ABO血型鉴定

ABO血型鉴定及人体动脉血压测定 【实验目的】 熟悉ABO血型鉴定的方法，充分认识输血时血型不合所造成的严重后果。 学会间接测量法（听诊法）测定人体动脉血压。 【实验原理】      血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。 学习间接测量法（听诊法）测定人体动脉血压原理，并实际测定人体肱动脉的收缩压和舒张压的正常值。间接法测量动脉血压原理是用血压计的袖带在所测动脉外施加压力，再根据血管音的变化来测定血压。通常血液在血管内流动时听不到声音，但如果在血管外施加压力使血管变窄，则血流通过狭窄处形成涡流可发出声音。当缠于上臂血压计袖带内压力超过收缩压时，完全阻断了肱动脉的血流，此时在肱动脉的远端（袖带下）听不到声音，也触不到肱动脉的脉搏。当徐徐放气减小袖带内压，在其压力减低到低于肱动脉收缩压的瞬间，血液在血压达到收缩压时才能通过被压迫变窄的肱动脉，形成涡流，此时能在肱动脉的远端听到声音和触到脉搏，此时袖带内压力的读数为收缩压。若继续放气，当袖带内的压力越接近于舒张压，通过的血流量也越多，血流持续时间越长，听到的声音也越清晰。当袖带内压力等于或稍低于舒张压的瞬间，血管内血流由断续的流动变为连续流动，此时声音突然由强变弱或消失，脉搏也随之恢复正常，此时袖带内的压力为舒张压 3－1 ABO血型中的抗原和抗体 血 型 红细胞膜上所含的抗原 血清中所含的抗体 O 无A和B 抗A和抗B A A 抗B B B 抗A AB A和B 无抗A和抗B 【实验对象】 人体（学生自愿者）。 【实验器材和药品】 1．仪器 血压计，听诊器，桌椅。 2．器械 采血针，消毒注射器，双凹玻片，小试管，竹签，棉球，腊笔。 3．药品 标准A血清，标准B血清，生理盐水，75％酒精，碘酒。 【实验步骤】 （一） ABO血型鉴定 玻片法 （1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2） 细胞悬液制备 从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。 （3） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。 （4） 竹签两头分别混合，搅匀。 （5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。 （6） 判断血型 根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。（见图4-3-1-2示） 图3－1玻片法鉴定ABO血型 （二）人体动脉血压测定 1．熟悉血压计的结构 常用血压计有两种类型，常用的是汞柱式血压计，另一种是弹簧式血压计。前者比较精确，后者方便携带。两种血压计均由检压计、袖带和橡皮气球三部分组成。汞柱式血压计的检压计是一个标有0~40 kPa（0~300 mmHg）（1mmHg=0.133kPa,1kPa=7.5mmHg）刻度的玻璃管，上端与大气相通，下端与水银贮槽相通。袖带是一个外包布套的长方形橡皮囊，借橡皮管分别和检压计的水银槽及橡皮球相通。橡皮球是一个带有螺丝帽的球状橡皮囊，供充气和放气之用。近年来又有一种新型的电子血压计在临床上应用。 2．听诊法测量动脉血压 1）.受试者脱去右臂衣袖，取坐位，全身放松，右肘关节轻度弯曲，置于实验桌上，使上臂中心部与心脏位置同高。 2）．打开血压计，松开血压计橡皮球的螺丝帽，驱出袖带内残留气体，后将螺丝帽旋紧。 3）．将袖带平整、松紧适宜地缠绕右上臂，带下缘至少位于肘关节上2cm处，开启水银槽开关。 4）．将听诊器两耳器塞入外耳道，务必使耳器弯曲方向与外耳道一致。 5）．在肘窝内侧先用手触及肱动脉搏动所在部位，再将听诊器胸器不留缝隙地轻轻贴在上面。 6）．测量收缩压：挤压橡皮球将空气打入袖带内，使血压表上水银柱逐渐上升到听诊器听不到脉搏音为止，再继续打气使水银柱再升2.7~4.0kPa（20~30mmHg）。随即慢慢松开气球螺丝帽，徐徐放气，在观察水银柱缓缓下降的同时仔细听诊，在听到“崩”样第一声清晰而短促脉搏音时，血压表上所示水银柱高度即代表收缩压。 7）．测量舒张压：使袖带继续徐徐放气，这时声音先依次增强，后又逐渐减弱，最后完全消失。在声音突然由强变弱（或声音变调）这一瞬间，血压表上所示水银柱高度代表舒张压。也有人把声音突然消失时血压计上所示水银柱高度作为舒张压，若取后者，需另外0.67kpa（5 mmHg）较妥。 8）．血压记录常以收缩压/舒张压kPa表示，如收缩压、舒张压分别为14.70kPa（110mmHg）和9.33kPa（70mmHg），记为14.70/9.33kPa（110/70mmHg） 9）．列表记录你所测得同学的血压。 【注意事项】 1.所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。 2.A及B标准血清绝对不能相混，所用滴管上贴橡皮膏标明A及B、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面，竹签一端去混匀一侧就不能去接触另一侧。 3．室内务必保持安静，测量血压前需嘱受试者静坐放松，以排除体力活动及精神紧张对血压的影响。 4．袖带宽度应为12cm，袖带缠绕不能太紧或太松。听诊器胸器最好用膜型。安放时既不能压得太重，也不能接触过松，更不能压在袖带底下进行测定。 5．需要连续测定2~3次，取其最低值或平均值。重复测定时，袖带内压力必须降至零后再打气。 6．发现血压超过正常范围时，应将袖带解下，让受试者休息10min后再测。 7．血压计用毕应将袖带内气体驱尽、卷好、放置盒内，以防玻璃管折断；并关闭水银贮槽。 【思考】 1.在无标准血清情况下已如某人为A或B型，能否用其血去检查未知血型？如何作？ 2.正常男女成人的血压值范围是多少？你测得的同学血压值是否正常？ 3.试述哪些因素可影响血压的正确测定。 4.当袖带内充气达到一定压力后，放气速度为何不宜太快或太慢？