头孢哌酮钠他唑巴坦钠的体内抗菌作用研究

头孢哌酮钠他唑巴坦钠的体内抗菌作用研究 符 　健 　邝少轶 　王小蒙 (海南医学院药理学教研室 ,海口 　571101) 中国图书分类号 　R 978111 文献标识码 　A 　文章编号 　100121978 (2002) 0320318203 摘要 　目的与方法 　用 Bliss 法检测头孢哌酮钠他唑巴坦钠 (4 :015)的抗菌活性 ,为临床研究和治疗提供依据。结果 　 头孢哌酮钠他唑巴坦钠 (4 :015)对产酶的金黄色葡萄球菌和 埃希氏大肠杆菌感染的小鼠体内抗菌活性 ED50分别为 9210 mg·kg - 1 和 314 mg·kg - 1 ,头孢哌酮钠舒巴坦钠 (1∶1) 的 ED50值为 16410 mg·kg - 1和 619 mg·kg - 1 ,单组分头孢哌酮 钠的 ED50值分别为 25615 mg·kg - 1和 3819 mg·kg - 1 。头孢 哌酮钠他唑巴坦钠 (4∶015)对绿脓杆菌感染小鼠的体内抗菌 活性 ED50为 10313 mg·kg - 1 ,头孢哌酮钠舒巴坦钠 (1∶1) 的 ED50为 16512 mg·kg - 1 。结论 　国产头孢哌酮钠他唑巴坦 钠对产酶的金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌和绿脓杆菌感 染小鼠有明显抗菌作用 ,且抗菌作用明显优于头孢哌酮钠单 组分和海舒必。 关键词 　头孢哌酮钠他唑巴坦钠 ; 头孢哌酮钠舒巴坦钠 ; 抗 菌作用 ; 体内 　　头孢哌酮是第 3 代头孢菌素 ,具有广谱、高效等 特点 ,临床应用广泛。近年来 ,临床上由于产酶耐药 菌的不断出现 ,导致头孢哌酮的疗效下降。他唑巴 坦是舒巴坦的衍生物 ,抑酶作用强于舒巴坦。本文 旨在头孢哌酮中加入他唑巴坦配制成 4∶015 复方制 剂后的体内抗菌作用与单组分及相关复方制剂进行 研究。 1 　材料与方法 111 　材料 11111 　抗生素 　头孢哌酮钠 (cefoperazone sodium , CPZ) , 批号 991108 , 110 g ·瓶 - 1 。他唑巴坦钠 (tazobactam sodium , TAZ) , 批号 991108 , 110 g · 瓶 - 1 。头孢哌酮钠他唑巴坦钠 (cefoperazone sodi2 um/ tazobactam sodium , CPZ/ TAZ) ( 4 ∶015) ,批号 2001 - 11 - 14 收稿 ,2002 - 02 - 07 修回 作者简介 :符　健 ,男 ,41 岁 ,硕士 ,副教授。Tel :0898266893152 , E2 mail :hnmc2fj @163. com 991108 ,11125 g·瓶 - 1 ,均由海口奇力制药有限公司 生产 ,海舒必 (cefoperazone sodium/ sulbactam sodi2 um ,CPZ/ SB T) ,批号 000503 ,110 g·瓶 - 1 ,深圳海滨 药业有限公司。 11112 　菌株 　共 3 株产酶细菌 ,金黄色葡萄球菌 (00080855) ,埃希氏大肠杆菌 (99092273) ,绿脓杆菌 (00080840) ,中山医科大学附属三院呼吸内科实验 室提供。 11113 　动物 　ICR 种小鼠 ,18～22 g , ♀♂各半 ,健 康无伤。西安医科大学实验动物中心提供 ,动物合 格证号 :陕西医实动字 082004 号。 11114 　辅助材料 　高活性干酵母 ,广东遂溪县制药 厂生产。 112 　方法 11211 　体内抗菌试验 　按 Bliss 法设计和《新药 (西 药)临床前指导原则汇编》体内抗菌试验方法 ,实验 前一天定量接种细菌于营养肉汤中 ,37 ℃温孵 6h , 取菌液 011 ml 转种于 10 ml 营养肉汤中 ,37 ℃培养 孵育 18 h ,菌原液用 015 %干酵母液制成动物感染 菌液 (1 MLD ,为 100 %最小致死菌量) 。实验动物 按空腹体重、性别随机分成 : (1) 头孢哌酮钠组 ; (2) 他唑巴坦钠组 ; (3)海舒必组 ; (4)头孢哌酮钠他唑巴 坦钠组 (4∶015) , (5)空白对照组 (注射等体积注射用 水) ;每组 6 个药物浓度 (各药物用注射用水溶解后 , 稀释至所需浓度 ,剂间距为 1∶0175) ,每个药物浓度 有动物 10 只 , ♀♂各半。试验组每只小鼠腹腔注射 菌量 1MLD 菌液 015 ml 以感染小鼠 ,感染即刻和感 染后 6 h 分别皮下给予各组药每 20 g 体重 012 ml , 连续观察 7 d ,各组动物死亡情况 ,对死亡小鼠 进行解剖。 11212 　数据处理 　将感染后 7 d 实验结果用 Bliss 法计算头孢哌酮钠、他唑巴坦钠、海舒必及头孢哌酮 钠他唑巴坦钠 (4∶015) 对各菌株的 ED50和 ED50的 95 %可信限 ,应用方差分析 L SD 检验法对每组均数 进行两两比较 , P < 0105 被认为具有显著性意义。 SQMS is an inhibitor of protein kinase CK2 , and the inhibitory action of SQMS on CK2 is competitive with A TP and noncompetitive with casein. KEY WORDS 　protein kinase CK2 ; recombinant protein ; holoenzyme ; quercetin ; derivatives ; enzyme kinetics ·813· 中国药理学通报 　Chinese Pharm acological B ulletin 　2002 J un ;18 (3) :318～20 © 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net Tab 1 　Effect on antibacterial activity of CPZ/ TAZ in vivo ( …x ±s , n = 10) Organisms(1 MLD) / Cfu1mouse - 1 Drugs ED50/ mg·kg - 1(95 % confidence limit) ED50ratio P( ED50) CPZ 25615 (19019 - 34415) ①③ 516 < 0101 S aureus No 00080855 311 ×106 CPZ/ TAZ(4∶015) 9210 (6811 - 12413) ①② 1114 < 0101 CPZ/ SBT 16410 (12914 - 20810) ②③ 210 < 0101 CPZ 3819 (2818 - 5216) ①③ 116 < 0101 E coli No 99092273 618 ×104 CPZ/ TAZ(4∶015) 314 (216 - 414) ①② 218 < 0101 CPZ/ SBT 619 (513 - 910) ②③ 118 < 0101 CPZ 40511 (31914 - 51316) ①③ 215 < 0101 Ps aeruginosa No 00080840 712 ×105 CPZ/ TAZ(4∶015) 10313 (8010 - 13313) ①② 319 < 0101 CPZ/ SBT 16512 (12711 - 21419) ②③ 116 < 0105 　①CPZ; ②CPZ/ TAZ(4 :015) ; ③CPZ/ SBT 2 　结果 体内抗菌结果明 ,头孢哌酮钠他唑巴坦钠抗 产酶埃希氏大肠杆菌的 ED50值明显低于海舒必的 ED50值 (314 vs 619 mg·kg - 1 , P < 0101)和头孢哌酮 钠的 ED50值 (314 vs 3819 mg·kg - 1 , P < 0101) ;同 时头孢哌酮钠他唑巴坦钠抗绿脓杆菌的体内 ED50 值也明显低于海舒必和头孢哌酮钠的 ED50 值 (10313 vs 16512 mg ·kg - 1 , P < 0105 ; 10313 vs 40511 mg·kg - 1 , P < 0101) 。说明头孢哌酮钠他唑 巴坦钠对埃希氏大肠杆菌和绿脓杆菌的抗菌作用明 显强于单组分头孢哌酮钠和海舒必。 其次 ,感染产酶的金黄色葡萄球菌的小鼠体内 抗菌作用发现 ,头孢哌酮钠他唑巴坦钠抗菌作用的 ED50值明显低于海舒必 (9210 vs 16410 mg·kg - 1 , P < 0101) ,可见 ,头孢哌酮钠他唑巴坦钠对产酶的金 黄色葡萄球菌的抗菌作用也明显强于单组分头孢哌 酮钠和海舒必 (见 Tab 1) 。 　　死亡小鼠剖检肉眼观察 ,各实验组和对照组小 鼠均见前肢腋下及颌下淋巴结肿大 ,十二指肠及相 邻空肠有 5～8 cm 不等长度坏死 ,其他脏器未见异 常 ,实验组与对照组无明显差异。 3 　讨论 本研究观察了化学药品 3 类新药头孢哌酮钠他 唑巴坦钠的体内抗菌作用 ,并与单组分头孢哌酮钠 和海舒必的抗菌作用进行了比较 ,结果表明头孢哌 酮钠他唑巴坦钠对 3 株产酶的细菌体内抗菌作用优 于海舒必和头孢哌酮钠。 近年来 ,临床上由于耐药菌株的增多和超广谱 酶的发展[1～3 ] ,致使药物疗效下降 ,使第 3 代头孢菌 素的使用受到限制。他唑巴坦钠为一典型的不可逆 β2内酰胺酶抑制剂 ,对染色体介导和质粒介导的β2 内酰胺酶均具有较强的抑酶作用 ,其抑酶谱较舒巴 坦广。临床研究发现他唑巴坦钠与哌拉西林钠联合 有协同作用后不久[4 ,5 ] ,国内又开发了海舒必。我 们的研究发现他唑巴坦钠与头孢哌酮钠合用后 ,对 抗产酶金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌、绿脓杆菌 感染的小鼠疗效均强于海舒必和头孢哌酮钠单用 , 其中对产酶菌金葡菌的体内疗效为头孢哌酮钠单用 强 11 倍以上 ,对 3 株产酶菌的疗效较海舒必强 115 倍以上。 综上所述 ,头孢哌酮钠他唑巴坦钠按 4∶015 配 比组方 ,因其减少了他唑巴坦的含量 ,其价格和毒性 较该药的其他配比组方低 ,易被患者所接受 ,且临床 疗效未见降低 ,具有进一步开发研究价值。 参考文献 1 　Bus h K. Characterization of β2lactamase1 A nti microb A gents Chemother , 1989 ;33 :259～63 2 　Ja coby GA , Medeiros AA1 More extended2spectrum β2lactanase (Minireview) 1 A nti microb A gents Chemother , 1991 ; 35 : 1697～ 704 3 　Sirot D1 Extended2spectrum Plasmid2mediatedβ2lactamases1 J A n2 ti mierob Chemother , 1995 ;36 (Suppl1A) :19～34 4 　Dias MBS , Jacobus NV1 Tally FP1 In V it ro activities of Cefopera2 zone2sulbactam against Bacteroides species1 J A nti microb Chemoth2 er , 1986 ;18 :467～71 5 　张淑华 , 欧真蓉 , 庄镇华. 国产哌拉西林/ 他唑巴坦钠体内外抗 菌作用. 四川生理科学杂志 ,1999 ;21 (4) :16 Study on antibacterial activity of cefoperazone sodium and tazobactam sodium in vivo FU Jian , KUAN G Shao2Yi , WAN G Xiao2Meng ( Depart ment of Pharm acology , Hainan Medical College , Haikou 　571101) ABSTRACT 　AIM and METHOD 　To investigate the antibacterial activity ( ED50value) of cefoperazone ·913·中国药理学通报 　Chinese Pharm acological B ulletin 　2002 J un ;18 (3) © 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 二苯乙烯类化合物 E1 的降糖作用及其机制的初步研究 赵贵卿 　吴祖泽 　袁丽珍 　李军林 　唐仲雄 　韩 　媛 (军事医学科学院放射医学研究所 ,北京 　100850) 中国图书分类号 　R 4461112 ; R 45815 ; R 5871105 ; R 977115 文献标识码 　A 　文章编号 　100121978 (2002) 0320320203 摘要 　目的 　观察灌胃给予二苯乙烯类化合物 E1 对实验 性非胰岛素依赖性糖尿病 (N IDDM) 大鼠的降糖作用。方法 　通过尾静脉注射小剂量链佐菌素 ( streptozotocin , STZ) 来 损伤大鼠胰岛细胞造成其糖耐量异常 ,继而喂以高糖 - 高脂 饲料来诱发动物肥胖形成的 Ⅱ型糖尿病大鼠模型。结果 　 灌胃给予二苯乙烯类化合物 E1 能明显降低 N IDDM 大鼠空 腹血糖、葡萄糖耐量实验 (O GTT) 各时间点的血糖值 ;二苯 乙烯类化合物 E1. 011 mmol·L - 1 及 01001 mmol·L - 1 对 βTC3 细胞无刺激其分泌胰岛素作用。结论 　二苯乙烯类化 合物 E1 的降糖作用并非通过刺激胰岛素的分泌 ,而可能是 通过增加胰岛素作用效率。 关键词 　血糖 ;N IDDM 大鼠 ;糖耐量 ;二苯乙烯类化合物 E1 2001 - 10 - 31 收稿 ,2001 - 12 - 28 修回 作者简介 :赵贵卿 ,女 ,32 岁 ,讲师 ,军事医学科学院放射医学研究所 在读博士生。Tel : 010266932284 , Fax : 010268214653 , E2 mail :zhaogzhao @yahoo. com ; 吴祖泽 ,男 ,65 岁 ,中科院院士 ,国际辐射研究协会首任中 国理事 ,中国病理生理学会实验血液学专业委员会主任委 员 　　近年来 ,随着人们生活水平的提高、饮食结构的 改变及诊断技术的进步 ,糖尿病在我国的发病率逐 年升高。快速吸收的短效胰岛素制剂虽可改善血糖 控制 ,但仍无治疗糖尿病的特效药物。二苯乙烯类 化合物是近年来我们研究室从藏边大黄根茎中提取 纯化的一种单体 ,以往的研究结果表明该类化合物 具有抗菌、消炎、抗肿瘤等多种生理活性[1～3 ] ,但就 其降血糖作用 ,国内外尚未见到相关报道。本文拟 在整体动物水平观察二苯乙烯类化合物 E1 降糖作 用 ,并通过 O GTT 及细胞培养实验 ,探讨二苯乙烯 类化合物 E1 降糖机制是否通过刺激胰岛 B 细胞分 泌胰岛素。 1 　材料 1 . 1 　动物与细胞系 　♀ Wistar 大鼠 60 只 ,2 mon 龄 ,体重 180～220 g ,由军事医学科学院实验动物中 心提供。βTC23 细胞系为诺和诺德研发中心王保平 博士馈赠。 1 . 2 　药品与试剂　链佐菌素 ( STZ) 、胰蛋白酶、青 霉素、链霉素均为美国 Sigma 公司产品 ; RPM I 1640 购自 Gibco 公司 ;胎牛血清购于 Hyclone 公司 (批 号 :A KC11608) ;β2巯基乙醇为上海生工生物有 限公司产品 ;葡萄糖测定试剂盒 (葡萄糖氧化酶法) , sodium and tazobactam sodium (4∶015) i n vivo us2 ing minor modified Karbers method ,which will offer some important evidences for clinical t rial and thera2 py1 RESULTS　The ED50 value of cefoperazone sodi2 um and tazobactam sodium(4∶015) and Cefoperazone sodium and sulbactam sodium (1∶1) i n vivo protest2 ed against zymogenic staphylococcus aureus and Es2 cherichia coli in mice infected by these bacteria were 9210 mg·kg - 1 and 314 mg·kg - 1 ,16410 mg·kg - 1 and 619 mg·kg - 1 , respectively ,and 25615 mg·kg - 1 and 3819 mg·kg - 1 in single composed compound of cefoperazone sodium , cefoperazone sodium and tazobactam sodium (4∶015) i n vivo had more potent antibacterial activity compared with cefoperazone sodium and sulbactam sodium (1∶1) and single com2 posed compound of cefoperazone sodium. The ED50value of cefoperazone sodium and tazobactam sodium(4∶015) protested against pseudomonas aeruginosa inmice infected was lower than that of Cefoperazonesodium and sulbactam sodium and single composedcompound of cefoperazone sodium1 CONCL USION　Cefoperazone sodium and tazobactam sodium made inChina has an markedly therapeutic effect on antibac2terial activity protected against zymogenic staphylo2coccus aureus and Escherichia coli and pseudomonasaeruginosa in mice infected by these bacteria1KEY WORDS 　cefoperazone sodium and tazobactamsodium ; cefoperazone sodium and sulbactam sodium ;antibacterial activity ; i n vivo ·023· 中国药理学通报 　Chinese Pharm acological B ulletin 　2002 J un ;18 (3) :320～2 © 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net