亚硝酸盐中毒猪肉尸的实验室检验

亚硝酸盐中毒猪肉尸的实验室检验 兰州市动物疫控中心 杨 立 徐林平 张三权 孟晓琴 730050 摘要 通过一例亚硝酸盐中毒急宰猪肉尸的实验室检验 ，阐述了亚硝酸盐中毒的危害，提示养殖生产者特别是农村生猪散养户在加工猪饲料一定要注意急性亚硝酸盐中毒的危害 关键词 猪硝酸盐中毒 实验室检验 质量安全 2008年5月25日10时许，兰州市西果园农民陈某饲养的4头猪在饲喂1小时后相继出现躁动不安、呕吐、呼吸急促、流涎及打滚等症状，遂对其进行放血急宰。因怀疑有人投毒不敢食用，采集肝、肺及肉样送我站化验室，要求化验是否是传染病、是否投毒及肉尸能否食用。检验人员在对猪肝、肺进行涂片镜检未发现可疑病原菌后，要求陈某将胴体、头、蹄、胃内容物及所剩饲料一同送检。 1 ：急宰猪的头、蹄、胴体、肺、肝、脾及胃内容物等。采集应检淋巴结待检。 2 方法： 2.1 细菌学检查：对肝、脾、肌肉、颌下淋巴结及应检淋巴结进行触片，瑞特氏染色，干燥后镜检，未发现炭疽杆菌及其它兽医学上常见的病原菌，排除了感染常见细菌传染病的可能。 2.2 解剖学检查：通过皮肤、粘膜、应检部位淋巴结的检查。可视粘膜潮红，皮肤轻度发红；放血良好，血脖子明显，皮肤未见点状出血，肠管无出血及纽扣状溃疡；胃内膜充血发红；心脏瓣膜未见菜花样赘生物；除1头猪肺脏水肿外，其余猪肺脏无水肿及增生现象；应检淋巴结除腹股沟浅淋巴结水肿外，其余均未见异常。排除了猪瘟、猪丹毒和猪肺疫的可能性。 2.3 理化检验：无菌采取肉样，做成1：10的肉浸液，分别进行PH值、硫酸铜肉汤、过氧化物酶及微生物毒素的呈色反应。 2.4 毒物检验： 2.4.1 磷化锌的检验：取胃内容物适量防入三角瓶中，加水呈稀粥状，加10%盐酸5ml，瓶口安上装有醋酸铅棉花的玻璃管，口上盖放滴有溴化汞的试纸，然后将三角瓶置酒精灯上徐徐加热，观察棉花及试纸的变色情况。将检样过滤，取滤液适量与小试管中，加入5%亚铁氰化钾溶液数滴，看是否有白色沉淀生成。取所剩饲料做同样实验。以下同。 2.4.2 氟乙酰胺的检验：采用灵敏度为1：20000的奈氏试剂法。取处理后的检材水溶液2ml，加奈氏试剂2ml，看是否有橘红色沉淀生成。 2.4.3 敌鼠钠盐的检验：将饲料及胃内容物100g，加蒸馏水呈呈稀粥状，加入1%稀盐酸酸化，用乙醚提取2次，合并乙醚液，醚液用1%磷酸氢二钠水溶液提取3次，合并水溶液提取液，经稀盐酸酸化后，再用氯仿提取3次，合并氯仿液，经无水硫酸钠脱水，挥去氯仿，残渣供检验。取残渣的乙醇溶液1D于白瓷板上，加1%三氯化铁醇液1D，观察颜色变化。 2.4.4 亚硝酸盐的检验：采用试粉法。取胃内容物10g加蒸馏水呈稀粥状，搅拌数分钟，加活性炭脱色，过滤。取滤液2ml于小试管中，然后放少许试粉于滤液中，摇匀，观察滤液颜色变化。 3 结果及讨论： 3.1 结果： 1理化检验结果： PH值： 6.5（比色法） 硫酸铜肉汤反应：肉汤透明（——） 过氧化物酶反应：立即呈兰绿色（——） 微生物毒素的呈色反应：呈兰紫色（——） 提示样品不属病猪肉。 3.1.2毒物分析检验结果： 2.4.1中棉花及试纸无颜色变化，滤液无白色沉淀形成，证明不含磷化锌。 2.4.2中无橘红色沉淀生成，证明不含氟乙酰胺。 2.4.3中无颜色变化，证明不含敌鼠钠盐。 2.4.4中滤液颜色变为紫红色，证明含亚硝酸盐。 3.2 讨论： 3.2.1 检验证明猪只是由于亚硝酸盐中毒而发病，而不是由于有人投毒造成的。 3.2.2 在兰州市郊，农民将煮熟的菜叶、红萝卜等煮熟闷后喂猪很普遍，这种饲料在隔夜从放后极易产生大量亚硝酸盐。用这种饲料喂猪，极易引起猪亚硝酸盐中毒。据资料，不仅闷煮的烂白菜、甘蓝、萝卜叶、甜菜类可引起猪亚硝酸盐中毒，一些粗饲料如油菜杆粉、小麦干粉、青草粉、洋芋蔓及苜蓿等，如保存和调制不当或饲喂青料过量 ，也可引起猪的亚硝酸盐中毒。据畜主陈某讲，其饲料就是将甜菜粉碎堆积分次煮熟喂猪的。 3.2.3 亚硝酸盐中毒急宰猪肉尸，由于没有资料证明其能食用。笔者建议将其深埋作无害化处理。 3.2.4 猪亚硝酸盐中毒, 临床多发生于食欲较好的猪,发病急,症状重,常因抢求不及时而引起死亡。且常以呼吸困难,皮肤、粘膜紫绀,全身组织缺氧为病理变化特征。剖检的主要变化是血液凝固不良,血色暗紫,状若酱油。根据病史调查、临床症状和剖检变化,结合实验室内的毒物分析可作出诊断。美蓝是特效解毒药,但在其缺少时,应用大剂量维生素C可收到良好的解毒效果。 3.2.5 随着集约化养猪技术的推广应用，本病发病率已不高，但农村的养殖户还是要加强饲养管理做好预防，确实改善青绿饲料的堆放、蒸煮过程，改进养殖力式，避免类似事件发生，造成不必要的经济损失。