或.}}j
蛇毒texterin/ecarin凝血时间法.
抗凝血酶与抗[~2GP1的鉴别.I|A活性可依[~2GP1和凝
血酶的存在与否分为2类,此2类发牛』f『【栓的危险性有差
别,敞有必要加以别.原则I可用固相免疫测定法来分别
检测2种抗体,但检测的方法学尚未标准化.最新的进展是
用分别加和不加心磷脂的确证试验.加者如LA凝血时间缩
短提示为[~2GP1依赖性的LA.另一一法是调整氯化钙的浓
度,分别jH高浓度(10mmol/1)和低浓度(5mmol/1)来促进
152GP1与磷脂的结合,比较2浓度下的APrr或dRVVT.高浓
度的时问进一步延长,表明有152GP1依赖性的LA活性.以上
两法均望成为鉴别试验.
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