新药尼麦角林结构确证的谱学研究

新药尼麦角林结构确证的谱学研究 Vo1.7, NO.3 Mar.2005 Comparativestudyonn.1inolenicacidinLinumUsitutissimumL.fromdifferenthabitats SiBing?kun,ZhaoYu?qing (Pharmaceuticalcollege,LiaoningcollegeofTraditionalChineseMedicine,Shenyang,110032,China) IAbstractl0bject:ToevaluatethequalityofLinumUsitutissimumL.andascertaintheoptimizedhabitatofLinumUsitutissimumL. Methods:DeterminingthecontentsofQ?linolenicacidandlinoleicacidinLinumUsitutissimumL.fromGansu,Neimeng,Qinghai, Heilongjiang.YunnanandXinjiangbyGC.ResultsTheaveragecontentsof ??linolenicacidandlinoleicacidare41.57%and21.19% inLinumUsitutissimumL.fromthesixhabitats.Thecontentsofct-linolenicacidandlinoleicacid,fromNeimeng,arethehighestamong thesixdifferenthabitats.Conclusion:Theherbqualitycanbecontrolledandevaluatedbydeterminingthecontentsof?linolenicacid andlinoleicacid. IKeywordslLinumUsitutissimumL.;GC;?linolenicacid;linoleicacid 新药尼麦角林结构确证的谱学研究 李文宋爱华沙沂王金辉 (1.沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016; 2.沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016) [摘要]目的:确证新药尼麦角林的结构.方法:应用EA,UV,IR,MS,'H.NMR,"C.NMR 及SR的测定对新药尼 麦角林的结构进行确证.结果:首次利用COSY,HMQC,HMBC等二维核磁共振技 术对尼麦角林的'H.NMR,"C. NMR谱信号进行了全归属.结论:经谱学研究确证了新药尼麦角林的结构. [关键词]尼麦角林;波谱解析:结构确证;NMR信号全归属 尼麦角林(nicergoline)是中 药麦角的一种衍生物,为麦角碱 类半合成品.尼麦角林药物在胃 肠道外途径给药时具有拈抗一肾 上腺素的作用,主要用于治疗急 性或慢性脑血管障碍或脑血管代 谢不良,急性或慢性周围循环障 碍"目前该药在我国正处于申报 6类新药阶段,具有良好的开发前 景.该药结构较为复杂,至今尚 无有关波谱研究的报道.本文利 用EA,UV,IR,MS,H— NMR,~-NMR,HHCOSY, HMQC,HMBC及SR的测定等谱 学方法对该药的结构进行了研 究,首次对该药的'H—NMR和 ?一NMR谱信号进行了全归属, 根据谱学数据确证了其结构.这 对药品申报过程中尼麦角林的结 构确证和质量控制具有重要的参 ,2o 考价值. 1仪器与试药 红外光谱使用BrukerIFS55型 傅立叶变换红外光谱仪测定,溴 化钾压片;紫外光谱使用日本 Shimadzu-2201紫外可见分光光 度计测定,溶剂为色谱甲醇;核 磁共振波谱使用瑞士Bruker ARX一300MHz超导核磁共振仪测 定,溶剂为CDC1,内标为TMS; 质谱使用日本岛津GCMS- QP5050A质谱仪测定,EI为离子 化源:元素分析使用Flash EAlll2型元素分析仪测定;旋光 度使用德国PerkiI"1一 Elmer241MC分光旋光仪测定.尼 麦角林试样,化学名为(100【)一 甲氧基一l,6一二甲尼麦角林一 (8D)一甲醇基-3-~[t啶羧酸 酯,由辽宁省医药工业研究院提 . 供 2方法与结果 2.1EA,UV,IR,MS,SR数据 及解析通过EA测得尼麦角林 试样C%=58.32,H%=5.32, N%一3.39,Br%一16.52,可推断 其分子式为CH:BrN,O,. 通过EIMS测得尼麦角林试样 m/z483,m/z485两个相同强度 分子离子峰,说明尼麦角林试样 的分子中含有Br原子,可推测该 试样的分子量为484. 尼麦角林试样甲醇溶液的 UV谱中,有3个吸收带:入287 Flm(,9×10),205rim(,4× 10)分别为吡啶基和苯基的B和 E吸收带,说明在吡啶和苯环上有 生色团取代,使其吸收带移向长 波长处;入Max226Flm(,4X 10)为吡啶基和苯基与环外双键 所形成的共轭系统的K吸收带.而 尼麦角林试样的酸性甲醇溶液的 UV光谱与上述的UV光谱比较, B带(,1×104)吸收增强,是由 于吡啶在酸性下发生质子化作用 所致,可进一步证明该试样结构 中吡啶环的存在. 尼麦角林试样的IR谱中,酯 羰基(C=O)吸收峰为最强峰, 由于受苯环共轭的影响,该吸收 峰与一般酯羰峰相比向低波数移 动到l719cm,;另一个显着特征是 酯谱带,即Vc,1283,l075cm. 分别为反称和对称吸收峰.芳香 取代的V=cH3048cm..,VcVc:N l612,l579cm.和面内的6:c l168,1047cm,,面外的6:c8l1 cm.为1个相邻氢的间二取代的吡 啶基,面外的6749cm.为3个相 邻氢的三取代苯基.与Vc2935 cm<3o00一组吸收峰对应的6 1468cm..,6…1365说明甲基 (CH)和亚甲基(CH,)存在, 由v2765cm(2800~27o0)一组 峰,进一步证明氮甲基(NCH) 存在 旋光度(SR1测得尼麦角林试 样的比旋度为+22.1.(C=5, CHC1),说明该结构为右旋体. 2.2NMR波谱解析与信号归属 在尼麦角林试样的HNMR谱 中,共有l6组质子信号,其中: 高场区有3组甲基信号62.48 (3H,s),3.00(3H,S), 3.78(3H,S);4组亚甲基信号 63.00,3.07(1H,overlapped), 3.18,3.23(1H,overlapped), 2.09(1H,t,J=l1.2Hz), 3.18-3.23(1H,overlapped), 4.30(1H,dd,J=l0.9,7.4H Z),4.42(1H,dd,J=l0.9, 4.9Hz),1.38(1H,t, J=l3-3Hz),3.00-3.07(1H, overlapped);2组次甲基信号 62.35(1H,dd,l1.0,4-3Hz) 和62.63(1H,m).低场区有7组 芳香质子信号66.80(1H,S), 7.05(1H,brd,6.4Hz), 7.20(1H,dd,8.7,6.4Hz), 7.25(1H,brd,8.7Hz), 9.14(1H,brd,1.6Hz), 8.43(1H,dd,2.2,1.6Hz), 8.85(1H,brd,J=2.2Hz).在 ?.NMR谱中出现24个碳信号, 根据DEPT-135谱可确定有3个伯碳 信号;4个仲碳信号;9个叔碳信 号;8个季碳信号. 从甲基质子信号63.78与芳香 叔碳信号6123.2(C.2)及芳香季 碳信号l35.1(C.15)在HMBC谱 中有远程相关峰,可推断63.78为 1.NCH质子.通过HMQC谱可确 定66.80为H.2,632.7为1. NCH碳;因H.2在HMBC谱中芳香 季碳信号6l10.2,6126.3远程相 关,结合碳化学位移规律,可推 断两碳信号分别为C.3,C.16.即 尼麦角林试样有结构单元A. 从芳香质子信号67.25与C. 15,C.16~HMBC谱中有远程相关 峰,可推断其为H.14;在COSY谱 中芳香质子信号67.20与H.14相关 可推断其为H—l3,67.O5与H—l3相 关可推断为H.12;通过HMQC谱 可确定6l14.9,121.4,l08.9分别 为C.12,C.13,C.14;H.13在 HMBC谱中与芳香季碳信号6 129.6远程相关可推断该碳信号为 C.1l.即存在结构单元B. 亚甲基质子信号6(3.o0,3.07, 3.18,3.231在HMBC谱中与C一3, C.16远程相关,可推断为H.4;质 子信号62.35在COSY谱中与H. 4相关,可推断为H.5;通过 HMQC谱可确定622-3,70.0分别 为C.4,C.5;而H.4,H.12及甲基 质子信号63.00在HMBC谱中同时 与季碳信号673.5远程相关,可推 断63.00为10.OCH质子,673.5为 C.10;通过HMQC谱可确定 849.5为10.OCH碳.即存在结构单 元C. 因甲基质子信号62.48在 HMBC谱中同时与C.5及亚甲基碳 信号860.6远程相关,可推断 62.48为6-NCH质子;860.6为 C.7;通过HMQC谱可确定 643.9为6-NCH碳;6(2.09, 3.18,3.23)为H.7.质子信号 62. 63在COSY谱中与H.7相关, 可推断为H.8:6(1.38, 3.o0,3.07)在COSY谱中与H.8相 关,在HMBC谱中与C.10远程相 关,可推断为H.9;通过HMQC谱 可确定为631.5为C.8,630.1为 C.9.即存在结构单元D. 亚甲基质子信号8(4.30, 4.42)在COSY谱中与H.8相关,在 HMBC谱中与羰基碳信号 6163.9远程相关,可推断前者为 H.8,后者为C.8Y,即存在结构 单元E. 芳香质子信号68.43在HMBC谱 中与C.8Y远程相关,结合氢化学 位移规律,可推断为H.4'; 69.14,8.85在COSY谱中与 88.43(H~4'1相关,从偶合常数判断 三个质子信号互为间偶,结合氢 化学位移规律,可推断前两个信 R&IoHTCM,2l 号分别为H一2'和H一6';通过HMQC 谱可确定6148.7,139.5,154. 6分别为C一2',C一4',C一6'.芳 香季碳信号ii127.4,120.6在 HMBC谱中分别与H.2'和H一6'远程 相关,推断它们分别为C一3',C一 5'.即存在结构单元F.有关NMR 数据见1[31. 至此经上述谱学研究确定尼麦 角林试样的结构与图1相符,并 对试样的IH—NMR和13C—NMR谱信 号进行了全归属. 图1尼角麦林结构图 参考文献 [1】王慧,伍乃英,叶崇义,等.顶空 毛细管气相色谱法测定尼麦角林 中7中有机溶剂的残留量[J】.药 物分析杂志,2004,24(3):273一 表1尼麦角林(CDCh)的N豫数据 Vof. 7, NO.3 Mar2005 275 [2】洪山海.光谱解析法在有机化学中得 应用[M】.北京:科学出版社,1981, 7—30. [3】宁永成.有机化合物结构鉴定与有机 波谱学[M】.北京:科学出版社, 2000,212—217.嚏 (收稿日期2005-2—10) Spectralstudiesonthestructuralidentificationofthenewagentnicergoline LIWen',SONGAi.hua,SHAYi,WANGJin-hui (1.SchoolofPharmacy,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Liaoning,Shenyang,110016,China;2,SchoolofTraditinalChinese MateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Liaoning,Shenyang,,110016,China) [Abstract】 Object:Toidentifythestructureofthenewagentnicergoline.Methods:Thestructureofnicergolinewasestublished EA,UV,IR,MS,HNMR,"CNMRandSR.Conclusions:InthispaperalltheHNMRandCNMRsignalsofthenicergoline wereassignedunequivocallyforthefirsttimebymeansoftwo— dimensionalNMRtechniques(COSY,HMQCandHMBC). Results:ThestructureofnicergolineWasidentifiedbyintensivespectralstudies. [Keywords]nicergoline;spectralanalysis;structuralidentification;NMRsignalassigned I足正I彻TCM