微生物限度检查应注意的若干问题

微生物限度检查应注意的若干问题 殷建国 (内蒙古巴盟药品检验所, 015000) 中图分类号: R927�33 � � 文献标识码: B � � 文章编号: 1002- 7777 ( 2004) 07- 0456- 01 � � 除微生物制剂外, 药品微生物限度检查与药品 中有效成分的含量测定显著不同, 其检查对象具有 以下特点: ( 1) 活体易变性: 菌细胞在药品中处于不稳定 状态, 可随存放时间延长死亡, 也可在适宜条件下 繁殖。 ( 2) 分布不匀: 除产品在生产前期污染外, 通 常是局部的。一批产品中不同批瓶 (盒) 中污染状 态会出现差异, 其污染量特别是致病菌通常是少量 的。正确的检验有赖于合理的抽样方法。 ( 3) 多数处于受损状态: 药品中污染的微生 物, 受到原料处理、加工等过程的影响, 或者药品 本身对微生物的抑杀作用, 使其受到一定程度的损 伤, 这些受伤的微生物用一般的方法检查, 往往会 出现假阴性或计数偏低的结果。 ( 4) 生态环境多样复杂: 污染菌的来源多样, 种类多样, 加之药品种类繁多、剂型成分复杂, 同 一种菌在不同的药剂中所测得的结果各不相同。 微生物限度检查必须遵循以下原则: ( 1) 样品正式检验前必须保持原污染状态。防 止第二次污染和防止微生物的繁殖、死亡。 ( 2) 应有适当的供试液制备方法。供试液的正 确制备是保证检查结果准确可靠的前提。 ( 3) 检验方法准确可靠。 ( 4) 检查结果判断无误。 基于以上原因我们在日常工作中要注意以下几 个方面: � 从样品接触稀释剂开始至注皿应在 1小时内 完成, 对多批样品应分段接种注皿。 � 稀释方法: 吸液在离液面 2�5cm处, 放液离 第二管液面不高于 1cm, 管内混合吹打不少于 10 次, 瓶内振荡混合不少于 15秒。 � 注皿量: 培养基 15ml厚度 4�0mm, 培养基 薄, 水分易散失, 不利于细菌生长; 培养基厚, 需 氧菌不利于生长。 �当菌落细小不宜辨别时, 应适当延长培养时 间。 �培养基的质量必须保证, 否则影响检测结果 的准确性。 总之, 作好微生物限度检验, 检验人员的职业 品德和业务素质至关重要。要建立科学的质量保证 体系, 是检验结果正确可靠的基本保证。 (上接第 450页) 5�3 � 毒株及毒种: 毒株选择增加了基因工程方法。 鉴于不同的细胞基质, 在毒种外源因子检测方面需 分别考虑。增加了检定方法的验证。 5�4 � 质量控制: 血凝素含量 (HA) 检测增加考虑 若使用佐剂, 需建立佐剂是否影响抗原含量测定的 数据, 目前应用的参考试剂是否可用于哺乳动物细 胞生产的疫苗中 HA含量测定, 尚待积累资料以证 实, WHO将在今后予以发布。另外, 本次修订中, 考虑到检测方法的可信限, 将HA含量标准定为每 人用剂量每株至少 15微克。对于某些以特定蛋白 为稳定剂的疫苗, 其总蛋白含量测定应给予体现。 增加了残余 DNA含量测定 (视疫苗种类而定) , 并 需建立适宜的经验证的测定方法。增加了稳定性试 验, 应至少连续三批成品的稳定性需符合国家质控 当局的要求; 尤其是疫苗抗原和佐剂之间的结合在 整个有效期内必须稳定。 总之, 通过本次会议, 对国际上目前流感疫苗 研究的进展有了一定的了解, 同时还将中国的流感 疫苗现状介绍出去, 使国际上包括WHO 能够了解 中国, 从而增加国际交流。我国目前流感疫苗方面 仅局限于生产, 在疫苗的基础研究及临床流行病学 方面尚需加强, 包括疫苗有关方面的研究以及一些 方法学的研究。无论是在新型疫苗的开发 (包括不 同配方、不同免疫途径等) 还是疫苗质量控制方 面, 流感疫苗在今后都有着广阔的前景。我国 SFDA也非常重视这些方面的问题, 正在着手制定 相关的技术指导原则等法规条例。 �456� 中国药事 2004年第 18卷第 7期