对虾白斑综合症病毒_WSSV_完整粒子的结构蛋白质谱分析_谢希贤

第四届世界华人虾类养殖研讨会 对虾白斑综合症病毒 (WSSV) 完整粒子的结构蛋白质谱分析 谢希贤 杨丰* (国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室 , 厦门市大学路 17 8 称, 3 6 10 0 5) 对虾白斑综合症病毒 (WSSV) 是对虾养殖中危害最大的一种病原 。 但大量纯 化完整病毒粒子的一直没有突破 , 影响了对病毒感染机制的研究 。 本文报道 了一种从感染病毒的鳌虾组织中简单快速提取病毒的方法 。 整个提纯步骤不需要 经过烦琐的密度梯度 , 完整病毒 , 病毒粒子 。 快速方便 。 超速离心 , 只需要两步普通的差速离心就可以收获大量的 通过竞争 PC R 定量测定 , lg 的病虾组织能提纯约 10 ” 的 该方法所得到的的病毒粒子经电镜观察证实纯度很高 , 病毒粒子包膜 完整 , 略微呈椭圆形 , 一端有细长的鞭毛状结构 , 虾细胞组织污染物基本看不见 。 纯化的完整病毒粒子 以及分离的膜蛋白、 核衣壳蛋 白经蛋白凝胶电泳分析可见 , 完整病毒粒子包含 28 条主要的结构蛋白条带 , 其中有 18 条在膜部分 , 10 条在 核衣壳部分 。将 电泳分离的主要的病毒结构蛋白条带从凝胶上割下来进行蛋 白质 质谱分析 。 目前 己经鉴定出全部的 18 条膜蛋白 , 其中有 12 个是新发现的病毒膜 蛋白 (WSV 2 0 9 , WSV 2 16 , WSV 0 3 5 , WSV 4 4 2 , WSV 3 2 5 , WSV 0 1 1 , WSV 2 38 , wSV 2 5 6 , WSV 2 4 2 , WSV 3 4 0 , WSV 19 8 , WSV 3 39 ) 。 鉴定出的核衣壳部分蛋白有 4 个 (W凡V 3 6 0 , WSV 2 2 0 , WSV 4 15 , WSV 3 0 8 ) 。 关键词 : 对虾 白斑综合症病毒 : 结构蛋白 ; 蛋白质质谱分析