实验一 从红辣椒中分离红色素

实验一 从红辣椒中分离红色素 一．实验目的 1．   学习用薄层色谱和柱色谱方法分离和提取天然产物的原理。 2．   复习柱色谱的操作方法。  预学习视频 lab14_薄层色谱 和 lab15_柱色谱 二．实验原理  红辣椒含有多种色泽鲜艳的天然色素，其中呈深红色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和少量 辣椒玉红素脂肪酸酯所组成，呈黄色的色素则是 －胡萝卜素。   辣椒红脂肪酸酯   辣椒玉红素脂肪酸酯 这些色素可以通过色谱法加以分离。本实验以二氯甲烷作萃取剂，从红辣椒中提取红色 素。然后采用薄层色谱分析，确定各组分 Rf 的再经柱色谱分离，分段接收并蒸除溶剂，即 可获得各个单组分。  三．实验装置 四．实验试剂与器材 试剂：干燥红辣椒、二氯甲烷、硅胶 G（200~300 目）、沸石。 器材：圆底烧瓶、球形冷凝管、布氏漏斗、吸滤瓶、广口瓶、3cm×8cm 薄板、点样毛细管、 色谱柱、锥形冷凝管。  五．实验步骤 1）在 50mL 圆底烧瓶中，放入 1g 干燥并研碎的红辣椒和 2粒沸石，加入 10ml 二氯甲烷，装 上回流冷凝管，加热回流 20min。待提取液冷却至室温，过滤，除去不溶物，蒸发滤液，收 集色素混合物。 2）以 200ml 广口瓶作薄板色谱槽、二氯甲烷作展开剂。取极少量色素粗品置于小烧杯中， 滴入2~3滴二氯甲烷使之溶解，并在一块硅胶G薄板上点样，然后置入色谱槽进行色谱分离。 计算各种色素的 Rf值。 3）在 1.5cm 的色谱柱中，装入硅胶 G 吸附剂，用二氯甲烷作洗脱剂，将色素粗品进行柱色 谱，收集各组分流出液，浓缩各组分，得到各组分产品。  六、注意事项 1.        红辣椒要干且研细。 2.        硅胶 G 薄板要铺得均匀，使用前活化充分。 3.        色谱柱要装结实，不能有断层。  七、实验结果与讨论  通过薄层色谱可得到各组分的 Rf值，再通过柱色谱，分段浓缩可得到不同的组分。  八、思考题 1.        硅胶 G 薄板失活对结果有什么影响？ 2.        点样时应该注意什么？点样毛细管太粗会有什么后果？ 3.        如果样品不带色，如何确定斑点的位置？举 1~2 个例子说明。