中国神经免疫学和神经病学杂志2009年9月第16卷第5期 Chin J Neur i 坠 ! ! !: !: ! !:.:
左旋多巴对帕金森病大鼠模型学习记忆能力
的影响及其机制
邢红霞 ,王兴平 ,殷 闯 ,韩金红。,王玉梅 ,丰慧根
(1.新乡医学院第一附属医院神经内一科,河南 卫辉 453100;2.新乡医学院生命科学技术系,
河南 新乡 453003;3.新乡医学院基础医学院组织与胚胎教研室,河南 新乡 453003)
摘要:目的 观察左旋多巴(1evodopa,L—dopa)对帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠学习记忆能力的
影响,并探讨其机制。方法 应用 6羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)制作 PD大鼠模型。将 228只造
模成功的 PD大 鼠分为对 照组 和实验组 。对 实验组大 鼠分别按体质 量 lO、2O、30 mg/(kg·d)腹腔注射 L—dopa,
连续 28 d,然后分别于腹腔注射 L-dopa后 1、3、5、7、14、28 d测定其行为学及血浆同型半胱氨酸(Homocysteine,
Hcy)和叶酸水平 。同时测定大鼠海马 区乙酰胆碱酯 酶(acetylch0linesterase,ACHE)活力。结果 (1)随 L-dopa
剂量增大、应用时间延长可明显降低大鼠学习记忆能力(P<0.01),降低大鼠海马区 AChE活力(P
书#进行。
1.3.3 血浆总 Hcy和叶酸浓度测定 :于采血样前
1 d大鼠禁食 。经 Y 型电迷宫测试后 以 1 (质量
浓度)戊巴比妥钠按大 鼠体质量 40 mg/kg腹腔注
射将其麻醉后,从心脏采血至肝素抗凝管中,分离
血浆置一2O℃保存待测 。血浆 Hcy及叶酸水平测
定应用高效液相 色谱仪(DrewDS-30,英 国),荧光
检测条件为激 发波长 385 nm,放射波长 5.5 nm。
采用 C18反相柱和 50 mmol/L KC1流动相,洗脱
时间 30 min,流速 0.5 mL/min。
1.4 统计学处理 数据 以均数 ±标准差
示 ,运
用 SPSS 13。0统计软件 ,采用两因素多水平重复测
量的方差分析 ,两两 比较采 用 q检验 ,以 a一0.05
为检验显著性水准。
2 结果
2.1 大鼠学习和记忆能 力比较 L—dopa小剂量
组各时间点学习能力与对照组 比较差异无统计学
意义(P>0.05),中、大剂量组各时 间点学 习能力
与对照组 比较差异具有统计学意义 (F一100.160,
P
0.05),而中、大剂量组各时间点 AChE活力
较对照组降低(F一132.543,P<0。01)。中、大剂
量组第 7、14及 28天 AChE活力较其他时间点显
著降低(F=2.265,P<0.05)。随 L—dopa剂量增
大、应用时间增加可导致大 鼠 AChE活力 明显 下
降(F一2.016,P<0.05)。具体结果见表 2。
2.3 总 Hcy和叶酸水平 L—dopa小剂量组各时
问点总 Hcy水平与对照组比较无统计学差异(P>
0.05),而中、大剂量组 各时间点总 Hcy水 平与对
照组 比较具 有 统计 学 差 异 (F一 7194.581,P<
0.01);中剂量组第 28天总 Hcy水平较其他时间
点显著增高 ,在大剂量组 中随时间延长,总 Hcy水
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平间 比较 差 异有统 计学 意义 (F一331.023,P<
0.01)。随 L—dopa剂量增大、应用时间延长可使大
鼠血浆总 Hcy浓度 明显 升高 (F一437.890,P<
0.01),而血浆 叶酸水平 明显下 降(P<0.01)。具
体结果见表 3。
3 讨论
L—dopa是 目前治疗 PD最有效的药物,但长期
使用会出现异动症等严重并发症 _7]。该研究发现
各时点小剂量 L—dopa治疗组 PD大 鼠学习记忆能
力与对照组比较差异无 统计学意义,而中、大剂量
L—dopa治疗组 PD大鼠学习记忆能力随 L—dopa使
用时间延长、剂量增加而降低 ,表明小剂量 L—dopa
治疗对 PD大鼠的学习记忆能力无明显影响 ,而 L—
dopa在大鼠体内蓄积剂量逐渐增加,其神经毒性
作用则逐渐加 重。这 与 Jenner[8 研 究结果 一致 。
L—dopa的神经毒性作用可能与其 自身氧化代谢分
解产物大量破坏 DNA,导致神经细胞凋亡或死亡、
抑制黑质细胞线粒体复合酶 I等有关[g]。
学习记忆与中枢胆碱能递质系统有密切关系,
中枢胆碱能递质 系统 可通过隔 区一海 马一边缘 叶和
大脑皮质两条通路特异性地调节第一级记忆转入
第二级记忆的过程 。该研究发现中、大剂量L—dopa
治疗组各时间点 AChE活力较对 照组减少 ;中、大
剂量 L—dopa治疗组 中,第 7天、第 14及 28天 的
AChE活力较其他时间点显著降低,表明随 L—do-
pa剂量增大、应用时间延长可使大鼠AChE活力
明显下降 ,L—dopa对 中枢胆碱 能系统具有损害作
用 。
该研究还发现 L—dopa不仅可引起 PD大鼠学
习记忆能力下降及神经递质改变,而且可引起营养
代谢异常;小剂量 L—dopa治疗组 PD大鼠各时点
Hcy和叶酸水 平与对照组 比较无 统计 学差异 ,而
中、大剂量 L—dopa治疗组 PD大 鼠 Hcy水平随 L—
dopa使用时间延长 、剂量增加而升高,叶酸水平随
L—dopa使用时间延长、剂量增加而降低。这与王
红梅等报道结果一致_1 。L-dopa引起 Hey水 平
升高的机制与其 自身代谢有关口 ,而叶酸水平降
低与代谢过程中消耗叶酸有关。
多项研究均证明 Hcy升高可引起认知缺损及
痴呆l】 。该研究表明,大量使用 L—dopa能使大鼠
学习记忆能力和 AChE活力 下降 ,其 机制与 Hcy
升高有关。Hcy可能通过促进兴奋性毒性及钙的
细胞毒作用,促进氧化应激、能量消耗,损伤线粒体
功能 ,甚至加速细胞凋亡等促进海马和皮质神经元
损伤,致使学习记忆能力下降。
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