溶血与凝聚检查法

溶血与凝聚检查法 本法系将一定量供试品与 2%的家兔红细胞混悬液混合，温育一定时间后， 观察其对红细胞状态是否产生影响的一种方法。 2%红细胞混悬液的制备 取健康家兔血数毫升，放入含玻璃珠的锥形瓶中振 摇 10 分钟，或用玻璃棒搅动血液，除去纤维蛋白原，使成脱纤血液。加入 0.9% 氯化钠溶液约 10 倍量，摇匀，每分钟 1000～1500 转离心 15 分钟，除去上清液， 沉淀的红细胞再用 0.9%氯化钠溶液按上述方法洗涤 2～3次，至上清液不显红色 为止。将所得红细胞用 0.9%氯化钠溶液配成 2%的混悬液，供试验用。 供试品溶液的配制 除另有外，按各品种项下规定的浓度配制成供试 品溶液。 检查法 取洁净玻璃试管 5 只，编号，1、2 号管为供试品管，3 号管为阴 性对照管，4 号管为阳性对照管，5 号管为供试品对照管。按下表所示依次加入 2%红细胞悬液、0.9%氯化钠溶液、蒸馏水，混匀后，立即置 37℃±0.5℃的恒温 箱中进行温育。3小时后观察溶血和凝聚反应。 试管编号 1、2 3 4 5 2%红细胞悬液/ml 2.5 2.5 2.5 0.9%氯化钠溶液/ml 2.2 2.5 4.7 蒸馏水/ml 2.5 供试品溶液/ml 0.3 0.3 如试管中的溶液呈澄明红色，管底无细胞残留或有少量红细胞残留，表明有 溶血发生；如红细胞全部下沉，上清液无色澄明，或上清液虽有色澄明，但 1、 2号管和 5号管肉眼观察无明显著差异，则表明无溶血发生。 若溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，轻轻倒转 3－5 次仍不分散，表明可 能有红细胞凝聚发生，应进一步置显微镜下观察，如可见红细胞聚集为凝聚。 结果判断 当阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生，若 供试品管中的溶液在 3小时内不发生溶血和凝聚，判定供试品符合规定；若供试 品管的溶液在 3小时内发生溶血和（或）凝聚，判供试品不符合规定。