补阳还五汤注射液对PAF诱导的家兔血小板聚集功能的影响

补阳还五汤注射液对PAF诱导的家兔血小板聚集功能的影响 补阳还五汤注射液对PAF诱导的家兔血小 板聚集功能的影响 {6一 . 36.中国中医药信息杂志20@0年第7卷第3期 补阳还五汤注射液对PAF诱导的家兔 (广东省佛山市中医院佛山52800)/2.(二_ 一目的:观察补阳还五涵注射液体外培药对血小板活化因子(P^F)谤导的家兔血J板聚集功能寺晦 响.方法:应用体外血小板聚集功能测定法;蛄果:补阳还五淆注射液体外培药可明显抑制家兔洗涤血小板和 未洗涤血小板的聚集功能,对洗涤血小板聚集功托的抑制作用强于耒洗涤血小板,且有一定的量效关系 (P<O.05):蛄论:补阳还五浠注射液对家兔血小板膜上的PAF爱体活性具有一定的抑制作用. l翌血小板活化因子血小板聚集 补阳还五汤(生黄芪120g,归尾6g,赤芍4.5g.川芎,桃 仁,红花,地龙各3g)主治半身不遂,口眼歪斜,语言蹇涩 ,口角流涎,大便干燥,小便频数.遗屎不禁,是目前中风等 血栓性疾病治疗应用额率最高的方剂,且广泛用于治疗冠心 病,深部静脉血桂,肺栓塞等血栓性疾病",补阳还五汤 对^A或ADP诱导的血小板聚集功能均有明显的抑制作用】, 但对血小板活化因子(P]ateletActivatingFactor,PAF)诱 导的血小板聚集功能的影响,国内外均未见报道.本文应用 体外血小板聚集功能测定法观察了朴阳还五汤注射液体外 给药对PAF诱导的家兔血小板聚集功能的影响. 1实验 I.I动物新西兰白色家兔I.8k~3kg雌雄不限,由北京医 科大学实验动物科学部提供 1.2试剂与仅器银杏苦内脂B(浙江宁波立华制药有限公 司)PAF品(sigma):明胶(serva);肌酸磷酸 (CP.Serva);肌酸磷酸激酶(CPK.中国科学院上海生化所); 阿斯匹林(^sA,北京朝阳门药品分装厂){小牛血清白蛋白 (BSA,北京红星生化技术公司)}其余试剂均为国产分析纯. MPG一3D型多能双通道血液凝聚仪(上海高机应用技未研究 所). 1.3药物按《医林改错》原方所载的药味和配方比例,于 北京同仁堂药店购得各种饮片,经北京医科大学药学院生药 教研室蔡少青博士鉴定按文献方法H制各补阳还五汤注射 液(3.6g生药/mlDH}7.0). 2实验方法 2.I补阳还五汤注射液体外给药对PAF诱导家兔未洗涤血 小板聚集功能的影响家兔清醒状态下耳正中动脉取血 (3.8%枸橼酸钠抗凝,I:9)混匀,18"ClO00rpmlOmin离心. 取上层富血小板血浆(PRP),余下的再以18"C3100rpmlOmin ?国家中医药管理局科研基金资助项目 {北京医科大学 离心取上清为贫血小板血浆(PPP)备用.补阳还五汤注射波 系列药液用蒸馏水配制,等比稀释法配成 0.05,0.10,0.20,0.40.0.80.i.60,3.20(g/m]j.取PRP200 ul+5o?l药液{对照用同体积蒸馏水),于37?预温lOmin, 用PPP加50ui相应的药液或对照液调透光度为100%,再在 搅拌下加^10M的PAF标准品5u1于测定管中.测定5min 内最大聚集率.每个样品平行作三管,取均值作为血小板平 均聚集率.并与对照液比较,计算不同浓度的补阳还五汤注射 液体外给药对PAF诱导的来洗涤家兔血小板的聚集抑捌率 2.2补阳还五汤注射蒗体外给药对PAF诱导家兔洗涤血小 板聚集功能的影响家兔清醒状态下颈总动脉插管取血 (3.8%枸橼酸三钠抗凝,1:9)混匀.在4"ClO00rpmlOmin离 心,取上层富血小板血浆,加等体积的磷酸缓冲液 (KHPO0.22g,Na?HPO0.B6g,柠檬酸8.4g.葡萄糖0.44g,涪 于500m]去离子水中.pH:6.5)混匀,在4"C2900rpmlOmin 离心,取沉淀用等体积的磷酸缓冲液悬浮混匀.4?3000rpm 5min离心后弃上清.取血小板沉淀,重复洗涤i次;取沉淀 的血小板加^含有0.196BsA和ImMMgcl的磷酸缓冲液中, 稀释成浓度为(I.4,2.0)×10个/ml的洗涤血小板悬液 (PWP)备用.补阳还五汤注射液系列药液用蒸馏水配制.以等 比稀释法配成0.05,0.10.0.20,0.40,0.80,i.60,3.20(g/m1) .取P~P200ui+50u1药液(对照用同体积的燕馏水),于37 ?预温lOmin,用磷酸缓冲液加501相应的药液或对照液 调透光度为100%,再在搅拌下加^10一的PAF标准品5ul 羽l定5min内最大聚集率每个样品平行作三管, 于测定管中, 取均值为血小板平均聚集率,井与对照液比较,计算不同浓度 的补阳还五汤注射液体外给药对PAF诱导的家兔洗涤血小板 的聚集抑制率. 2.3统计方法所有数据用i?s表示.计算浓度与聚集抑 制率的相关性. 3结果 补阳还五汤注射液体外给药终浓度为(20~80)ug/1, , ]/ 1 2000年第7卷第3期中国中医药信.t-杂志.37. 可明显抑制PAF诱导的家兔洗涤或未洗涤血小板的聚集反应.4讨论 对前者的抑制作用强于后者.有一定的量效关系,相关系数分PAF是由各种炎症细胞和血小板产生的一种内源性脂质 别为0.9358(P<0.05)和o.9536(P<0.05),但终浓度为lOug/介质.它是报强的血小板聚集剂.PAF与血昔内皮细胞,血 ul反而对PAF诱导的聚集作用有促进作用,结果见表1小板等相互作用,在血栓形成过程中起着重要作用,与花生四 表1补阳还五汤注射液体外结药对PAF诱导的家兔血小扳聚集的影响(王?8) 烯酸(AA),ADP同时被称为血小板聚集的三大途径. 已有研究表明:补阳还五汤注射液体外给药能明显抑制 家兔洗涤血小板PAF受体与放射配基的特异性结合.其特异 结合抑制率与银杏苦内脂B相似,但高浓度却反而抑制作用 减弱盯】.结合本文研究结果:补阳还五汤注射液体外给药低 浓度对PAF诱导家兔洗涤或未洗涤血小板聚集效应均有促进 作用,而高浓度却具有抑制作用来看,说明补阳还五汤注射体 外给药可能对PAF诱导的血小板聚集有双向调节作用.此外 本文研究结果表明.补阳还五汤对血小板膜上PAF受体活性 有一定的抑制作用.为补阳还五汤防治血栓性疾病提供了新 的实验依据.但补阳还五汤注射液对PAF诱导的血小板聚集 的双向调节作用有待进一步探讨. 参考文献 1王清任.医林改错.上海:上海科技出版杜.1966.3i 2解建国,朱芳.补阳还五汤对家兔脑卒中影响的研究.中 药药理与临床,1993,(4):1 3谢人明补阳还五汤对血小板聚集功能的影响.云南中医 学院.1989.12(2):10 4陈奇,邓文龙,张世玮.等.中药药理研究方法学.北京: 人民卫生出版社.1994.67~68 5WichaelNChang.PAFandPAFAntagonists.Drugs Fututre,1986,11(10):869 6JosephR,WelchK舭.O'AndreaG,eta1.Platelet ActivatingFactotandRedBloodCells.Thromb Res,1989,53:629~633 7张继平.张玉萍,文风妮.等.补阳还五汤对家兔血小板活 化因子受体活性的影响.中医杂志.1998,39(1O):621 (收稿日期:1999—06—2{) ?欧置加强医疗科研 欧盟委员会近日宣布.今后2年.欧盟的医疗科研活 动将主要是针对严重危害人类生命健康的疾病的研究,同 时将探寻防治疾病的新药物和新方法这表明,欧盟明确 了今后医疗科研的重点,加强了对重大疾病的研究和防 治在欧盟,确认艾滋病,糖尿病,心血管病和癌症是危 害最大的4种疾病.对此,欧盟委员会负责科研的委员菲 利普~middot:比斯坎宣布,欧盟已通过2OOO~2002年的 医疗科研计划,这一计划包括307个科研项目,由欧盟15 个成员国医学研究机构麸同负责,研究费用高选4.94亿 欧元.比斯坎认为,欧盟在今后2年有可能研制出对防治 这些疾病有效的药物和方法1994~1998年,欧盟为此 已花费3亿多欧元,完成近600个研究项目,取得成果 欧盟委员会报告称,欧盟目前共有52万艾滋病患者,还 有为数众多的艾滋病病毒携带者欧洲20多个国家建立 艾滋病临床治疗网络.欧盟37亿多人口中有近20o0万 糖尿病患者糖尿病医疗费用占欧盟医疗总开支8%.法 国巴斯德研究所承担欧盟糖尿病研究项目,在研究糖尿病 致病基因方面已取得重大发现,为揭示塘尿病致病机制提 供了可能欧盟的4个研究小组发现,血管内膜生长因子 对防止动脉阻塞有一定作用欧盟为此成立欧洲基因公 司,研究医治心血管疾病新方法.承担欧盟研究课题的 意大利都灵症研究所发现,一种被称作MET"的特殊基 因,可导致癌细胞转移.该研究将有助于使用生物技术遏 制癌细胞转移上述医疗科研,将取得突破性进展. ?重庆推出新型免煎中药饮片 近日,重庆万阁药业有限公司推出单味免煎中药饮 片,这是国家科委星火计划及火炬计划项目该饮片特点 是随证配方,即冲即服,易携易存,疗效可靠,使患者免 除煎药麻烦.