复方氨维胶囊单一品种清洗消毒验证

安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2007 Aug；ll(8) ．761． 复方氨维胶囊单一品种清洗消毒验证 郭金习，王振礼，曹 丹 (无锡正东药业有限公司，江苏无锡 214091) 关键词：验证；清洗消毒；紫外分光光度法；微生物限度检测法 在复方氨维胶囊生产的每道工序完成后，对每道工序的 生产设备进行清洗 ，这是防止污染、交叉污染和确保产品质量 的必要手段。设备的清洁程度，取决于残留物的性质、设备的 结构、材质和清洗的方法。设备的清洗消毒必须按照设备的 清洗消毒操作规程进行。 本文介绍制药企业生产营养性单一品种的生产设备清洗 消毒验证方法。对于合格、残 留活性组分计算、取样方 法、取样的回收率测定、最小检测限、残留清洗剂和消毒剂的 检查、残留活性组分检测和微生物限度检查等，根据 GMP要 求，结合企业实际情况进行测试。用紫外分光光度法测定取 样回收率为 89．06％．1tSD=7．18％。 1 仪器与材料 751G紫外分光光度计，消毒绵签．0．1 tool·L 氢氧化 钠溶液，无菌生理盐水，带盖50 rnl无菌试管，培养箱，喷壶。 2 方法与结果 2．1 合格标准⋯ 2．1．1 活性组分残留量 标准限度≤0．1％，即残留物浓度限 度为 l g·kg～，要求上一批产品残留在设备中的活性组分全 部混合到下一批产品中所致的浓度不得高于1 g·kg～，该限 度的安全性对于生产营养性单一品种复方氨维胶囊是足够的。 复方氨维胶囊为复方制剂，含有 17种活性组分 ，其中 11 种氨基酸、5种水溶性维生素和 1种脂溶性维生素。根据处 方每粒胶囊含有活性组分 174．75 mg。在清洗消毒验证中不 可能，也不需要对 17种活性组分的每一种残 留量进行测定， 而是选择 17种活性组分中溶解度最小的活性组分作为测定 对象就可。11种氨基酸溶解度 比较见表 1。 表1 11种氨基酸溶解度比较 品名 溶解度 品名 溶解度 异亮氨酸 4．03(20。C) 亮氨酸 2．37(20。C) 盐酸赖氨酸53(O。C)111．5(5O。C) 苯丙氨酸 2．74(20。C) 苏氨酸 16．6(30。C) 缬氨酸 8．85(25。C) 色氨酸 06(20。C)1．22(30。C) 谷氨酸 0．72(20。C)1．04(30。C) 1．44(40。C)1．71(50。C) 2．51(40。C)2．19(50。C) 盐酸精氨酸 53(0。C) 蛋氨酸 3．0(20。C) 甘氨酸 22．52(20。C) 由表 1可知，11种氨基酸中色氨酸和谷氨酸溶解度较 小，考虑谷氨酸没有紫外吸收，而色氨酸有紫外吸收，所以，选 择色氨酸为检测对象。如果最难溶解的活性组分色氨酸，按 清洗消毒操作规程清洗后，能达到要求，那末，溶解度比色氨 酸大的活性组分就更容易清洗掉，更容易达到要求了。 复方氨维胶囊的批量为 150 kg，残留物浓度限度为 1 g· ～ ，则允许下一批中含有上一批残留物量为 150 kg X 1 g· kg～=150 g。复方氨维胶囊每粒含有活性组分 174．75 mg，其 中色氨酸为 5 mg，残留物量允许为 150 g时，色氨酸为：174．75 ：5=150：X，X=5 X 150÷174．75=4．291 8 g=4 291 800 lag 在湿法制粒包衣机、热风循环烘箱(烘盘)、多向运动混 合机和胶囊填充机4种生产设备与活性组分接触的表面上允 许色氨酸量为4 291 800 txg。湿法制粒包衣机面积为 23 754 cm 、热风循环烘箱有烘盘 48只，每只烘盘面积为 3 640 em 、 热风循环烘箱总面积为174 720 em 、多向运动混合机面积为 29 849 em 和胶囊填充机面积为 2 736 em 、设备的总面积为 231 059 cm 测定残留色氨酸时，取样面积为25 cm ，在25 em 上允许 的残留色氨酸量为 4 291 800 txg÷231 059 em2 x25=464．3 。 残留色氨酸的浓度(最大浓度)为464．3 txg÷25 ml=18． 57 mg·L～ 。 2．1．2 目视 不能有肉眼可见的残留痕迹。 2．1．3 微生物限度 ≤50 CFU／25 cm (棉签擦拭取样)。 2．2 取样方法 2．2．1 残留活性组分 擦拭法 ：取脱脂棉球用 0．1 tool· L。 氢氧化钠溶液湿润后，用镊子夹住湿润棉球 ，在设备内表 面擦拭 ，每个棉球擦拭 25 em ，对设备最难清洗部门必须擦拭 取样。要求平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时将 其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面，翻转棉球擦 拭时应与前次擦拭方向垂直。擦拭后的棉球放入带盖的试管 中，加0．1 tool·L 氢氧化钠溶液至25 rnl，加盖，超声波洗 脱，使色氨酸残留组分溶解于0．1 tool·L 氢氧化钠溶液中。 2．2．2 微生物 擦拭法取样同样适用于微生物取样，但是微 生物取样应先于残留活性组分，并且应使用生理盐水湿润的 无菌棉球，按照表面微生物取样的要求取样。洗脱稀释微生 物时应用无菌生理盐水。 2．3 检测方法 2．3．1 残留活性组分 紫外分光光度法：复方氨维胶囊中色 氨酸的含量测定有高效液相色谱法 、比色法、双波长分光 光度法等，但是，这些方法有的需要昂贵仪器、有的操作繁琐 费时。我们根据色氨酸在紫外区有吸收，操作简便，所以采用 紫外分光光度法测定残留色氨酸。 2．3．2 微生物限度 按《中国药典}2o05年版微生物限度检 查法。 2．4 残留活性组分取样回收率和重现性测试 取样平均回 收率 ：≥80％。重现性 ：ltSD≤10％。 2．4．1 对照溶液的配制 精密称取色氨酸标准品 100 nag，置 100 ml量瓶中，加0．1 tool·L 氢氧化钠溶液溶解，并稀释至 刻度，摇匀，精密量取 2 ml，置另 100 ml量瓶中，加 0．1 tool· L 氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，备用(20 mg·L。)。 2．4．2 试样溶液制备 准备一只平整光洁的不锈钢盘，在不 锈钢板上用铅笔划 5 em x5 12m的方块 10块(每 1方块为 25 em )，在每一方块钢板内用喷壶均匀地喷雾浓度为2．00 g· L (精密称取色氨酸标准品 100 mg，置 50 rnl量瓶中加 0．1 tool·L 氢氧化钠溶液溶解，并稀释至刻度，摇匀)的色氨酸 维普资讯 http://www.cqvip.com ． 762． 安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2007 Aug；ll(8) 溶液 0．25 ml，用 电吹风温和地吹干，按擦拭法用 0．1 mol。 L 氢氧化钠溶液湿润棉球擦拭钢板，每擦 1个方块(25 cm )换一个棉球，将擦拭后的棉球分别放入 25 ml试管中，加 0．1 mol·L 氢氧化钠溶液至刻度，用超声波洗脱，洗脱液 过滤，备用。 2．4．3 测试 按紫外分光光度法在280 nm波长处，用0．1 mol·L 氢氧化钠溶液为空白，分别测定对照溶液和试样溶 液吸光度。具体测试结果见表 2。测试记录：测试仪器 751G 紫外分光光度计 ，测试波长 280 nm，对照品溶液测试：对照品 溶液(1)0．540，对 照品溶液 (2)0．545，对照 品溶液(3)0． 541，平均值为0．542。 表2 试样溶液测试 回收率计算：试样溶液吸光度 ×100％ =对照品平均 吸光度。平均回收率：89．06％，RSD：7．18％。 2．5 残留组分最低检测限和线性范围 2．5．1 最低检测限 751G紫外分光光度计噪音为0．001，最 低检测限为噪音的3倍计时，色氨酸的最低检测限为0．08 mg · L～。残留活性组分以 0．1％计 的检测浓度为 18 mg· L～，远远大于最低检测限。所以用紫外分光光度法测定色 氨酸残留活性组分是合适的。 2．5．2 线性范围 要求相关系数 R>10．95。测试溶液的配 制：精密称取色氨酸标准品 100 mg，置200 ml量瓶中，加0．1 mol·L 氢氧化钠溶液溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取 1⋯2 3 4、5 ml，分别置 100 ml量瓶中，加 0．1 mol·L 氢氧 化钠溶液稀释至刻度，摇匀，按紫外分光光度法，在280 nm处 测定吸光度。结果浓度 5、l0、l5、20、25、30 mg·L 色氨酸 溶液吸光度分别为0．178、0．300、0．422、0．542、0．665、0．787， 相关系数 r≥0．9999，符合要求。 2．6 清洗剂和消毒剂残留量检测 每台设备在清洗中所用 的清洗剂均为饮用水、5％碳酸钠溶液和纯化水，消毒时用的 消毒剂均为70％ ～75％酒精。按清洗消毒操作规程清洗消 毒后，如果5％碳酸钠溶液有残留，最后的淋洗水的PH值应 与淋洗用的纯化水不同，因此 ，取最后淋洗水 ，测试 pH值 ，与 纯化水的pH值比较，就可判断有无5％碳酸钠溶液的残留。 测试了3次，结果最后淋洗水的pH值与纯化水的相符，所 以，认为清洗剂 5％碳酸钠溶液的残留量符合要求。 消毒剂是70％～75％酒精，按清洗消毒操作规程清洗消 毒后，干燥和存放过程中会 自然挥发，所以，认为消毒剂 70％ ～ 75％酒精残留量符合要求。 2．7 残留活性组分测定 2．7．1 样品液制备 按擦拭法，用0．1 tool·L 氢氧化钠 溶液湿润的棉球，分别擦拭设备(湿法制粒包衣机、热风循环 烘箱的烘盘、多向运动混合机和胶囊填充机)内壁、底部、顶 部的面积25 cm ，各取两个点，取样点应包括最难清洗部位在 内。擦拭后的棉球分别放入 50 ml试管中，加 0．1 mol·L 氢氧化钠溶液适量，用超声波洗脱 ，并用 0．1 mol·L 氢氧 化钠溶液稀释至25 ml，洗脱液滤过，备用。 2．7．2 对照溶液的配制 精密称取色氨酸对照品 185．7 mg， 置 100 ml量瓶中，加 0．1 mol·L 氢氧化钠溶液溶解，并稀 释至刻度，摇匀，精密量取2 ml，置另一 100 ml量瓶中，加0．1 mol·L 氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，备用。 2．7．3 测试 按紫外分光光度法，在 280 nm波长，用 0．1 mol·L 氢氧化钠溶液为空白，分别测定对照溶液和试样溶 液吸光度，比较吸光度大小，试样溶液吸光度比对照溶液吸光 度小，即为合格。这种测试方法为限度检查法。若要测定具 体残留活性组分的数值，应按下述方法计算：试样溶液吸光 度／取样回收率 ×对照品溶液浓度 ×设备面积倍数／残留活性 组分的量 =对照溶液吸光度。 每只设备的残留活性组分应以取样点的平均值为结果。 测定 3次结果见汇总表。 2．8 微生物限度检查 2．8．1 样品液制备 按擦拭法取样，无菌棉球用无菌生理盐 水湿润后 ，分别擦拭设备 (湿法制粒包衣机 、热风循环烘箱、 多向运动混合机和胶囊填充机机)内壁、底部、顶部的面积 100 cm ，各取两个点，取样点应包括最难清洗部位在内。擦 拭后的棉球分别放入带盖 50 ml无菌试管中，加无菌纯化水 适量 ，振摇洗脱，并用无菌纯化水加至25 ml，备用。 2．8．2 微生物检查 按微生物限度检查法，配制营养培养 基，浇平板，每只平板中加样品液 1 ml，平板凝固后，(38± 2)℃培养 48 h。以取样点的平均值为结果。检查 3次。 2．9 验证结论 按设备清洗消毒验证方案，对湿法制粒包衣 机、热风循环烘箱、多向运动混合机和胶囊填充机进行了清洗 消毒验证，结果每只设备的残留活性组分的残留量和微生物 限度限度都符合规定要求，每台设备的清洗消毒操作规程草 案可作为正式的每台设备的清洗消毒操作规程，交付生产车 间使用。 3 讨论 GMP是预防型质量管理体系，为了达到预期结果，确保药 品质量万无一失，设备清洗消毒操作规程必须进行验证。残留 活性组分残留量是很微量的，只能用灵敏的检测方法才能测 定，通常是用uV、HPLC。产品生产结束后，总会在设备上残留 一 些复方氨维胶囊颗粒。残留的复方氨维胶囊颗粒，对微生物 是很好的营养物。微生物在适宜的温度、湿度下，在残留的复 方氨维胶囊颗粒中可大量繁殖，产生各种代谢物，从而大大增 加残留物的复杂性和危害程度。显然，如果这些残留物、微生 物和其代谢产物进入下批产品，必然对下批产品产生不 良影 响。因此，必须通过清洗将这些污染源从药品的生产循环中除 去。严格地讲，绝对意义上的、不含任何残留物的清洁状态是 不存在的，对于营养性的复方氨维胶囊也没有必要象生产无菌 注射剂那样要求。在制药工业中，清洁的概念就是指设备中各 种残留物(包括微生物及其代谢产物)的总量低至不影响下批 产品的规定的疗效、质量和安全性的状态。通过有效的清洗， 可将上批生产残留在生产设备中的物质减少到不会影响下批 产品疗效、质量和安全性的程度。由于有效的清洗除去了微生 物繁殖需要的营养物，创造了不利于微生物繁殖的客观条件， 便于将设备中的微生物污染控制在一定水平。 GMP对设备清洗消毒验证只有要求，没有统一的做法模 式。对于已确定的设备和产品，清洗效果取决于清洗的方法。 维普资讯 http://www.cqvip.com 安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2007 Aug；ll(8) ·763· ◇医疗器械◇ 415例可疑医疗器械不良事件分析 黄 萍 (安徽省药品检验所，安徽 合肥 230051) 摘要：目的 通过对收集到的医疗器械不良事件信息的汇总分析，发挥医疗器械不良事件监测工作的指导作用，以保障公众用 械安全。方法 采用描述性分析的方法进行综合分析。结果 医疗器械不良事件监测工作为安全有效使用医疗器械起到了预 警作用。结论 加强医疗器械不良事件监测工作是确保安全使用医疗器械的有效措施。 关键词：医疗器械；不 良事件监测；综合；分析 Analysis of 415 doubted reports on adverse medical device event HUANG Ping (Anhui Provincial Institutefor Drug Control，Hefei，Anhui 230051，China) Abstract_"Ailn By analyzing adverse medical device event reports received in Anhui province，to promote instructional function of adverse medical device event monitoring to ensure safe use of medicine in public．Methods Descriptive analysis methods were used to analyze those data．Results The adverse medical device event monitoring work offered an early warning function on how to use medical device safely and ef- fectively．Conclusion Strengthening the adverse medical device event monitoring is an effective measllFe to insure safe use of medical device． Key words：medical device；adverse event monitoring；reports；analysis 医疗器械不良事件监测包括对医疗器械不良事件进行记 录、收集、分析、和控制、处理的全过程，是医疗器械监督 管理的重要组成部分，也是保障医疗器械安全有效的一项重 要工作。对医疗器械不良事件报告的分析评价是医疗器械不 良事件监测的核心部分，也是政府监督部门采取行政决策的 依据。2006年，安徽省医疗器械不良事件监测 中心通过对收 集的415份可疑医疗器械不良事件报告信息进行分析，获得 事件发生涉及的地区、器械种类、临床主要不良事件的资料， 描述事件的危害性，发现与医疗器械有关的线索 ，评价报告可 利用性，来更好地探索我省医疗器械不 良事件监测模式。 1 资料与方法 1．1 资料来源 415份可疑医疗器械不 良事件报告表由省、 市、县三级监测网络通过国家报告软件统一上报，收集时间为 2006年元月 1日至 12月 30日。 1．2 分析方法 采用描述性研究方法对可疑不良事件涉及 的报告单位、器械种类、事件主要临床表现进行统计分析。根 据国家监测中心接受分析医疗器械不 良事件报告规范的要 求 ，对报告质量进行分析。全部报告由Epidata3．02统一录入 管理，数据结果导出到 SPSS10．0统计分析。 2 结果 2．1 基本情况 2．1．1 调查对象 为在安徽省辖区内使用医疗器械的患者。 2．1．2 报告对象 415份可疑医疗器械不 良事件报告中，共 涉及 167家报告单位(包括：诊所、计划生育服务站、保健 站)，来源医疗机构95家共计261份，占62．89％、经营企业的 报告 143份，占34．46％、药监部f-i 11份，占2．65％，尚未收 到来 自生产企业的报告。 2．1．3 报告质量 在 415份报表中，报告单位名称、医疗器 械名称 100％填写，可追溯性好；报告日期、使用场所、事件陈 述、事件后果四项填写较为完整详细，危害性质的可识别性较 好；生产企业名称、生产企业联系地址、生产企业联系电话 、型 号规格、产品批号、注册证、发生原因等填写项目缺失较多，该 设备的清洗方法应根据企业具体实际情况，写成书面文件，即 设备清洁操作规程，不同的设备有不同的清洁操作规程。设 备的清洁操作规程应包括影响清洁效果的各项具体规定，如 清洗前设备的拆卸、清洗剂的种类、浓度、温度、清洗次序和各 种参数，清洗后的检查或清洁效果的确认等以及生产结束后 等待清洗的最长时间和清洗后至下次生产使用的最长存放时 间(有效期)等。 复方氨维胶囊主要生产设备有湿法制粒包衣机、热风循 环烘箱、多向运动混合机和胶囊填充机4种，每只设备均制定 了清洗消毒操作规程草案，规定了清洗消毒方法、对所用清洗 剂、消毒剂品种、用量 、清洗次数都有了规定，为证明其清洗消 毒操作规程草案的有效性，可靠性和重现性，分别进行三次清 洗消毒验证，证明每只设备没有来 自上批产品和清洗消毒过 程影响产品质量的因素，清洗消毒操作规程草案是切实可行 的，能够始终如一地生产出达到预期质量标准的产品，清洗消 毒操作规程草案可转为正式清洗消毒操作规程。 清洗消毒验证的残留活性组分残留量和微生物限度应根 据产品剂型而定，对于营养性单一品种残留活性组分残留量 规定为0．1％，微生物限度为≤50 CFU／25 cm ，这样的规定既 能保证产品质量，同时对一般生产企业也能达到。 每批生产结束，必须进行清场清洁工作，但不必每批对设 备进行清洗消毒，根据我们的生产，单一品种生产设备的 清洗}肖毒，每周进行 1次，微生物限度检查即可符合要求。 参考文献： [1] 国家食品药品监督管理局．药品生产验证指南[M]．北京：化学 工业出版社，2003：197． [2] 邓海根．制药企业 GMP管理实用指南[M]．北京：中国计量出 版社，2000：452． [3] 国家食品药品监督管理局．国家药品标 WS．一XG一003—2002． [4] 上海市药品标准．沪 Q／WS一1—1281—81． (收稿日期：2007—04—11) 维普资讯 http://www.cqvip.com