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猪圆环病毒疫苗应用现状

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猪圆环病毒疫苗应用现状 主题策划 F EATURE 32 猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2011年 第11期 猪圆环病毒疫苗应用现状 张燕霞1,朱连德2 (1.中国动物卫生与流行病学中心,山东 青岛 266032;2.勃林格殷格翰动物保健,北京 100004) 猪圆环病毒病(PCVD)或称猪圆 环病毒相关性疾病(PCVAD)是主要 由猪 2 型圆环病毒(PCV2)引起的免 疫抑制性疾病,表现断奶后仔猪多系统 衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综 合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征 (PRDC)、繁...
猪圆环病毒疫苗应用现状
主题策划 F EATURE 32 猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2011年 第11期 猪圆环病毒疫苗应用现状 张燕霞1,朱连德2 (1.中国动物卫生与流行病学中心,山东 青岛 266032;2.勃林格殷格翰动物保健,北京 100004) 猪圆环病毒病(PCVD)或称猪圆 环病毒相关性疾病(PCVAD)是主要 由猪 2 型圆环病毒(PCV2)引起的免 疫抑制性疾病,现断奶后仔猪多系统 衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综 合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征 (PRDC)、繁殖障碍、仔猪心肌炎、增 生性和坏死性肺炎和中枢神经系统疾病 等。由于其对机体系统侵害的广泛性 摘 要:概述现有猪圆环病毒疫苗在中国猪场应用情况,以及进口、国产疫苗的特点、使用方法、免疫程序的制定、 疫苗效果评估方法以及疫苗的经济意义等,并展望猪圆环病毒疫苗的未来发展。 关键词:猪圆环病毒疫苗;中国猪场 和对猪体健康影响的持续性,进入 21 世纪后,越来越受到人们的重视;在 2010 年国际猪兽医大会(IPVS)上成 为关注度最高的疾病,是全球公认的危 害养猪业的重要疫病。目前在欧美国家 已鉴定出 3种基因型,分别为 PCV2a、 PCV2b 和 PCV2c(丹麦,无流行报道); 中国农业大学杨汉春教授研究发现, 中 国 存 在 PCV2a、PCV2b、PCV2d、 PCV2e 等基因型。调查显示,l997— 2003 年间,中国猪场中以 PCV2a 占主 导,而自 2004 年后,PCV2b 则越来 越普遍,认为 PCV2b 的毒力更强,是 造成当前 PCVD广泛流行的主要毒株。 在过去近 10 年的时间里,人们通过改 善饲养环境、提高饲料质量、加强生物 安全、添加中药等免疫增强剂提高 免疫力、大量使用抗生素降低继发感染 主题策划 FEATURE 主题策划 F EATURE 33 2011年 第11期 SWINE INDUSTRY SCIENCE 猪业科学 的危害等措施减少 PCV2 感染带来的经 济损失。不断地与PCVD艰难地抗争着, 但并没有因此而获得明显的效果。疫苗 的研制成功并于 2006 年开始在北美应 用,给全球养猪业带来了福音;2009 年 勃林格猪圆环病毒疫苗在中国首家注册 成功和 2010 年第一个上市,及 2010 年 下半年国产疫苗的陆续上市,为中国养 猪业与 PCVD 决战准备了强有力的武 器。疫苗免疫,是控制PCVD的最直接、 最有效手段,安全有效的猪圆环病毒疫 苗的成功应用,必将开启中国养猪新时 代的到来。 1  猪圆环病毒疫苗市场 PCV2 病毒有 11 个开放阅读框 (O R F),0RFl 编码两种复制酶蛋白, 参与病毒复制;ORF2 编码核衣壳蛋白, 是病毒主要的免疫原性蛋白;0RF3 编 码一种小分子量蛋白,与 PCV2 诱导的 细胞凋亡作用相关,其它 O R F 的功 能目前尚不清楚。目前的亚单位疫苗就 是将 PCV2 基因组中编码免疫原性蛋 白的 O R F2 片段插入到昆虫杆状病毒 中,通过培养昆虫杆状病毒而快速、大 量获得具备免疫原性的 PCV2 核衣壳蛋 白,再将其制备成疫苗。如勃林格殷格 翰动物保健(美国)有限公司的 FLEX 系列茵格发猪圆环病毒疫苗和英特威 /先灵葆雅动物保健公司的 PCV2 疫 苗。还有一种是嵌合病毒灭活苗,原 理是用 PCV2 的 O R F2 片段置换不致 病的 PCVl 中的 0RF2 片段,即获得了 PCVl-PCV2 嵌合病毒,具有与 PCV2 类似的免疫原性。富道动物保健公司研 制的 PCV2 疫苗(已被辉瑞收购)即是 采用了这种技术。全病毒 PCV2 灭活疫 苗,由于 PCV2 难培养、生长慢及难 灭活,培养成本高,生产周期长,所以 多数动物保健公司采用成熟的分子生物 技术生产亚单位疫苗。目前在国外只有 梅里亚动物保健公司生产全病毒灭活疫 苗,适用于母猪免疫。 已经注册的国产圆环病毒疫苗均为 全病毒灭活疫苗。分别由哈尔滨兽医研 究所用 LG株、南京农业大学用 SH株 研制而成。由哈尔滨维科生物技术开发 公司 、上海海利生物药品有限公司生 产出猪圆环病毒 2型 LG株全病毒灭活 疫苗;由洛阳普莱柯生物工程有限公司、 江苏南农高科技股份有限公司生产出猪 圆环病毒 2 型 SH 株全病毒灭活疫苗。 以上全病毒培养物在灭活前的病毒含量 约 105.5-6.0 TCID 50 /mL。应用的灭活剂 为甲醛溶液(福尔马林)。在国际上应 用 PK-15 传代细胞培养 PCV2 的最高 含量很难超过 103.5 TCID 50 /mL,而国 内应用微载体细胞悬浮培养技术,使抗 原效价提高了 100 多倍。抗原蛋白纯化 是减少疫苗过敏反应的重要一环,国产 疫苗亟待提高纯化工艺,以达到无超量 杂质蛋白。水性佐剂要比矿物油佐剂疫 苗对机体的刺激性小,副反应小。 国 产疫苗应用的佐剂都含有一定量的矿物 油,如进口双相复乳佐剂(W/O/W), 以及双重佐剂(hygivant)等。疫苗 免疫保护期为 3- 4 月,贮存有效期为 12 - 18 月。 目前注册的进口猪圆环病毒疫 苗,FLEX 系列茵格发猪圆环病毒疫 苗,是具有纯化蛋白抗原的水性佐剂 的亚单位灭活疫苗。其关键的 PCV2 蛋白 (ORF2) 由非致病性杆状病毒的 表达系统产生,经独有的纯化工艺将 ORF2 与非特异性蛋白分离,形成形 态、大小与活病毒相同的、具有高度 免疫原性的纯化抗原(Purified Circo Antigen, PCATM )。抗原不用甲醛溶液 灭活。抗原 PCATM 与专利佐剂茵培莱 Impran FLEXTM(多聚纤维形成海绵 状基质)交互联接,具有缓慢释放抗原 的效果。免疫机体后产生快速、高效和 持久的免疫反应,非常安全、非常稳 定,并具有卓越的通针性。每头份抗原 含量用相对效力表达,每头份相对效力 ≥ 1.0。免疫后未见机体不良反应。商 品猪群只免疫一针,免疫保护期 4个月 以上。疫苗保存有效期 24 个月,该产 品是目前所有猪圆环病毒疫苗中唯一的 单针疫苗,具有抗原缓释效果,应用时 不必加强免疫。 据锐奇数据中心(郑楚雄)从 2010 年 12 月 1 日 -31 日, 对 上 千 个养猪场调查发现,目前使用圆环病 毒疫苗的猪场所占比例是 20%,大约 70% 的猪场会考虑将来使用。其中对 211 个使用圆环病毒疫苗的猪场调查了 解到,FLEX 系列茵格发猪圆环病毒疫 苗的使用比例达到 31%,其次是洛阳 普莱柯(23%),上海海利(19%),南 农高科(5%),还有其他试用产品和走 私产品。 在 501 ~ 1 000 头存栏母猪的 54 个使用圆环病毒疫苗的猪场中,使用 国产疫苗的猪场有 36 个,使用进口疫 苗的有 18 个;在 1 001 ~ 2 000 头存 栏母猪的 10 个猪场中,有 6 个猪场使 用国产疫苗和 4 个猪场使用进口疫苗; 在 2001 头以上存栏母猪的 20 个猪场 中,其中 14 个使用进口疫苗,6 个用 国产疫苗。在应用圆环病毒疫苗后满 意度调查中,进口圆环病毒疫苗满意 度最高。 在注册疫苗不断上市并逐步推广 应用的过程中,国外有些疫苗未经注 册而进入中国市场或国产疫苗未经注 册的中试产品在某些地区试用。猪圆 主题策划 F EATURE 34 猪业科学 SWINE INDUSTRY SCIENCE 2011年 第11期 环病毒疫苗市场将进入一个“繁荣” 时期。奇怪的是,大多数养猪人关注 的最多的不是产品的效果和带来的效 益而是产品的价格。 2  猪圆环病毒疫苗应用 应用疫苗防控 PCVD,以此提高 猪场生产成绩,在欧美国家已很普遍。 2010年是猪圆环病毒疫苗在中国启动应 用的一年,虽然大家对疫苗免疫没有争 议,但在是否采用疫苗上,过多考虑投 入而很少计算、比较投入产出比,或缺 乏对疫苗效果的信心;而另一现象,则 是盲目相信疫苗,不加选择、不针对猪 场实际情况地使用疫苗,缺乏对疫苗的 深入了解和细致思考。照搬疫苗生产厂 家的免疫程序,没有考虑疫苗的一些特 点,致使疫苗效果不能充分体现。那么 如何选择疫苗、制定适合自己猪场实际 的免疫程序、确定免疫时机适时免疫就 显得尤为重要。 疫苗选择应以疫苗由国家注册批 准、刺激性小、副反应少、解决猪场存 在的问题、经济合算为原则,同时还要 考虑生产厂家的服务、品牌和知名度(这 是考虑有否质量保证的因素)。 疫苗免疫哪些猪群?何时免疫? 应对猪场流行病学、临床症状、剖检 变化、生产成绩、病原和抗体的实验 室检测进行评估后作出决定。也就是 说,应根据猪场 PCV2 病毒感染、发 病情况而定。母猪是否需要免疫?倘 若母猪群因 PCV2 感染而流产、产死 胎、弱仔的比例超出正常,或仔猪因 PCV2 感染在断奶后 1 ~ 2 周发病,选 择母猪免疫就是正确的。因国产疫苗 的免疫保护期 3 ~ 4 个月,进口疫苗 4 个月以上,所以进口的疫苗可普免2~3 次 / 年,在国产疫苗应用安全的情况 下可免疫 3 ~ 4 次 / 年。 仔猪免疫的时间可据下游猪发病日 龄确定。如仔猪在 6周龄表现出 PCVD 临床症状,因疫苗起效时间为 2 周, PCV2 感染潜伏期约 2周,所以可在仔 猪 2周龄时免疫注射。即应在猪群出现 临床症状至少 4周前施行免疫注射。因 进口的疫苗具有缓释作用,商品猪群只 注射一次即可;若留后备种猪,可在第 1 针免疫 4 个月后再进行第 2 次免疫。 国产疫苗没有抗原缓释作用,需在第 1 次免疫 3周后加强免疫一次;同样若留 后备种猪,应在加强免疫的 3-4 个月后 再免疫。 国产疫苗的一些技术资料显示,商 品猪免疫两次,新生仔猪 3~ 4 周龄首 免,第一次免疫后间隔 3周加强免疫一 次,免疫保护期一般为 3~ 4 个月;后 备母猪配种前做基础免疫二次,间隔 3 周,产前一个月再免疫一次;经产母猪 跟胎免疫 1次。 在制定免疫程序时,还应注意与 其它疫苗的相互干扰作用。猪圆环病 毒疫苗免疫应与其它病毒性疫苗应有 至少 7 d 的间隔;若 PRRS 弱毒疫苗 免疫在前,最好有 10 d 以上的间隔再 免 PCV2 疫苗。 猪圆环病毒疫苗免疫效果通过常规 的抗体检测目前难以给出正确评价,可 通过临床症状、生产成绩予以评估。猪 圆环病毒疫苗应用于 PCV2 急性感染 的猪场——仔猪群呼吸困难、消瘦、皮 炎,母猪群流产、产弱仔等(临床型 PCVD),可减少母猪流产,产死胎、 弱仔的数量,可明显降低保育及生长 育肥猪发病率、死淘率;应用于 PCV2 亚临床感染的猪场——猪群没有明显的 临床症状(亚临床型或温和型 PCVD), 可明显提高日增重、猪群整齐度,降低 料肉比,减少皮炎发病率,缩短出生 至出栏时间;还有助于猪瘟疫苗、猪 蓝耳病疫苗、伪狂犬病疫苗免疫效果 的正常发挥,降低机体对饲料霉菌毒 素的敏感度。 猪圆环病毒疫苗值不值得在一个 猪场应用,除了考虑投入的资金数额 外,更应该关注疫苗能给我们带来什 么。如 FLEX 系列茵格发猪圆环病毒 疫苗在国外应用效果卓著,应用量超 过了其它几家疫苗的总和,占市场份额 60%以上。在中国,它的非凡效果通过 生产上的实际应用也得到了验证。猪场 里投入这样一个新的高价位疫苗,在经 济上是否划算?如果疫苗应用后,母猪 一年多产一头健仔,保育猪料肉比降低 0.1,生长育肥猪料肉比降低 0.2,提 前 2 d 出栏,就物超所值了。更不用说 应用猪圆环病毒疫苗后可明显改善其他 疫苗免疫效果和药物治疗效果,并由此 减少防治细菌感染所用药物的费用;再 加上猪圆环病毒疫苗可以改善猪群整体 健康状况,如可以减少皮炎和呼吸道病 发生率、提高猪群整齐度、减少后备猪 群子宫炎的发病率等等。用疫苗,就值 得了。 3  猪圆环病毒疫苗发展方向 目前市场上的猪圆环病毒疫苗制作 采用了全病毒灭活技术,病毒嵌合技术 和病毒亚单位复制表达技术。全病毒培 养、灭活是一经典技术,不是未来研制 发展的方向,分子生物学技术将会越来 越多地应用于疫苗研制。类病毒颗粒 (Virus-Like-Particle, VLP) 技 术 已 经成功并广泛运用于现代疫苗研发与生 产。FLEX 系列茵格发猪圆环病毒疫苗 抗原就是一种类病毒颗粒,即大小、形 态与病毒相同的抗原。 疫苗的组合应用,将会成为未来疫 苗应用发展的趋势。应用新技术、新材 料研制出可与其他疫苗组合应用的猪圆 环病毒疫苗,它将与一种或多种疫苗组 合在一起免疫一针,同时预防两种或多 种疾病,这样既能降低动物应激,提高 动物福利,又能减少员工免疫的工作量 和降低免疫相关成本,如猪圆环病毒疫 苗与支原体疫苗二者或猪圆环病毒疫 苗、支原体疫苗和猪蓝耳病疫苗三者组 合应用。勃林格公司已在欧美国家推出 了 FLEX系列茵格发猪圆环病毒疫苗与 支原体疫苗的可组合产品。 (收稿日期:2011-11-09)
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