由上‘
可知,天麻动态水提取和醇提 效成分的损失,故不具大生产操作可能
取对夭府均有较好的提取效果。 性。
精制工艺研究
1精制工艺路线选择
为爆大限度地保存有效成分,除去杂
质,使服用剂量减少,通过沦证及预试试
验,选择三种不同的精制
:①酶法一
大孔吸附树脂法②大孔吸附树脂法③醇沉
一碱析法。
2 酶法一大孔吸附树脂法
该法主要是针对天麻动态水提液的精
制处理。
2.1直接上柱
预试试验发现,天麻动态水提液直接
」井1:,过柱速度极慢,且药液对柱子污染
较大,使柱子负荷加重,树脂再生困难。
2.2水提醇沉液上柱
天麻动态水提液醇沉,虽可除去一些
水溶性杂质使上柱药液得到精制,但其醇
沉液在浓缩时较粘稠,易粘结器皿导致有
2.3酶法一大孔吸附树脂法
天麻动态水提液离心,定容,加入一
定量的酶,保温2小时,再煮拂30min,
放冷,离心,离心液上大孔吸附树脂。
天麻水提液酶处理前后见图3, TLC;
分析见图4a
3 大孔吸附树脂法
针对天麻醉提药液的精制处理。醉提
液回收乙醇后会析出一些脂溶性杂质,一盆
要含有棕搁酸、R一谷w醇等。这些杂质
会污染树脂,故应采取醇提水沉处理,以
除去这些脂溶性杂质。
3.1 预试试验
树脂型号选用A,用量为2m1湿树
脂。分别取相当于生药2g, 5g, 10g,
15g, 20g的已备好的醇提水沉液4ml,
10nil, 20sn1, 30ml, 40m1于250m1容觉
瓶中,各加入2m1湿树脂,再用蒸馏水稀
释至刻度,移入500nil三角瓶中振摇
2411,测定天麻素含量,同时测定水沉液
原液天麻素含量。实验结果见表60
表6 天麻树脂静态吸附预试试验结果
投料量(相当
于生药克数)
吸附前天麻素
含量(mg/ml)
吸附前天麻素
总量(mg)
吸附后天麻素
含量(mg/ml)
吸附后天麻素
总量(mg)
2o 2.24 8.96 0.035 8.752g
2.24 22.4
2.24 0.170
22.25
42.5
2.24
44.8
67.2 0.27 67.5
?
?
?
20g 2.24 89.6 0.358 89.5
由表可知,预试试验投料量过大,导
致树脂不能完全吸附夭麻素,故在正式试
验中选用1g生药对2rrml湿树脂进行实验。
3.2 静态吸附试验
取备用的醇提水沉液35m1,稀释全
并准确量取
250nml置500c-1 具塞三角瓶中,加入2!1il
树脂,室温振荡24小时,测定夭麻素含
量。随行取不同型号树脂3份2m1,置rU
恒重蒸发皿中,蒸干,于120'C烘箱中烘
至恒重,计算出甸 升湿p朔旨干重。吸附
妞令一算公式如下,试验结果见表70
4o00cnl,测定天麻素含量,
公式:吸附量二 前天麻素树脂重量 (干)
含量一吸附后天麻素含量)
表7 7种型号大孔树脂静态吸附试验考察结果
树 月旨 型 号 A B C D E F G
溶液体积 (ml) 250 250 250 250
吸附前天麻素含量 (mg/ml) 0.019 0.019 0.019
250
0.019 0019
吸附后天麻素含量 (mg/inl) 0.018 0.0135 0.0155 0.0135 0.014
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树脂平均干重 (9) 0.335 0 0.459 0.487 0 0.396 0
???
???
吸附量 (mg/g) 0.746 0
.303
.825 3.268 2.823 2. 3.472 2.
-一 一 一 一
由以上实验结果可知,C与F型树脂
吸附量较大,选作重点研究。
3.3树脂用量的确定
对于C树脂,1g干树脂吸附天麻素
3.268Rg,若药材中天麻素含量按0.5%计
算,则要用153g干树脂才能吸附l00g生
药中的500cng天麻素,即确定了药材与湿
树脂的用量比。
3.4解析条件的选择
根据已有文献资料,结合研究结果,确
定了解析条件。
3.5天麻上柱试验
用分别相当于生药80g, 3008的醇提
水沉液160m1, 600in1上柱,试验结果见表
8.
·8 ·
表8天麻醇提水沉液上柱试验抬果
实 验 号 1号1号 2号
上样量(相当于生药克数)
醇洗脱液浸膏收率(%)
上柱前天麻素含量(mg)
上柱后天麻素含量(mg)
天麻素转移率(%)
300g
2.25
1344.
312. 1142.8
87.14 85
由上表可知夭麻素转移率达80%以
上,可见该工艺稳定可行。
3.6 树脂的预处理与再生
新树脂或使用过的树脂用3 % NaOF
溶液浸泡后,蒸馏水洗至由性,再用5%
HCl溶液浸泡.蒸馏水洗至中性,乙醇回
流1小时,即可。
4 醇沉一.碱析法
根据实验研究报道 (天麻注射剂工
艺),叮采用如下工艺:将天麻醉提水沉
液蒸千,用高浓度乙醇溶解浸膏,收集醇
液,调PH至8,静置,抽滤,滤液回收
乙醇,干燥,即得。
4.1水沉比例
取天麻粗颗粒800g,按前述拟定的
醇提工艺进行提取,提取液定容,等分4
份,其中1份用于测定天麻素含量及醇浸
膏收率;另3份,每份均相当于200g生
药,挥尽乙醇,分别水沉至1:1, 1:2, 1
:4(生药量:水沉液体积),静置,离心,
分别测定天麻素含量及浸膏收率。结果见
表9和图50
表9天麻醉提液不同水沉比例考察结果
_ 一 一 一 一 ~- 一 一 一 - 一 - 一
水沉比例 醇提液
天麻素含量(%)
浸膏收率(%)
0.45
三一1
0.42
1:2 1:4
0.41 0.41
14.89 13.42 12.87 12.96
由实验结果结合实际操作,确定了水
沉比例。
4.2醇沉浓度
将前述备用的醉提水沉液分P9取3份
相同体积的洛液,蒸干,分别用相同体积
的80%, 85%, 90%乙醇溶解3次,抽
滤,定容,分别测定浸膏收率与天麻素含
量,结果见表10.