奥氮平及其片剂的HPLC测定

中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2004,35(1)4 6 Stability of N-acetyl-L-cysteine YAO Fei, WU Yu-Liang, ZHANG Guan-Yong * (College of Chemistry and Pharmaceutics, East University of Science and Technology, Shanghai 200237) ABSTRACT: A HPLC method was used to compare the quality of acetylcysteine manufactured freshly with the product after one-year storage. A minute amount of N,N-diacetyl-L-cystine and N,S-diacetyl-L-cysteine were found in the latter product. These impurities could be removed by recrystallization. Key Words: N-acetyl-L-cysteine; N,N-diacetyl-L-cystine, N,S-diacetyl-L-cysteine; HPLC 3 讨论 在1的生产和贮存过程中,可能存在的杂质是1的 乙酰产物2和3,还可能含有L-半胱氨酸及其氧化产物 L-胱氨酸 测试结果表明, 刚生产的产品纯度较高, 但存放一年后,产品中有2和3生成,这是1在贮存过程 中发生乙酰基移位的结果 为了避免产品在贮存过程 中的变质,建议选用合适的包装材料和存放条件 例 如采用铝膜复合材料的真空包装 ,存放时注意避光 等 参考文献: 周 静,张关永. N-乙酰-L-半胱氨酸的合成及其在医药上 的应用[J]. 氨基酸和生产资源,1999,21(2):45-47. (Droge W. Cysteine and glutathione in catabolic conditions and immunological dysfunction [J]. Curr Opin Clin Nutr Metab. Care,1999,2(3):227-233). CA 1999, 131: 156247 Wätzig H, Dette C, Aigner A , et al. Analysis of aetylcysteine by capillary electrophoresis[J]. Pharmazie, 1994, 49: 249-252. Smith HA, Gorin G. 2-Methyl-2-thiazoline-4-carboxylic acid: formation from N-acetylcysteine and Hydrolysis[J]. J Org Chem, 1961, 26:820-823. [1] [2] [3] [4] 夏学军,陶忠华 (中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所,北京100050) 摘要:建立奥氮平及其片剂测定的HPLC法 采用ODS C18色谱柱,0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇-乙腈(1:1:1,pH8.3)为 流动相,检测波长273nm线性范围为0.01~1mg/ml,检测限1ng方法平均回收率为99.4%,RSD为0.7% 关键词:奥氮平;片剂;有关物质;高效液相色谱;测定 中图分类号:TQ460.7+2;O657+2 文献标识码: A 文章编号: 1001-8255(2004)01-0046-03 收稿日期:2002-07-23 作者简介:夏学军 1971,女,硕士,助理研究员,从事药物制剂和 分析 Tel: 010-83160332 E-mail: xuejunxia@163.com 奥氮平及其片剂的HPLC测定 奥氮平(olanzapine,1), 化学名2-甲基 -4-(4-甲基 -1- 哌嗪基)-10H-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并二氮杂 ,是 Lilly 公司研制开发的非经典抗精神病药 该药通过调节脑内 多种神经递质,包括多巴胺和 5-HT等系统,改变多种神 经通路的功能,全面改善精神分裂症症状,包括阳性 阴 性 情感和认知障碍[1] 目前国外有 1的临床药物动力 学测定的HPLC法[2],但尚无其含量及有关物质测定的报 道 我所于 1997年对 1进行了研发 本文对文献的 色谱条件进行了优化,建立了1原药及片剂测定的HPLC 法 该法简便快速 专属性好 灵敏度高 1 仪器与试药 TSP高效液相色谱仪(TSP公司); ChromQuest色谱工作站(美 国热电分析仪器有限公司) 1对照品 原药及合成中间体(协和医科大学药物研究所开 发室); 1片(自制) 2 方法和结果 2.1 色谱条件 色谱柱Kromasil ODS C18(4.6mm 250mm,5mm),流 动相 0.01mol/L磷酸二氢钾溶液 -甲醇 -乙腈(1:1:1,用 1mol/L NaOH溶液或磷酸调至pH8.3),流速1.0ml/min,检 测波长 273mm,进样量 10ml 万方数据 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2004,35(1) 4 7 2.2 溶液的配制 1 对照品溶液 : 精密称取 1 对照品约 2 5 m g ,置 10ml量瓶中,加乙醇溶解并定容,精密量取适量,用乙 醇定量稀释制成浓度为0.1mg/ml的溶液,作为对照品 溶液 1原药溶液: 精密称取 1原药适量,同对照品溶液配 制,作为原药溶液 1片剂供试品溶液: 取 1片 20片,精密称定,研细,精 密称取细粉适量(相当于1约25mg),置10ml量瓶中,加乙 醇 4ml,超声 5min使溶解,用乙醇定容,摇匀,过滤 精密 量取续滤液适量,用乙醇定量稀释制成浓度为 0.1mg/ml 的溶液,作为片剂供试品溶液 2.4 线性关系 精密称取1对照品约125mg,置50ml量瓶中,加乙醇 溶解并定容,摇匀,稀释制成系列标准溶液 分别进样测 定,峰面积 以浓度 C对峰面积 A 线性回归 得 线性方程A=7.8663 106C+7.5580 103, r=0.9999 表 明1浓度在0.01~1mg/ml范围内,峰面积与浓度呈良好的 线性关系 在选定的色谱条件下,按信噪比为3:1测得1的检测 限为 1 n g 2.5 精密度 分别于同一日内及不同日间,取 2 .4 项下低 (0.01mg/ml) 中(0.1mg/ml) 高(1mg/ml)3种 1标准溶 液,进样测定,计算得日内RSD(n=5)分别为 0.1% 0.3% 0.2%,日间 RSD(n=5)分别为 0.5% 0.8% 0.5% A:原药溶液 B:片剂辅料 C:中间体 D:高温破坏溶液 E:酸破坏溶液 F:碱破坏溶液 G:氧化破坏溶液 H:光破坏溶液 1 1; 2副产物; 3中间体;其它均为降解产物 图1 专属性考察 2.6 回收率试验 分别精密称取 1对照品约 20 25 30mg,置 10ml 量瓶中,加入处方量辅料,按 2.2 项下片剂溶液方法 制备回收率试验溶液 分别取该溶液及1对照品溶液进 样测定,记录峰面积,按外标法计算得方法平均回收率为 99.4%, RSD为 0.7% 2.7 含量测定 精密量取 1对照品溶液 1原药溶液和 1片剂供试 品溶液进样测定,记录峰面积,按外标法计算 1原药和片 剂的含量,结果见表 1 2.8 有关物质测定 取1原药或片剂细粉适量(相当于1约25mg),置25ml 量瓶中,加乙醇适量,超声5min使溶解,加乙醇定容,制成 浓度为 1mg/ml的供试品溶液(片剂经滤膜过滤) 精密 破坏试验溶液: 取1原药,用乙醇制成浓度为2mg/ml 的溶液,共 3份 其中两份分别加入 0.1mol/L HCl及 0.1mol/L NaOH溶液适量,室温放置 24h,中和后,作为酸 及碱破坏溶液;另一份加30%双氧水适量,室温放置24h, 作为氧化破坏溶液 另取 1原药适量,分别于 150 放 置 15h及 4500lx强光下照射 24h, 再用乙醇制成浓度为 2mg/ml的溶液作为高温及光破坏溶液 2.3 专属性考察 取 1原药溶液 合成中间体溶液及破坏试验溶液, 进样测定(见图1) 结果表明:上述色谱条件下,1与副产 品 中间体及破坏产生的降解产物均能有效分离,方法 的专属性良好 万方数据 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2004,35(1)4 8 有关物质/% 0.06 0.06 0.06 0.15 0.14 0.13 表1 样品测定结果 样品 1原药 1片剂 批号 990701 990702 990703 990701 990702 990703 含量(标示量%) 99.8 99.9 99.6 98.3 99.3 99.1 量取该溶液适量,用乙醇定量稀释制成浓度为0.01mg/ml 的对照液 分别进样测定,记录色谱图至主成分保留时 间的 2倍,色谱图中如有杂质峰,计算除溶剂峰外各杂 质峰面积的总和,用主成分自身对照法计算有关物质含 量,结果见表 1 3 讨论 3.1 本试验流动相在文献[2]的基础上进行了改进,考察了 pH值 磷酸二氢钾浓度及流动相系统对 1柱效及有关 物质分离行为的影响 结果表明,pH值为影响 1柱效 及分离效果的主要因素 流动相 pH为 8.3时,峰形尖 锐,且主峰与各有关物质峰分离良好,明显优于 pH8.0 pH 7.5 磷酸二氢钾浓度对柱效有一定影响,不加时,主 峰变宽 流动相系统对主峰柱效也有一定影响,将乙 腈-水系统改为甲醇-水系统同时,1色谱峰变宽,且拖尾 程度增加 3.2 在本试验条件下对1有关物质和片剂辅料进行了测 定,结果有关物质和片剂辅料都不影响主药的测定,表明 本法不但可用于1原料和片剂的含量测定,还可用于1有 关物质检查及稳定性研究 3.3 1浓度在0.01~1mg/ml范围内,线性关系良好,因此,对 有关物质的检测,浓度为1mg/ml时可采用主成分自身对 照法或直接采用归一化法计算,而超过1mg/ml时,归一化 法误差较大,必须采用自身对照法计算有关物质含量 参考文献: [1] Fulton B, Goa KL. Olanzapine. A review of its pharmacologi- cal properties and therapeutic efficacy in the management of Schizophrenia and related psychoses[J].Drugs, 1997,53(2): 281-298. [2] Chiu JA, Franklin RB. Analysis and pharmacokinetics of olanzapine (LY170053) and two metabolites in rat plasma using reversed-phase HPLC with electrochemical detection [J]. J Pharm Biomed Anal,1996,14(5):609-615. Determination of olanzapine and its tablets by HPLC XIA Xue-Jun, TAO Zhong-Hua (Institute of Materia Medica , Chinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College,Beijing 100050) ABSTRACT: A RP-HPLC method for determination of olanzapine and its tablets was presented. The ODS C18 column was used with the mobile phase of 0.01mol/L KH2PO4 solution-methanol-acetonitrile(1:1:1,pH8.3), at the detection wave- length of 273 nm. The linear range was 0.01~1mg/ml(r=0.9999), and the detection limit was 1ng. The average recovery was 99.4% with RSD of 0.7%. Key Words: olanzapine; tablets; related substances; HPLC; determination f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f f S35-08 碳环的氧化物铋 离子催化选择性开环 Swamy NR等 [Synth Commun2002,32:2307] 环氧化物和芳胺的乙腈溶液中加入三氯化铋 在氮气氛下室 温搅拌1.5h柱色谱分离得反式b-胺基醇 13例收率94%-97% [陈越磊摘] S35-09 N-苄基酰胺的新合成法 Karabulut HRF [Synth Commun 2002,32:2345] 氯苄与腈在FeCl3 6H2O催化下 回流反应8~12h生成 相应的N-苄基酰胺类 12例收率72%-94% [王先恒摘] 万方数据 奥氮平及其片剂的HPLC测定 作者： 夏学军， 陶忠华 作者单位： 中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所,北京,100050 刊名： 中国医药工业杂志 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS 年，卷(期)： 2004,35(1) 参考文献(2条) 1.Chiu JA;Franklin RB Analysis and pharmacokinetics of olanzapine (LY170053) and two metabolites in rat plasma using reversed-phase HPLC with electrochemical detection[外文期刊] 1996(05) 2.Fulton B;Goa KL;Olanzapine A review of its pharmacological properties and therapeutic efficacy in the management of Schizophrenia and related psychoses[外文期刊] 1997(02) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgyygy200401023.aspx