HR_HPVDNAPCR联合TCT检测对宫颈癌前病变的诊断价值_陈炎添

文章编号：１６７３８６４０（２０１３）０６０５１６０３　　　中图分类号：Ｒ４４６．５　　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３８６４０．２０１３．０６．０１５ ＨＲＨＰＶＤＮＡＰＣＲ联合 ＴＣＴ检测对 宫颈癌前病变的诊断价值 陈炎添，　陈青龙，　熊　燕，　苏雪棠，　黄伟刚，　石　胜，　郭翼华，　陈荣策 （江门市人民医院检验科，广东 江门 ５２９０２０） 　　摘要：目的　探讨高危型人乳头瘤病毒（ＨＲＨＰＶ）ＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）联合液基薄层细胞学检查 （ＴＣＴ）对宫颈癌前病变筛查的应用与诊断价值。方法　对５４０例ＴＣＴ结果为非典型鳞状上皮细胞（ＡＳＣＵＳ）及 以上的患者进行ＨＲＨＰＶＤＮＡＰＣＲ检测，并对检测结果进行分析。结果　ＴＣＴ阳性合并 ＨＰＶ阳性患者共２５９ 例，其中ＡＳＣＵＳ、低度鳞状上皮内病变（ＬＳＩＬ）、高度鳞状上皮内病变（ＨＳＩＬ）、鳞状细胞癌（ＳＣＣ）的例数（阳性率） 分别为１５５例（５９．８％）、８１例（３１．３％）、１５例（５．８％）、８例（３．１％）；２５９例患者中 ＡＳＣＵＳ、ＬＳＩＬ、ＨＳＩＬ、ＳＣＣ合 并ＨＲＨＰＶ的阳性例数（阳性率）分别为２８例（１８．１％）、２０例（２４．７％）、１０例（６６．７％）、８例（１００．０％）。ＨＲ ＨＰＶ和ＴＣＴ单独检测的敏感性与两者联合检测的敏感性比较，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＨＲＨＰＶ、ＴＣＴ 及两者联合检测的阳性预测值分别为２５．５％、１１．１％、２８．２％，阴性预测值分别为６８．８％、５９．２％、４０．８％。结论 　ＴＣＴ与ＨＲＨＰＶＤＮＡＰＣＲ检测是筛查宫颈病变的有效方法，能最大程度地发现宫颈异常细胞并及时发现宫 颈癌的诱因。 关键词：聚合酶链反应；液基薄层细胞学检查；高危型人乳头瘤病毒；宫颈癌；诊断 　　 ＴｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆＴＣＴ ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＨＲＨＰＶ ＤＮＡ ＰＣＲ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｓ　ＣＨＥＮＹａｎｔｉａｎ，ＣＨＥＮＱｉｎｇｌｏｎｇ，ＸＩＯＮＧＹａｎ，ＳＵＸｕｅｔａｎｇ，ＨＵＡＮＧＷｅｉｇａｎｇ，ＳＨＩＳｈｅｎｇ，ＧＵＯ Ｙｉｈｕａ，ＣＨＥＮＲｏｎｇｃｅ．　（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＪｉａｎｇｍｅｎＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＪｉａｎｇｍｅｎ ５２９０２０，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｈｉｇｈｒｉｓｋｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＲ ＨＰＶ）ＤＮＡｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）ｃｏｍｂｉｎｅｄｔｈｉｎｐｒｅｐｃｙｔｏｌｏｇｙｔｅｓｔ（ＴＣＴ）ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａｔｏｔａｌｏｆ５４０ｐａｔｉｅｎｔｓｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇＴＣＴｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｓｈｏｗｉｎｇｐｏｓｉｔｉｖｅａｔｙｐｉｃａｌ ｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｓｏｆｕｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（ＡＳＣＵＳ）ａｎｄａｂｏｖｅｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄａｎｄｐｅｒｆｏｒｍｅｄＨＲＨＰＶＤＮＡＰＣＲ，ａｎｄ ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＴｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＴＣＴｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｍｂｉｎｅｄＨＰＶｐｏｓｉｔｉｖｅｗａｓ２５９ｃａｓｅｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ＡＳＣＵＳ１５５ｃａｓｅｓ（５９．８％），ｌｏｗｇｒａｄｅｓｑｕａｍｏｕｓｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｅｓｉｏｎ（ＬＳＩＬ）８１ｃａｓｅｓ（３１．３％），ｈｉｇｈｇｒａｄｅｓｑｕａｍｏｕｓ ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｅｓｉｏｎ（ＨＳＩＬ）１５ｃａｓｅｓ（５．８％）ａｎｄｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＳＣＣ）８ｃａｓｅｓ（３．１％）．Ｉｎｔｈｅ２５９ ｃａｓｅｓ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆＡＳＣＵＳ，ＬＳＩＬ，ＨＳＩＬａｎｄＳＣＣｗｅｒｅ１８．１％ （２８ｃａｓｅｓ），２４．７％（２０ｃａｓｅｓ），６６．７％（１０ ｃａｓｅｓ）ａｎｄ１００．０％（８ｃａｓｅｓ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ２ｍｅｔｈｏｄｓｗａｓ ｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＨＲＨＰＶｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄＴＣＴｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）． ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｖａｌｕｅｓｏｆＨＲＨＰＶｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ＴＣＴｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ２ ｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅ２５．５％，１１．１％ ａｎｄ２８．２％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｖａｌｕｅｓｗｅｒｅ６８．８％，５９．２％ ａｎｄ ４０．８％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　ＴＣＴｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＨＲＨＰＶＤＮＡＰＣＲｉｎｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｓｉｓ ａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄ．Ｉｔｉｓａｎａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｅａｒｌｙｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒａｎｄｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｅｓｉｏｎｓ． 　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ；Ｔｈｉｎｐｒｅｐｃｙｔｏｌｏｇｙｔｅｓｔ；Ｈｉｇｈｒｉｓｋｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ；Ｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒ； Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ 作者简介：陈炎添，男，１９７８年生，学士，主管技师，主要从事医学检验工作。 　　宫颈癌作为妇科生殖道三大恶性肿瘤之一，严 重影响女性身心健康及生命安全。我国宫颈癌的 发病率及病死率比较高，年发病率超过全世界发病 率的３０％，每年大约死于宫颈癌的患者约有５万 人［１］。有文献报道，早期宫颈癌患者的５年治愈率 可高达９０％，所以早发现、早诊断、早治疗对于宫 ·６１５· 检验医学２０１３年６月第２８卷第６期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｕｎｅ２０１３，Ｖｏｌ２８．Ｎｏ６． 网络出版时间：2013-06-14 10:51 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/31.1915.R.20130614.1051.015.html 颈上皮内瘤变的患者有重大的意义 ［２］。人乳头瘤 病毒（ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）的持续感染是癌 前病变及宫颈癌发病的重要致病因子［３］，有学者将 高危型（ｈｉｇｕｒｉｓｋ，ＨＲ）ＨＰＶＤＮＡ检测作为宫颈癌 筛查方法之一［４］。本研究拟探讨宫颈液基薄层细 胞学检查（ｔｈｉｎｐｒｅｐｃｙｔｏｌｏｇｙｔｅｓｔ，ＴＣＴ）联合 ＨＲ ＨＰＶＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测在提高宫颈癌 前病变的早期诊断中的价值。 材料和方法 一、研究对象 收集２００９年１０月至２０１１年９月来江门市 人民医院妇产科门诊进行宫颈癌前病变筛查的女 性９４８例，年龄２０～６５岁，平均年龄４１．８岁，所 有病例均无子宫颈锥切、急性生殖道炎症及子宫 切除等病史。 二、仪器、试剂及试验方法 １．ＨＰＶＤＮＡＰＣＲ　采用广州中山大学达安 基因股份公司生产的核酸扩增仪 ＤＡ７６００型检 测系统进行ＰＣＲ扩增、杂交、洗膜及显色，使用原 装配套试剂 ＨＲＨＰＶ（１８个型）核酸定量检测试 剂盒（ＰＣＲ荧光法），可同时检测 １８种 ＨＲＨＰＶ 亚型，包括 ＨＰＶ１６、１８、３１、３３、３５、３９、４５、５１、５２、 ５３、５６、５８、５９、６６、６８、７３、８３、ＭＭ４。用宫颈刷置于 宫颈口转动４圈，以取得足量的分泌物及脱落细 胞，然后将宫颈刷放入备有１ｍＬ洗脱液的专用洗 脱管中送检或保存于 －２０℃冰箱待测。检测时 将宫颈刷在洗脱管中充分漂洗，把洗脱液全部转 移到 １．５ｍＬ微量离心管中，１１６００×ｇ离心 １０ｍｉｍ，弃去上清液，保留管底的细胞块。加入 ５０μＬ裂解液悬浮沉淀，１００℃水浴加热１０ｍｉｎ， １１６００×ｇ离心 １０ｍｉｎ，保留上清液待用。ＨＰＶ 基因扩增：取１μＬＤＮＡ抽提液，加入 ＨＰＶＰＣＲ 扩增体系，按照试剂盒的扩增程序进行扩增反应。 导流杂交法进行ＨＰＶ基因的分型：将２０μＬ生物 素标记的 ＰＣＲ产物经过变性，与 １ｍＬ预热至 ４５℃的杂交缓冲液混合，在导流杂交仪ＨｙｂｒｉＭａｘ 上４５℃孵育 ５ｍｉｎ后进行导流杂交。杂交后再 用０．８ｍＬ杂交缓冲液冲洗３次。在２５℃下用封 阻液封阻孵育５ｍｉｎ。封阻后加入０．５ｍＬ酶标液 孵育３．５ｍｉｎ。用冲洗缓冲液 Ａ冲洗杂交膜，去 除未结合的酶标液，显色过程中加入０．５ｍＬ四唑 硝基蓝（ＮＢＴ）／５溴４氯３吲哚磷酸（ＢＣＩＰ）底物 在３６℃保持３～５ｍｉｎ或直到显色完成为止。在 显色后１ｈ内察看分析结果。 ２．ＴＣＴ　擦去宫颈表面黏液，将宫颈细胞刷 插入距宫颈管内１ｃｍ处，顺时针旋转５圈左右， 取出转入细胞保存液中，对于瓶中收集到的细胞 经Ｐｒｅｐ２０００系统程序化进行薄片涂片染色，ＴＣＴ 制片后，均由专门医师阅片报告。诊断采用 ２００１年国际癌症协会 ＴＢＳ诊断系统：（１）正常范 围；（２）意义不明的非典型鳞状上皮细胞（ＡＳ ＣＵＳ）和腺细胞（ＡＧＵＳ）；（３）不除外高度鳞状上 皮病变不典型鳞状细胞（ＡＳＣＨ）；（４）低度鳞状 上皮内病变（ＬＳＩＬ）；（５）高度鳞状上皮内病变 （ＨＳＩＬ）；（６）鳞状细胞癌（ＳＣＣ）和腺癌。 ３．病理学检查　对于 ＴＣＴ以及 ＨＲＨＰＶ ＤＮＡＰＣＲ结果呈阳性的病例均通过电子阴道镜 下或宫颈锥切下行病理活检，组织病理学 ＣＩＮ分 级按Ｒｉｅｈａｒｔ标准判定诊断结果。 三、统计学方法 数据分析采用ＳＰＳＳ１９．０统计软件进行统计 处理，本研究数据为成对计数数据，采用χ２检验， Ｐ＜０．０５表示差异具有统计学意义。 结　　果 一、ＴＣＴ阳性合并 ＨＰＶ阳性者共２５９例，其 中的ＡＵＳＣＳ、ＬＳＩＬ、ＨＳＩＬ、ＳＣＣ４种类型的阳性例 数及ＨＰＶ感染率，见表 １。各组间的 ＨＰＶ感染 率、ＨＲＨＰＶ感染率、低危型（ＬＲ）ＨＰＶ感染率互 相比较，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），即随着 癌前病变级别的升高，ＨＲＨＰＶ的感染率亦明显 升高。说明 ＡＳＣＵＳ和 ＬＳＩＬ患者多为 ＨＰＶ阴性 或ＬＲＨＰＶ感染的患者，ＨＳＩＬ和 ＳＣＣ患者多为 ＨＲＨＰＶ感染的患者，同时提示 ＳＣＣ与 ＨＲＨＰＶ 感染密切相关。 二、ＴＣＴ结果异常者５４０例，其中活检为异常 者１４４例，符合率为２６．７％；ＴＣＴ正常者４０８例，其 中活检为正常者４０８例，符合率为１００．０％，两者差 异具有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。 三、活检确诊 ＣＩＮⅡ级以上者 ７３例，ＨＲ ＨＰＶ阳性６６例，敏感性９０．４％，ＴＣＴ阳性６０例， 敏感性为８２．２％，两者敏感性差异无统计学意义 （Ｐ＞０．０５）。２种方法联合检测敏感性升高，与 ＴＣＴ和ＨＲＨＰＶ单独检测敏感性比较差异具有 统计学意义（Ｐ＜０．０５）。活检确诊为阴性者８０４ 例，ＨＲＨＰＶ检测阴性。ＨＲＨＰＶ、ＴＣＴ及ＨＲＨＰＶ 和ＴＣＴ联合检测的阳性预测值分别为２５．５％、 ·７１５·检验医学２０１３年６月第２８卷第６期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｕｎｅ２０１３，Ｖｏｌ２８．Ｎｏ６． １１．１％、２８．２％，阴性预测值分别为 ６８．８％、 ５９．２％、４０．８％，见表２。 表１　ＡＳＣＵＳ、ＬＳＩＬ、ＨＳＩＬ、ＳＣＣ４种类型的阳性例数及ＨＰＶ感染率的比较 类型 ＨＰＶ 阴性 阳性 感染率（％） ＨＲＨＰＶ 阳性 感染率（％） ＬＲＨＰＶ 阳性 感染率（％）＃ ＡＳＣＵＳ ２０９ １５５ ５９．８ ２８ １８．１ １２７ ８１．９ ＬＳＩＬ ６８ ８１ ３１．３ ２０ ２４．７ ６１ ７５．３ ＨＳＩＬ ４ １５ ５．８ １０ ６６．７ ５ ３３．３ ＳＣＣ ０ ８ ３．１ ８ １００．０ ０ ０．０ 　　注： 为在ＨＰＶ阳性中ＨＲＨＰＶ所占的比例；＃为在ＨＰＶ阳性中ＬＲＨＰＶ所占的比例 表２　宫颈癌ＨＲＨＰＶ和ＴＣＴ的敏感性、特异性 （％） 　　类型 敏感性 特异性 阳性预测值 阴性预测值 ＨＲＨＰＶ ９０．４（６６／７３） ５９．０（４７４／８０４） ２５．５（６６／２５９） ６８．８（４７４／６８９） ＴＣＴ ８２．２（６０／７３） ５０．７（４０８／８０４） １１．１（６０／５４０） ５９．２（４０８／６８９） ＨＲＨＰＶ和ＴＣＴ联合 １００．０（７３／７３） ３５．０（２８１／８０４） ２８．２（７３／２５９） ４０．８（２８１／６８９） 讨　　论 由于从宫颈癌前病变发展为宫颈癌是一个时 间漫长的过程，如果能及时早期发现宫颈癌并给 予恰当的处理，宫颈癌是可以治愈的。女性在感 染ＨＰＶ后，３０％～５０％会出现宫颈上皮内轻度病 变，但大部分在感染 ＨＰＶ后转为正常，只有 ＨＲ ＨＰＶ持续感染的女性，才成为宫颈癌的高发人 群［５］。由ＨＲＨＰＶ感染到发展成为宫颈癌约需９ ～２５年时间，潜伏期长有可能与病毒整合到宿主 核基因组适当的位置需要很长时间有关［６］，因 此，选择合理、规范的宫颈癌早期筛查的方法对于 提高其检出率具有重要意义［７］。目前使用 ＴＣＴ 方法能够采集到颈管细胞，制作时剔除了宫颈黏 液和炎性细胞，其清晰度和检出率均明显高于常 规的宫颈涂片，但同时也发现 ＴＣＴ对 ＨＰＶ诊断 有一定的漏诊率［８］。从本研究结果可以看出，联 合检测ＴＣＴ和 ＨＲＨＰＶ对宫颈癌的检出率比单 独检测ＴＣＴ或ＨＲＨＰＶ高，联合检测方法对诊断 宫颈癌具有重要意义。 本研究中ＴＣＴ阳性的患者，ＨＲＨＰＶ感染率 随着宫颈病变程度的加重呈上升趋势，从而认为 ＨＲＨＰＶ感染与宫颈病变的严重程度呈正相关。 宫颈癌的筛查中 ＨＲＨＰＶ检测是一个非常有意 义的指标。本研究还发现，ＡＳＣＵＳ与 ＬＳＩＬ患者 多为ＨＰＶ阴性或 ＬＲＨＰＶ感染的患者，ＨＳＩＬ与 ＳＣＣ患者多为ＨＲＨＰＶ感染的患者，从而说明感 染ＨＰＶ的危险类型与细胞学分级一致，低危型者 细胞分化好，高危型者细胞分化差，与文献［９］报 道相类似。 参 考 文 献 ［１］　纪丽伟，童婷婷，虞　晴．ＴＣＴ及阴道镜下活检在宫 颈疾病中的诊断价值［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１０， １４（５）：７３５７３７． ［２］　ＬｉｎＭ，ＹａｎｇＬＹ，ＬｉＬＪ，ｅｔａｌ．Ｇｅｎｉｔａｌｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓｓｃｒｅｅｎｉｎｇｂｙｇｅｎｅｃｈｉｐｉｎＣｈｉｎｅｓｅ ｗｏｍｅｎｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇｐｒｏｖｉｎｃｅ［Ｊ］．ＡｕｓｔＮＺＪＯｂｓｔｅｔ Ｇｙｎａｅｃｏｌ，２００８，４８（２）：１８９１９４． ［３］　ＳｏｎｇＳＨ，ＬｅｅＪＫ，ＳｅｏｋＯＳ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎｃｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄＨＰＶ１６，ＨＰＶ１６Ｅ６，Ｅ７，ａｎｄ ｈｉｇｈｒｉｓｋＨＰＶｖｉｒａｌｌｏａｄｉｎｔｈｅｕｔｅｒｉｎｅｃｅｒｖｉｘ［Ｊ］． ＧｙｎｅｃｏｌＯｎｃｏｌ，２００７，１０４（３）：７３２７３８． ［４］　周　斌，左新华，傅新文．高危型人乳头状瘤病毒 １６，１８型 ＤＮＡ检测在宫颈病变筛查中的应用价值 ［Ｊ］．检验医学，２０１２，２７（５）：３９３３９５． ［５］　宋丽君，陈春丽，罗淑桂．ＨＰＶ基因分型检测与宫颈 病变的相关性研究［Ｊ］．检验医学，２０１２，２７（３）： １６３１６６． ［６］　杨　毅，王友芳，郎景和，等．高危型人乳头瘤病毒 杂交捕获法Ⅱ评估宫颈上皮内瘤变的临床价值 ［Ｊ］．中国医学科学院学报，２００６，２８（３）：３９５３９８． ［７］　ＥｌｌＫ，ＶｏｕｒｌｅｋｉｓＢ，ＸｉｅＢ，ｅｔａｌ．Ｃａｎｃｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｄｈｅｒｅｎｃｅａｍｏｎｇｌｏｗｉｎｃｏｍｅｗｏｍｅｎｗｉｔｈｂｒｅａｓｔｏｒ ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃｃａｎｃｅｒ：ａｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌｏｆｐａｔｉｅｎｔ ｎａｖｉｇａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ，２００９，１１５（１９）：４６０６４６１５． ［８］　ＰａｔｉｌＪＢ，ＫｉｍＪ，ＪａｙａｐｒａｋａｓｈａＧＫ．Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅｉｎｄｕｃｅｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ（ＭＣＦ７）ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．ＥｕｒＪＰｈａｒｍａ ｃｏｌ，２０１０，６４５（１３）：７０７８． ［９］　ＣａｓｔｅｌｌｓａｇｕéＸ，ＤｒｕｄｉｓＴ，ＣａａｄａｓＭＰ，ｅｔａｌ．Ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎ ａｎｄｍｏｔｈｅｒｔｏｃｈｉｌｄｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｏｆｇｅｎｉｔａｌＨＰＶｇｅｎｏ ｔｙｐｅｓ：ａｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｔｕｄｙｉｎＳｐａｉｎ［Ｊ］．ＢＭＣＩｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ，２００９，９：７４． （收稿日期：２０１２０４２１） （本文编辑：姜　敏） ·８１５· 检验医学２０１３年６月第２８卷第６期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｕｎｅ２０１３，Ｖｏｌ２８．Ｎｏ６．