染色体检查操作程序

染色体检查操作程序 1、 接种培养： 取受检查者全血放入培养瓶内，每瓶需0.3~0.4ml，轻轻摇匀后放入37℃恒温培养箱培养72小时。 二、制片： 1. 加秋水仙素：在细胞停止培养前2小时，加入浓度为10ul/ml的秋水仙素3小滴，继续培养2小时。 2. 离心：将培养液用吸管吸入离心管中（10ml）1200r/min离心10分钟。 3. 低渗：弃上清，加入已预温至37℃的0.075mol/L氯化钾溶液8ml，用吸管充分打匀，放入37℃温箱中低渗15分钟。 4. 预固定：将现配的甲醇冰醋酸固定液(3:1)约1ml放入离心管中，轻轻打匀后，1200r/min离心10分钟。 5. 第一次固定：弃上清，加入现配的固定液8ml，轻轻打匀固定20分钟后1200r/min离心10分钟。 6. 用第一次固定的方法再固定两次。 7. 滴片：弃上清液，用固定液将沉淀调成细胞悬液，然后均匀滴在玻片上。 8. 烤片：将制备的染色体片后放入70℃烤箱中烤片3小时。 2、 显带： 配制0.025%PH为7.0~7.2的胰酶溶液预温到37℃，将玻片放入胰酶溶液消化20秒左右，再放入预温至37℃的0.85%NaCl溶液清洗两次，giemsa染液染色5分钟，自来水冲洗干净，晾干后即可阅片。 3、 阅片： 每例标本油镜下常规分析分裂相30个，G带分析3~4个（嵌合体分析数加倍）。最后选择一个分裂相作显微摄像，制核型图并打印单。（每例标本必须经副高以上专业技术人员审片后方能发报告） 细胞遗传室 2006年8月