血液凝固与抗凝

null血液凝固与抗凝 Blood Coagulation and Anticoagulation血液凝固与抗凝 Blood Coagulation and Anticoagulation南华大学医学院机能学实验中心【目的与要求】 【目的与要求】 1、学习用玻片法测定凝血时间 2、观察家兔体外血凝、组织因子促凝和肝素抗凝过 程，并分析各个过程度产生机制南华大学医学院机能学实验中心null血液凝固可通过内源性凝血系统与外源性凝血系统两条途径 血液凝固受诸多因素,如pH、温度、与血液接触的物体表面的光滑程度、凝血物质浓度等多种因素的影响,从而导致血液凝固的时间发生改变，因此，可以血液凝固的时间为指标，观察不同因素对血液凝固的影响 【实验原理】 南华大学医学院机能学实验中心null凝血时间【观察指标】南华大学医学院机能学实验中心【实验方法与步骤】【实验方法与步骤】1．实验前准备 （1）玻片准备：取干净、干燥的玻片3块，编号，放入水浴恒温箱的试管架上，加温至37 ℃。注意不要弄湿玻片 （2）动物准备：兔称重，20%乌拉坦静脉注射麻醉；背位固定，行颈总动脉分离术和插管术（暂不放血）南华大学医学院机能学实验中心null（3）按表1要求，用5ml注射器往玻片上滴加1滴相应的试剂。注意每加完一种试剂后更换注射器。 表1 肺组织浸液、肝素对玻片法凝血时间的影响南华大学医学院机能学实验中心null2．凝血时间测定和记录时间 （1） 取干净干燥小试管1个，迅速放入动脉血2ml（注意：经动脉插管放血时，第一滴已激活的血液弃掉） （2）取血后，立即用5ml注射器（安装7号针头）抽取血液少许，向每块玻片的试剂上加入等量的2滴血液，用大头针混匀（注意不要混淆），立刻计时（注意首先记录1号玻片的凝血时间） （3） 每隔10秒，用大头针朝一个方向挑血液，看有无血丝，见到第一个血丝的出现，立即终止计时。从开始计时到终止计时的一段时间即为玻片法的凝血时间。将该时间记录到表1中，比较三块玻片凝血时间的差异南华大学医学院机能学实验中心【注意事项】【注意事项】1、所用玻璃器皿要求干净、干燥 2、专用试剂、大头针和注射器不要混淆 3、计时要耐心、细心、准确。因为第一个凝血丝的出现是瞬间的 南华大学医学院机能学实验中心 【分析讨论】 【分析讨论】一、血液凝固的概念 血液凝固是血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状 态的过程。是凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血 酶最终使可溶性纤维蛋白原变成不可溶性纤维蛋白的过程南华大学医学院机能学实验中心null二、血液凝固的三个阶段和两条途径 三个阶段：凝血酶原酶复合物的形成；凝血酶原的激活； 纤维蛋白的生成 两条途径：内源性途径（异物）、外源性途径（组织因子）南华大学医学院机能学实验中心null1、1号玻片 肺组织浸液 凝血时间最短： （1）肺组织浸液中含有组织因子。组织因子与FVII结合并激活FVII，TF-FVIIa复合物和磷脂、钙共同作用下激活FX，启动外源性凝血 （2）玻片对于血液是带负电荷的异物，当血液与玻片接触时，FXII结合到异物表面，并被激活为FXIIa，FXIIa再激活FXI，启动内源性凝血途径南华大学医学院机能学实验中心三、凝血时间的比较及机制分析null2、2号玻片 生理盐水 凝血时间第2： 生理盐水无促凝和抗凝作用。血液凝固是由于血液与 玻片接触，FXIIa被激活，启动内源性凝血途径 3、3号玻片 肝素溶液 凝血时间最长： 肝素具有抗凝作用。其机理： （1）抑制凝血因子。与抗凝血酶Ⅲ结合，使之与凝血酶的亲合力与过程增强，对FXⅡa-FⅠXa的抑制作用也增强 （2）促凝血酶灭活。与肝素辅助因子Ⅱ结合，使凝血酶灭活加快 （3）抑制血小板黏附、聚集、释放凝血酶功能南华大学医学院机能学实验中心【复习思考题】【复习思考题】 在肺组织浸液促进血凝块出现后立即加入肝素溶液1滴，仔细观察兔凝血块是否能溶解？为什么？南华大学医学院机能学实验中心