一起细菌性痢疾暴发疫情病原学检测

一起细菌性痢疾暴发疫情病原学检测 对洋县某小学发生的一起腹泻暴发疫情进行病原菌检测。方法 参照有关国家对可疑食品、饮用水及患者的肛拭子进行病原菌检验。结果 从4份患者肛拭子中检出志贺菌。结论 这是一起由福氏志贺菌引起的痢疾暴发疫情。 2007-02-19/26，汉中市洋县一小学61名学生先后出现发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状，经流行病学调查、实验室检测并结合临床症状分析，确认是一起由福氏2b型志贺菌引起的细菌性痢疾暴发疫情，现将情况如下。 1．流行病学调查 1．1 基本情况 该校共有学生517人，分10个班，有教职工26人。自2007-02-19起陆续有学生出现发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状， 截止2月26日共计发病61人，分散在各班，均为学生，其中男生28例，女生33例，在校就餐者49人，在家就餐者12人，年龄最小7岁，最大14岁。 1．2 临床现 起病急，以发热、腹痛、腹泻、粘液脓血便、里急后重为主要临床表现，体温最高达40 ℃，每日大便次数3至10次，血常规白细胞及中性粒细胞升高，大便镜检有大量脓细胞，抗生素治疗效果显著。 2．实验实检验 2．1 标本 可疑食品5份，水样2份（1份为学校饮用水源水，1份为学校饮用水），发病学生肛拭子4份。 2．2 材料 GN、SC、三糖铁琼脂、营养琼脂、乳糖蛋白胨培养基、EC培养基、肠道菌增菌肉汤、伊红美兰琼脂、麦康凯琼脂、氧化酶试纸，微量生化管均由杭州微生物试剂厂提供，志贺菌20种诊断血清由兰州生物制品研究所提供，均在有效期内使用。 2．3 检测项目和依据 依据GB/T4789-2003《食品卫生微生物学检验》[1]、《卫生防疫细菌检验》[2]及《生活饮用水卫生规范》2001版[3]对所采标本进行沙门菌、志贺菌和致泻性大肠埃希菌的检验，可疑食品和水样增加常规细菌学指标（菌落总数、大肠菌群、粪大肠菌群）的检验。 2．4病原学分离鉴定 2．4．1 分离培养 将肛拭样品直接划线接种于SS和麦康凯平板，同时将肛拭和可疑食品于GN.SC和肠道菌增菌肉汤中增菌后，再接种于SS和麦康凯平板，将2份水样接种于10倍浓缩的缓冲蛋白胨（PBP）增菌液中，于37 ℃培养4～6h后转种SS和麦康凯平板，37 ℃24h培养后，在SS和麦康凯平板上可疑菌为中等大小、圆形、凸起、湿润、无色半透明的菌落。 2．4．2 染色镜检 为G-短小杆菌，无芽胞。 2．4．3 生化试验 挑取可疑菌落转种三糖铁琼脂斜面，经37 ℃24h培养，上层变红，下层变黄，不产气，硫化氢阴性，其他生化反应结果为葡萄糖、甘露醇为阳性，其余氧化酶、VP、枸椽酸盐、赖氨酸、鸟氨酸、尿素、动力、水杨素和5%乳糖均为阴性。 2．4．5 血清学试验 用志贺菌属诊断血清做血清凝集，结果志贺菌属4种多价血清、福氏志贺多价、福氏志贺Ⅱ型、福氏志贺群7均发生凝集（++），生理盐水对照不凝集（-），其他福氏型、群血清均不发生凝集（-），此血清型为福氏2b型志贺菌，经陕西省疾控中心鉴定，结果相符。 2．4．6 结果 经过以上的分离培养、细菌形态、生化反应及血清学试验，从4份肛拭中检出血清型相同的志贺菌，5份可疑食品和2份水样未检出致病菌，2份水样的卫生细菌学检验结果基本一致，菌落总数为1.1×104 cfu/ml,大肠菌群大于1600MPN/100ml，粪大肠菌群大于1600 MPN/100ml，以上3项指标均严重超标，显示水源细菌污染严重。 3．讨论 通过现场流行病学调查、临床症状及实验室检验结果，依据 GB16002-1995《细菌性痢疾、阿米巴痢疾诊断标准及处理原则》确认此次疫情是一起由福氏2b型志贺菌引起的细菌性痢疾。暴发的主要原因是学校饮用水受到细菌污染。调查发现该小学饮用水源井位于校门前河道边，水井口距河床不足一米，水位与河水基本持平，附近人蓄粪便及生活垃圾直接排入河道，水源周围无任何防护，本学期2月15日开学，正逢枯水期，水源在放假期间一直未用，开学后对水源及二次供水塔无任何消毒措施，学校不供应开水，学生存在饮生水现象，开学后第4d即出现腹泻病例，由于教职工个人卫生意识较强，无饮用生水习惯，本次无人发病。 在实验中发现:肛拭子直接分离培养检出率高于通过增菌培养检出率。这可能在病人急性期肠道内病原菌大量繁殖而正常菌群受到影响，从而直接划皿分离培养的病原菌呈优势生长；而GN增菌液的抑制性不强，通过GN 长时间增菌肠道非致病菌可能大量繁殖使非致病菌在平板上呈优势生长，故增菌时间不宜过长，以4～6h为宜。 由于细菌性痢疾是一种潜伏期短，主要通过粪-口途径传播的急性肠道传染病，人类对志贺氏菌较易感，少至200个菌就可发病[5]。学校是易感人群较集中的地方，也是传染病流行的场所。为了杜绝此类事件的发生，建议有关部门今后应做好以下工作：① 学校应尽快找到新的水源并建造新的水源设施，保证学生饮水安全；② 当地政府部门应做好垃圾、粪便的无害化处理，防止河流污染；③ 教育部门应加强学校基础设施建设，增加饮水消毒设施，安装开水炉及龙头，同时加强健康教育宣传等活动，增强学生的健康意识；○4卫生部门要加强监督检查，严格食品卫生和生活饮用水卫生，防止病从口入，切实保护广大学生的身体健康。