GB 29943-2013食品添加剂 棕榈酸视黄酯(棕榈酸维生素A)

中华人民共和国国家标准 GB 29943—2013 2013-11-29发布 2014-06-01实施 食品安全国家标准 食品添加剂 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A） GB 29943—2013 1 CH 3 CH3 CH 3 O CH 3 CH 3 O C 15 H 31 食品安全国家标准 食品添加剂 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素 A） 1 范围 本标准适用于以醋酸维生素 A（或 β-紫罗兰酮）和棕榈酸为主要原料，经加工制得的食品添加剂棕榈 酸视黄酯（棕榈酸维生素 A 或维生素 A 棕榈酸酯）。 2 化学名称、分子式、结构式和相对分子质量 2.1 化学名称 3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-基)-2,4,6,8-壬四烯-1-棕榈酸酯 2.2 分子式 C36H60O2 2.3 结构式 2.4 相对分子质量 525.09（按2007年国际相对原子质量） 3 技术要求 3.1 感官要求 感官要求应符合表 1 的规定。 表 1 感官要求 项 目 要 求 检验方法 色泽 淡黄色至黄棕色 取适量试样置于白瓷点滴板上，在自然光 线下，观察其色泽和状态 状态 油状液体（低温时可固化） 3.2 理化指标 理化指标应符合表 2的规定。 GB 29943—2013 2 表2 理化指标 项 目 指 标 检验方法 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素 A）含量 a/（IU/g） ≥ 5×105 附录 A 中 A.4 酸值（以 KOH 计）/（mg/g） ≤ 2.0 附录 A 中 A.5 过氧化值/（meq/kg） ≤ 10.0 GB/T 5538 铅（Pb）/（mg/kg） ≤ 2 GB 5009.12 注：商品化的棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素 A）产品应以符合本标准的棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素 A）为原料，可添加 符合相关食品质量规格要求的食用植物油、淀粉、糊精、蔗糖、抗氧化剂、抗结剂、增稠剂等辅料而制成。 a维生素 A 以维生素 A 醇当量或国际单位（IU）表示，1μg 维生素 A 醇当量=3.33 IU。棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素 A） 实际含量为标示量的 95.0%~110.0%。 GB 29943—2013 3 附录 A 检验方法 A.1 操作提示 试样应在密闭、避光和不超过25℃条件下贮存。配制的试样溶液应尽快使用，建议在2 h内使用。试样 中如出现结晶，可在65℃条件下混匀，但加热时间不宜过长。含量测定过程中，应最小程度地接触光和空气 中的氧及其他氧化剂，使用低光化玻璃仪器。 A.2 一般规定 本标准除另有规定外，所用试剂的纯度应在分析纯以上，所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、 制剂及制品，应按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备，实验用水应符合GB/T 6682-2008中三级水 的规定。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 A.3 鉴别试验 A.3.1 试剂和材料 A.3.1.1 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）对照品。 A.3.1.2 环己烷溶液：每升环己烷中含1 g二丁基羟基甲苯。 A.3.1.3 展开剂：环己烷+乙醚（4+1）。 A.3.1.4 色谱用硅胶板。 A.3.2 分析步骤 A.3.2.1 试样溶液的制备 称取适量试样，用环己烷溶液配制成每毫升中约含3.3 IU棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）的试样溶液。 A.3.2.2 对照溶液的制备 称取适量棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）对照品，用环己烷溶液配制成每毫升中约含3.3 IU棕榈酸视 黄酯（棕榈酸维生素A）的对照溶液。 A.3.2.3 薄层色谱分析 分别量取试样溶液和对照溶液各3 μL，于色谱用硅胶板上分别点样后置于盛有展开剂的层析缸中，展 开至溶剂前沿距原点超过15 cm，取出硅胶板，晾干，在紫外灯下（波长254 nm处）观察。试样溶液显示 的主斑点应与对照溶液所显示主斑点的位置一致。 A.4 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）含量的测定 A.4.1 试剂和材料 A.4.1.1 戊烷。 A.4.1.2 异丙醇：色谱纯。 GB 29943—2013 4 A.4.1.3 甲醇：色谱纯。 A.4.1.4 水：GB/T 6682-2008中的一级水。 A.4.1.5 异丙醇溶液：每升异丙醇中含1 g二丁基羟基甲苯。 A.4.1.6 四丁基氢氧化铵溶液：0.1 mol/L，以异丙醇为溶剂配制。 A.4.1.7 全反式醋酸维生素A标准品：按A.4.3.1紫外分光光度法测定标准品中醋酸维生素A的含量。在测 定过程中，用全反式醋酸维生素A标准品作为试样，试样溶液的最大吸收峰应在326 nm附近，且吸光度比 值Aλ/ A326符合表A.1的要求。 A.4.2 仪器和设备 A.4.2.1 紫外分光光度计。 A.4.2.2 高效液相色谱仪，配紫外检测器（检测波长326 nm）。 A.4.3 分析步骤 A.4.3.1 紫外分光光度法 A.4.3.1.1 方法提要 维生素A分子中含有5个共轭双键，在波长326 nm附近具有最大吸收峰，其最大吸收峰的位置随溶剂不 同而异，因而可用于含量测定。 A.4.3.1.2 试样溶液的制备 称取试样25 mg~100 mg，精确至0.001 g，加入5 mL戊烷，并用异丙醇稀释配制成每毫升含10 IU ~15 IU 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）或醋酸维生素A的试样溶液。 A.4.3.1.3 测定 取适量试样溶液，采用紫外分光光度法验证试样溶液的最大吸收峰是否在326 nm附近。如果试样溶液 的最大吸收峰在326 nm附近，则测定试样溶液在波长300 nm、326 nm、350 nm和370 nm处的吸光度，并计 算不同波长下的吸光度Aλ与326 nm处吸光度A326之比Aλ/ A326。 如果不同波长的吸光度比值符合表A.1的要求，则按A.4.4结果计算中的公式（A.1）计算试样中棕榈酸 视黄酯（棕榈酸维生素A）或醋酸维生素A的含量。 如果试样溶液的最大吸收峰不在326 nm附近，或者吸光度比值有一项或多项不符合表A.1的要求，则 应按A.4.3.2液相色谱法测定含量。 表A.1 不同波长的吸光度比值 吸光度之比 指标 A300/A326 ≤0.60 A350/A326 ≤0.54 A370/A326 ≤0.14 A.4.3.2 液相色谱法 A.4.3.2.1 方法提要 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）在四丁基氢氧化铵的作用下，水解为维生素A醇，注入反相色谱柱 上，用流动相洗脱分离，紫外检测器测定，外标法计算棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）含量。 A.4.3.2.2 参考色谱条件 GB 29943—2013 5 A.4.3.2.2.1 色谱柱：Ｃ18液相色谱柱，125 mm×4 mm，粒径5 μm，或同等性能的色谱柱。 A.4.3.2.2.2 流动相：甲醇∶水＝95∶5（体积比）。 A.4.3.2.2.3 流速：1 mL/min。 A.4.3.2.2.4 检测波长：325 nm。 A.4.3.2.2.5 进样量：10 μL。 A.4.3.2.2.6 保留时间：维生素A醇的保留时间约为3 min。 A.4.3.2.3 试样溶液的制备 称取约0.1 g试样，精确至0.0001 g，置于100mL容量瓶中，用5 mL戊烷迅速溶解。加入40 mL四丁基氢 氧化铵溶液。轻轻振摇，让混合液在60℃~65℃下水解反应10 min（可采用水浴超声处理）。冷却至室温， 用异丙醇溶液稀释至100 mL，轻摇混匀防止产生气泡，得到试样储备液。移取适量试样储备液，用异丙醇 稀释配制成每毫升约含100 IU棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）的试样溶液。 A.4.3.2.4 标准溶液的制备 称取适量全反式醋酸维生素A标准品（称样量约含1×105 IU全反式醋酸维生素A），精确至0.000 1 g， 置于100 mL容量瓶中，用5 mL戊烷迅速溶解。加入40 mL四丁基氢氧化铵溶液。轻摇混匀，让混合液在60℃ ~65℃下水解反应10 min（可采用水浴超声处理）。冷却至室温，用异丙醇溶液稀释至100 mL，轻摇混匀 防止产生气泡，得到标准储备液。 移取5.0 mL标准储备液，置于50 mL容量瓶中，用异丙醇稀释定容至刻度，得到标准溶液。 A.4.3.2.5 测定 在A.4.3.2.2参考色谱条件下，分别对试样溶液和标准溶液进行测定，重复进样两次，分别记录相应色 谱图中维生素A醇的峰面积值。按A.4.4结果计算中的公式（A.2）计算试样中棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素 A）的含量。 A.4.4 结果计算 A.4.4.1 紫外分光光度法 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）或醋酸维生素A含量w1以国际单位每克（IU/g）计，按公式（A.1） 计算： 100 1900326 1    m VA w ……………………（A.1） 式中： A326——试样溶液在326 nm处的吸光度； 1900——棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）或醋酸维生素A的吸光度与含量之间的换算系数； V——试样溶液的稀释体积，单位为毫升（mL）； m——试样的质量，单位为克（g）； 100——换算系数。 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不 大于算术平均值的2 %。 A.4.4.2 液相色谱法 GB 29943—2013 6 棕榈酸视黄酯（棕榈酸维生素A）含量w2以国际单位每克（IU/g）计，按公式（A.2）计算： 12 21 2 mA mcA w    ……………………（A.2） 式中： A1——试样溶液色谱图中维生素A醇的平均峰面积值； c——用A.4.3.1紫外分光光度法测得的全反式醋酸维生素A标准品的含量，单位为国际单位每克 （IU/g）； m2——全反式醋酸维生素A标准品的称样量，单位为毫克（mg）； A2——标准溶液色谱图中维生素A醇的平均峰面积值； m1——试样的质量，单位为毫克（mg）。 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不 大于算术平均值的10 %。 A.5 酸值的测定 A.5.1 试剂和材料 A.5.1.1 无水乙醇。 A.5.1.2 石油醚。 A.5.1.3 氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液：c（KOH）=0.1 mol/L。 A.5.1.4 酚酞指示液：10 g/L。 A.5.2 分析步骤 准确称取约2 g试样，精确到0.001 g，溶于50 mL由等体积无水乙醇和石油醚组成的混合溶剂中（该混 合溶剂预先用氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液滴定至中性），若试样不能完全溶解，则加热到约90℃以确保试 样完全溶解。加入0.5 mL酚酞指示液，立即用氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液滴定，滴定至溶液呈淡粉色并维 持30 s不褪色即为滴定终点。 A.5.3 结果计算 酸值（以KOH计）w3以毫克每克（mg/g）计，按公式（A.3）计算： m McV w  3 …………………………（A.3） 式中： V——试样所消耗氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL）； c——氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液的实际浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； M——氢氧化钾的摩尔质量，单位为毫克每毫摩尔（mg/mmol）[M（KOH）=56.1]； m——试样的质量，单位为克（g）。 实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不 大于算术平均值的5 %。