改良二乙酰一肟-安替比林法测定游泳水中尿素

改良二乙酰一肟-安替比林法测定游泳水中尿素 改良二乙酰一肟-安替比林法测定游泳水中 尿素 中国卫生检验杂志2008年7月第18卷第7期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Ju12008;Vol18N.71319 改良二乙酰一肟一安替比林法测定游泳水中尿素 施伟红 (浙江省宁海县疾病预防控制中心,浙江宁海315600) 【化学测定】 [摘要]目的:建立实用,快捷的游泳水中尿素的测定方法.方法:在国标法的基础上 提高酸用量,增大显色剂浓度.结 果:本方法在0.20,10mg/L范围呈线性关系,精密度,加标回收率均符合要求,加热 时间缩短一半,样品反应后2h内基 本不褪色.结论:此方法测定结果与国标法比较无显着差异,在实际应用中更准确, 操作更方便. [关键词]改良;二乙酰一肟,安替比林法;尿素 [中图分类号]0657.32[文献标识码]A[文章编号]1004—8685(2008)07—1319—02 Simultaneousdeterminationofureainswimmingwaterbydiacetylmonoxime—— antipyrine ShiWei—hong (NinghaiCenterforDiseaseControlandPrevention,Ninghai315600,China) [Abstract]0bjective:Toestablishautilityandshortcutmethodfordeterminningureainswim mingwater.Methods:Basedon theGBimprovetheamountofacidandexpandthechromaofcolorreagent.Results:Withthemethodalinearrelationisexhibited within0.20, 10mg/L:tlleprecisionandtherecoveryrateareallaccordedwiththedemand;Thetimeofcalef actionisreducedto onlyahalf;andthesampleswontfadedwithin2hafterreaction.Conclusion:Betweentheresul tswiththissimultaneousdetermi— nationandthoseoftheGBmethodnoobviousdifierenceappear.andwiththismethodtheresul tismoreaccurateinpracticeand theprocessismoreconvenient. 『KeywordslSimultaneous;Diacetylmonoxime—antipyrine;Urea 我国《公共场所卫生检验方法》规定GB/T18204.29 — 2000游泳水中尿素测定方法(简称标准方法)采用二乙酰一 肟一安替比林分光光度法J.虽然线性,重现性,灵敏度都 好,回收率也高,但存在加热时间长,显色不稳定,检测范围 (0.10,1.5mg/L)小等缺憾.为此,经过反复试验,提高酸 用量,增大显色剂浓度,使加热时间缩短至15min,加入稳定 剂后使溶液颜色在相当长时间内保持不褪,同时还扩大了检 测范围.结果满意,现将方法报告如下. 1材料和方法 1.1仪器 TU一1901双光束紫外可见分光光度计;电热水浴锅; 25m】无色具塞比色管. 1.2试剂 1.2.1安替比林一酸溶液称取2.0g安替比林,0.25g三 氯化铁,溶于100ml纯水中,缓缓加入100ml磷酸,再一边搅 拌一边缓缓加入200ml硫酸,放冷倒入棕色瓶保存. 1.2.2二乙酰一肟一异丙醇称取1.0g二乙酰一肟溶于 50ml(1+9)乙酸中,再加入5Om1异丙醇,混匀倒入棕色瓶保 存. 1.2.3尿素标准使用溶液10.0ml. [作者简介]施伟红(1968一),女,学士,高级工程师,主要从事 理化检验工作. 1.3测定步骤 1.3.1吸取水样5.00ml置于25m1具塞比色管内,另取7 只同样比色管分别加入尿素使用液0,0.10,0.25,0.50,1.O0, 2.50,5.O0ml,分别加入纯水补足至5.0ml;加标水样:吸取适 量尿素标准液置于100ml容量瓶内,加水样至刻度,混匀后吸 取5.O0rnl加标水样测定. 1.3.2各管加入4.0ml安替比林一酸溶液,2.0ml二乙酰一 肟一异丙醇溶液,充分混匀后放沸水浴内,待水面沸腾时开始 计时.加热15min后立即取出比色管,流水冷却后加纯水至 刻度. 1.3.3以纯水为参比,于460nm波长下,用1cm比色皿,测 定各管吸光度.曲线自动回归,浓度直读并打印. 2结果 2.1最大波长 用25g管,设置在450,470nm范围内进行扫描,在 458460nm处出现高峰,显示最大波长为459nm.本法测 定时,波长选用460nm. 2.2标准系列 0,50.0Ixg尿素的吸光度在0.034—1.046之间.在此范 围内各浓度与吸光度的关系符合Beer定律,经多次实验,其相 关系数达0.9999,y=0.10134X+0.03856. 2.3稳定性试验 经反复实验,酸的用量增加时显色时间提前,10m】溶液 1320中国卫生检验杂志2008年7月第l8卷第7期 ChineseJoum~0fHeMthLaboratoryTechnolo~,Jd2008;Vol18?7 中加2.0ml硫酸已趋于平台,但加入纯水至25mJ时,如果没 有足够的酸度保证,显色不稳定,所以预先加入1.0ml磷酸, 能起到稳定作用.加入1.0ml丙三醇后在2h内各管的吸光 度均无明显变化,而且在加热前加入丙三醇会使线性更好. 同时实验证明加入三氯化铁对稳定颜色和降低空白吸光度有 明显效果,当二乙酰一肟的浓度提高时空白吸光度也提高,加 入三氯化铁后,空白吸光度能得到有效控制. 2.4精密度 尿素质量为5.0,10,25,30的溶液各测6次,结果见1. 表1样品测定的精密度(ttg) 2.5回收率 3个不同浓度的样本内加入低,中,高的标准物质,各测6 次,结果见表2. 表2加标回收率(me,/L) 2.6显色剂的浓度 经实验证明安替比林和二乙酰一肟的浓度与吸光度的大 小有关,1.0ml2.0%安替比林达到显色平台,二乙酰一肟浓 度提高时,吸光度一再增高,为了控制吸光度在最佳范围,二 乙酰一肟的浓度选用1.0%取1.0ml较为合适. 2.7加热时间试验 用3种不同浓度的样品以不同的加热时间进行吸光度测 定,结果如表3,可见加热至15min后吸光度基本趋于稳定. 表3加热时间与吸光度值的变化 2.8与标准方法对比 用标准方法和改进后的方法同时检测3批样品,每批8 次,结果全部无显着性差异(t=1.28,0.901,0.243;全部P> 0.05),但改进方法的吸光度较标准方法有明显的增大,含尿 素1.50mg/L的游泳水样标准法测得吸光度0.076,改进法测 得的吸光度提高到0.173. 2.9干扰物质对检测结果的影响 配制含下述物质的合成水样:(mg/L)氨氮2,碳酸钙 450,亚硝酸盐氮0.2,硝酸盐氮20,氯化物400,游离有效氯5, 经试验以上浓度的干扰物质不影响检测结果. 3讨论 标准方法显色缓慢是因为酸的浓度太低,显色剂含量过 低J,经反复实验证明:酸,二乙酰一肟,安替比林的浓度与显 色速度,吸光度成正相关.10IIll反应液中含2ml硫酸,1ml 磷酸能使反应加速;1.0ml安替比林(2.0%)使显色趋于平 台,增加二乙酰一肟浓度,吸光度值也可提高,同时空白吸光 度也提高,加入1.0ml二乙酰一肟(1.0%)能使吸光度提高 一 倍多,已可满足实验要求. 按本方法操作加热15min就能达到较好的效果.虽然继 续加热还能提高吸光度,但会使线性变差.操作时样品和标 准管是在相同条件下加热,所以对结果影响不大.应该注意 水浴要高于比色管内反应液液面,防止受热不均匀. 标准方法的检测范围是0.10,1.5mg/L,改进法的检测 范围是0.20,10.0mg/L,目前执行的《游泳场所卫生标准》 (GB9667—1996)尿素43.5mg/L,在同时加入标准物质后,改 进法的标准系列线性范围包容了上述浓度,在测定过程中增 加平行样品和加标试验,可同时取得相对偏差,回收率作为评 价,使结果更可信. 硫酸能加快反应速度,但不稳定,退色也快,磷酸反应慢, 但稳定性好,混合酸溶液中加入三氯化铁,能使安替比林显色 稳定,与磷酸结合成无色络合物,降低空白吸光度.据报道的 文献提示多种有机溶剂能起到稳定显色剂的作用.因异丙醇 灵敏度高,水溶性好,且为常用试剂,无毒害,易购得],经试 验加入1.0ml异丙醇具有相当好的效果,在加热前加入比加 热后加入有更好的线性.起稳定作用的因素是酸浓度,加上 高铁离子和异丙醇,三者起到协同作用.标准方法规定使用 棕色比色管是因为溶液遇光退色,当加入稳定剂后,溶液颜 色相当稳定,室内2h观察无明显变化,可以用无色比色管来 操作. 改进后的方法加热时间短,线性范围宽,精密度高,回收 率好.测定结果与标准方法比较,无显着差异,可以更方便更 准确地应用于实际工作中,值得广大实验人员借鉴和应用. [参考文献] [1]GB/T18204.29—2000.游泳池水中尿素测定方法[S]. [2]孙兰,胡毅志,胡国嫒.游泳池水中尿素的测定,二乙酰一肟硫氨 脲分光光度法[J].环境与健康杂志,1995,12(4):176—178. [3]黄卫东.二乙酰一肟一异丙醇一安替比林法测定游泳池水中尿素 [J].中华预防医学杂志,2001,35(3):190—192. [4]相开幕,孙剑,才玉亮.硫氨脲二乙酰一肟联合显色剂测定游泳池 水中尿素[J].中国卫生检验杂志,2005,15(8):945. [5]徐向阳.测定游泳池水中尿素方法的改进[J].中国卫生检验杂 志,2006,16(2):235—236. (收稿日期:2008—03一l1)