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752型紫外-可见分光光度计

2010-04-14 6页 ppt 88KB 26阅读

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752型紫外-可见分光光度计nullnull1.掌握紫外分光光度计的操作方法。 2.掌握吸光系数法的定量方法。 3.掌握含量测定、标示量的百分含量及稀释度等计算方法。实验十一 维生素B12注射液的含量测定实验目的null 维生素B12是一类含钴的卟啉类化合物,具有很强的生血作用,可用于治疗恶性贫血等疾病。维生素B12不是单一的一种化合物,共有七种。通常所说的维生素B12是指其中的氰钴素,为深红色吸湿性结晶,制成注射液的标示含量有每毫升含维生素B12 50、100或500mg等规格。 维生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm...
752型紫外-可见分光光度计
nullnull1.掌握紫外分光光度计的操作。 2.掌握吸光系数法的定量方法。 3.掌握含量测定、标示量的百分含量及稀释度等计算方法。实验十一 维生素B12注射液的含量测定实验目的null 维生素B12是一类含钴的卟啉类化合物,具有很强的生血作用,可用于治疗恶性贫血等疾病。维生素B12不是单一的一种化合物,共有七种。通常所说的维生素B12是指其中的氰钴素,为深红色吸湿性结晶,制成注射液的标示含量有每毫升含维生素B12 50、100或500mg等规格。 维生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm与550±1nm三波长处有最大吸收。361nm处的吸收峰干扰因素少,药典以361±1nm处吸收峰的比吸光系数E值(207)为测定注射液实际含量的依据。实验原理null仪器与试剂752型紫外-可见分光光度计,756型紫外可见分光光度计;石英比色皿;维生素B12注射液:100mg/ml;吸量管:5ml;容量瓶:10mlnull1.维生素B12最大吸收波长扫描 用756型紫外可见分光光度计对其进行扫描。 2.比色皿的校核 将两只石英比色皿编号标记,装入蒸馏水,在361nm处比较两只比色皿的透光率。以透光率最大的比色皿为100﹪透光,测定另一只比色皿的透光率,换算成吸光度作为它的校正值。测定溶液时,以那只透光率最大的比色皿作空白,另一只比色皿装待测溶液,测定的吸光度减去其校正值。 3.吸光系数法 精密吸取维生素B12注射液样品(100mg/ml)3.0ml,置于10ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,得样品稀释液。装入1cm石英比色皿中,以蒸馏水为空白,在361nm波长处测得吸光度A值,与48.31相乘,即得样品稀释液中每毫升含维生素B12的mg数。实验步骤null数据处理按照比吸光系数的定义,每100ml含1g维生素B12的溶液(1﹪)在361nm的吸光度应为207。即: E (361nm)=207(100ml/g﹒cm) =207×10-4(ml /mg﹒cm ) C样 = A样/b﹒E = A样×48.31 (mg/ml) 维生素B12标示量(%)= ×100%null 1.试比较用曲线法与吸光系数法定量的优缺点。 2.吸收系数法中为什么吸光度乘48.31 即得每毫升VB12 的μg 数?思考
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