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鳖甲的品种与鉴别研究

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鳖甲的品种与鉴别研究 2005年第23卷第2期 V01.23,No.2,2005 四 91l 中 医 JournalofSichuanof7IhditionalChineseMedicine · 35· ●药 苑● 鳖甲的品种与鉴别研究 卢先明 刘咏松 曾俊超 吴大章 庚 玲 成都中医药大学(四川成都610075) 摘要:对所收集到的8种样品中能够定种的中华鳖、平鳖、斑鳖和缘板鳖等4种鳖的背甲进行了 性状、薄层、紫外鉴别,为鉴别鳖甲的品种状况提供了依据,也为其它品种的药用提供了一定的参 考。 关键词:鳖甲 品种TLC鉴别紫外光谱 ...
鳖甲的品种与鉴别研究
2005年第23卷第2期 V01.23,No.2,2005 四 91l 中 医 JournalofSichuanof7IhditionalChineseMedicine · 35· ●药 苑● 鳖甲的品种与鉴别研究 卢先明 刘咏松 曾俊超 吴大章 庚 玲 成都中医药大学(四川成都610075) 摘要:对所收集到的8种样品中能够定种的中华鳖、平鳖、斑鳖和缘板鳖等4种鳖的背甲进行了 性状、薄层、紫外鉴别,为鉴别鳖甲的品种状况提供了依据,也为其它品种的药用提供了一定的参 考。 关键词:鳖甲 品种TLC鉴别紫外光谱 中图分类号:R282.5文献标识码:B 文章编号:1000.3649(2005)02.0035.02 鳖甲始载于《神龙本草经》。经品种考证明本 品来源为鳖科动物中华鳖TrionyxsinensisWiegmmm的 背甲。本品具有滋阴潜阳、软坚散结、退热蒸的功 效,现为《中华人民共和国药典》1995年版所收载。 《中国药用动物志》增加山瑞鳖Trionyxsteindachneri Siebenrockr的背甲为鳖甲另一品种11J。由于此种鳖甲 (正品)需求量大,而我国鳖科动物种类少、数量不 多,加之资源破坏较严重,以致正品鳖甲药源紧缺。 周边国家如缅甸、越南、马来西亚等的鳖甲也因此 流入我国,致使鳖甲品种增多。近十多年来除正品 有较全面鉴别的研究报道外,其它常见品种多侧重 于性状鉴别,未见紫外光谱和薄层鉴别的报道。为 此,我们将所收集的8种样品中,对能够鉴定其动 物来源的3个品种(其中一种未见报道)与正品鳖 甲作对照,从性状、紫外和薄层三方面进行了鉴别。 其目的是要找出其它品种与正品之间、其它品种相 互之间的主要区别特征,为今后鉴别鳖甲的不同品 种提供依据。 1材料来源 从成都五块石中药材市场上购得4种样品,依 据有关资料[1“】初步鉴定其品种来源,经中国科学院 成都生物研究所两栖爬行动物室核对标本,再经四 川省药品检验所黎跃成的核定,4种样品动物来源, 依次为:中华鳖TfionyxsinensisWiegmann和平鳖Do. ganiasubplarm(Geoffroy)、斑鳖Rafetusswinhoei (Gray)、缘板鳖Lissemyspunctatascutata(Scchoepff) 2实验仪器与药品 2.1仪器上海绘普7530型分光光度计、超声波提 取器,以及薄层层析等常用玻璃器nn。 2.2药品y2.试剂分析纯薄层硅胶G(60型)、甲 醇(AR)、正丁醇(AR)、冰醋酸(AR)、5%R的茚 三酮的正丁醇溶液、0.5%CMC—Na溶液以及薄层对 照精氨酸、甘氨酸(购于四川省药品检验所)。 3方法与结果 3.1性状鉴别 中华鳖甲(正品)呈卵圆形,背面 略隆起,长10~20cm,宽7—15cm,背面灰褐色或墨 绿色,有突起的灰黄色或灰白色蠕虫纹。背甲中央 有纵列的椎板7~8枚,第一对肋板间仅有1枚椎板, 长大于宽,两侧各有8条横向肋板横凹缝。肋板发 达,第一对肋板外缘小于内缘,最后一对直接连接 成中缝。腹面类白色,中央有突起脊柱,两侧各有 肋骨8条,伸出边缘2~3cm。前端颈骨突起呈玉簪 [7]李磊,周健华,冯箐,等.糖肾停治疗糖尿病肾病[J]. 中医药信息,2000,(6):35~36 [8]刘从明,何金霞.辨证治疗糖尿病肾病临床观察[J].内 蒙古中医药,1996,(2):4~5 [9]Ⅲ冯健春,倪青.时振声教授治疗糖尿病肾病经验述要 [J].辽宁中医杂志,1996,23(12):534~535 [1们杨霓芝,李芳,徐大基,等.糖尿病肾病分期辨证治疗 的探讨[J].辽宁中医杂志,1996,26(1):16~17 [11]吕贵德.辨证论治糖尿病肾病38例疗效观察[J].河北 中医,2002,24(2):103—104 [12]冯健春,倪青.糖肾胶囊治疗糖尿病肾病的临床研究 [J].中国中西医结合杂志,2000,20(3):212.214 [13]张国山。陆连芬.益肾活血方治疗糖尿病肾病100例临 床研究[J].天津中医,2000,17(3):17。18 [14]赵聚宾,薛玉风,夏欣,等.降糖圊肾汤治疗糖尿病肾 病的疗效观察[J].河北中医,2000,22(11):811~812 [15]张泽生,袁遵宇,杨新军,等.益肾扶脾化瘀降浊法治 疗糖尿病肾病“例的临床疗效观察[J].新中医,2001,33(11): 36~37 [16]周旭生.加减藿朴夏苓汤治疗糖尿病肾病32例[J].吉 林中医药,2003,23(2):16 [17]杨益芳.葛根素注射液治疗50例糖尿病肾病的疗效观察 [J].泸州医学院学报,2003,26(1):54—55 [18]冯玉芳,张绍荣,任明芬,等.川芎嗪治疗糖尿病肾病 的近期疗效[J].临床荟萃,1999,14(2):77—78 [19]张继红.黄芪注射液治疗糖尿病肾病的研究[J].中国 慢性病预防与控制,2000,8(4):188—189 [20]宋怀芳.复方丹参治疗23例糖尿病肾病的临床观察[J]. 南京中医学院学报,1994,10(2):14—15 [21]王悦芳.黄芪注射液配合丹参注射液治疗糖尿病肾病的 临床观察[J].临床荟萃,2002,17(21):1280~1281 (收稿日期2004.09—17) 万方数据 ·36· 四 川 中 医 JournalofSiehuanofTraditionalChinesel-ledieine 2005年第23卷第2期 V01.23,No.2,2005 状,质坚硬,气微腥、味咸。 其它品种与正品不同的是:(1)平鳖甲:椭圆 形,扁平状,长23~27cm,宽22~26era。肋板8对, 被椎板完全分隔,第一x,J肋板#1-缘最窄。(2)斑鳖 甲:长椭圆形,长10~30era,宽8~20era,背甲有一 条显著的脊棱,两侧的肋板上各有3~4条长短不一 的纵脊。椎板8枚,纵贯脊背中央,将8对肋板分隔 于椎板两边,第8对肋板退化而小。8对肋骨明显伸 出边缘达4—5era,呈钉耙状。(3)缘板鳖甲:倒卵 圆形,猴脸状。长15—23em,宽14~17era,背面明 显隆起,乌绿褐色,密布颗粒状突起。第l对肋板 间有2枚椎板。前肋板最大,最后一对肋板的中缝 最长。8对肋骨不伸出边缘。腹面前端颈骨突起呈蝴 蝶状。 通过以上比较,可以准确地把4种鳖甲区分开。 3.2紫外光谱鉴别在这4种样品的同一部位(最 后1对肋板处取一小块,分别研成粉末,并取样品 0.059于三角瓶中,各加入甲醇30ml,密塞,振摇5 分钟,在室温下静置过夜,滤过,取滤液以甲醇作 空白对照,在200~300nm内测定各种样品的紫外吸 收曲线,找出它们各自的吸收峰。其结果见附图。 从附图可以看出:其它3个品种与正品鳖甲在 208.6nm处有相同的吸收峰外,其它吸收峰均存在一 定差异:中华鳖甲的其它吸收峰出现在206.Onto、 207.2nm、210.4nm及210.8nm等处;平鳖甲的其它 吸收峰出现在209.Onto、210.2nm、211.6nm及 207.Onm等处;斑鳖甲的其它吸收峰出现在 209.4nm、207.6nm、206.2nm及210.8nm等处,而缘 板鳖甲的其它吸收峰出现在204.6nm、206.4nm、 207.6nm、及202.8nm等处。这些差异为鉴别鳖甲的 真伪提供了一定的依据。但是,若要把它们彼此完 全分开,须与性状鉴定相结合。 :l r.I.’J.一!⋯{k; l i 剪11 r气 I “ i\l } _.m ■■!II⋯}⋯ LJ-叱⋯:.、..t⋯‘-t黔 ■■■_.’]心;\;/2 : j ,一《一1炙一 ’ : .’ .』1 生 f i’ fK劢 -一3 旷’y— : 一≮篷营囊至:: 氐 附图4种鳖甲紫外吸收光谱图 1.中华鳖甲 2.平鳖甲 3.斑鳖甲4.缘板鳖甲 3.3薄层鉴别称取各样品粉末129,加甲醇36ml, 超声提取2h,滤过,浓缩至6ml,制成29/“的供试 液。取精氨酸、甘氨酸各0.2mg,加甲醇lml溶解, 制成0.2mg/ml的对照液。以上制备液密封备用。 自制硅胶G(60型)+0.5%CMC—Na厚纸 0.3mm的薄层板,105℃活化30rain,置干燥器内备 用。用供试液10肛l,对照液1肛l点于同一薄层板上, 以正丁醇:乙酸:蒸馏水=65:15:20为展开剂,预平 衡15rain,上行展开12cm。喷5%的茚三酮的正丁醇 溶液,105℃加热8min,然后置紫外灯(365nm)下 观察荧光。 薄层结果表明:(1)中华鳖甲在对照品精氨酸 相对应的位置处有相同紫红色斑点,其它3个品种 元此斑点,说明4种样品中只有中华鳖才含有精氨 酸。4种样品在对照甘氨酸相对应的位置有相同粉红 色斑点,说明4种样品都含有甘氨酸。(2)其它3个 品种在接近展开前沿处各有1个黄绿色荧光斑点, 而正品中华鳖甲无此斑点。 (3)在此展开系统中, 中华鳖甲斑点最多,有6个;斑鳖甲斑点最少,仅2 个;缘板鳖甲有3个斑点;平鳖甲有4个斑点。由此 可把正品鳖甲与其它3个品种区别开来。 4小结与讨论 在鉴别中发现:鳖甲的#1-形、大小、色泽及纹 理与其产地、年龄大小、存放时间长短有一定的关 系,在鉴别中仅作参考。 在紫外鉴别中通过列表可知它们具有相同的最 大吸收峰,但其它吸收峰有差异。说明通过紫外吸 收峰的测定,基本上可以将正品和其它品种区分开 来。但是,要把他们彼此完全分开,仍要借助于性 状鉴别。有此种现象的原因可能是样品中的干扰因 素太多,或者本身所含成分大体相同。对此,可以 直接用红外扫描从成分组成上进行区别。 在薄层鉴别过程中,经过反复实验证实本展开 系统分离效果最好,从薄层中可知4种样品含有甘 氨酸,只有中华鳖甲含有精氨酸,但不具有黄绿色 荧光斑点。同时各样品斑点的多少,可以作为区分 不同品种的参考。 鳖甲为常用中药用量较大,而市场上除正品外 其它品种较多,故应加强对鳖甲的鉴别研究。如微 量元素、氨基酸、粗多糖的测定,蛋白质电泳值的 测定,红外光谱扫描,PCR产物直接测定技术,以 及有关药效的比较研究等等。由此既可弄清鳖甲的 品种状况,也可从中找到与正品相似的品种,以扩 大鳖甲的药用资源。就本项研究而论,由于中华鳖 甲尚未发现有何特殊活性成分,故目前还不能排除 其它品种作中药鳖甲的可能。换言之,这些品种有 可能作为鳖甲新的药材资源。 参考文献 [1]《中国药用动物志》协作组.中国药用动物Ⅱ部[M].天 津:天津科学技术出版社,1983:300~302 [2]黎跃成,等.中药材真伪鉴别彩色图谱大全[M].成都: 四川科学技术出版社,1995:101~“2 [3]赵肯堂.蛇蛙研究丛(九):中国龟鳖研究[M].成 都:《四川动物》杂志编辑部总出版发行,1997:55~64 [4]王本祥.新编中药学辞典[M].天津:天津科学技术出 版社.19%:1379~1380 (收稿日期2004.10.29) 万方数据
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