黄精多糖的生物活性研究

第12卷第7期 2006年7月 中国实验方剂学杂志 ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae V01．12．No．7 Jul．，2006 黄精多糖的生物活性研究 张庭廷1，夏晓凯2，陈传平1，吴安平1，何梅1，聂刘旺卜 (1．安徽师范大学生命科学学院重点实验室，安徽芜湖241000； 2．湖南省中医药高等专科学校，湖南株洲412012) [摘要] 目的：研究黄精多糖(PSP)的生物活性。方法：1．饲料中添加PSP，测定PSP对小鼠血脂的影响；2．测定igPsP对 小鼠的抗衰老作用；3．测定igPSP对小鼠免疫功能的影响。结果：1．PSP可预防和治疗小鼠高脂血症，降低小鼠血中的胆固醇 以及甘油三酯含量；2．PSP可提高7月龄小鼠全血中SOD以及GSH．Px的活性，降低小鼠心、肝、脑组织中LF和MDA含量； 3．PSP可提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数；增加小鼠溶血素的生成；增加正常小鼠DTH反应以及恢复免疫功能 低下小鼠的DTH反应。结论：PSP具有降低血脂、延缓小鼠衰老以及增强小鼠免疫功能等作用。 [关键词]黄精多糖；降血脂；抗衰老；免疫功能 [中图分类号】 11285．5 【文献标识码】 B [文章编号] 1005．9903(2006)07．0042．04 BiologicalActivitiesofPolysaccharidesfromPolygonatumSibiricumRedoute ZHANGTing-tin91，XIAXiao-kai2，CHENChuan-pin91，彤UAn-pin91，HEMeil，NIELiu-wan91。 (1．CollegeofLifeScience，AnhuiNormalUniversity，Wuhu241000，China； 2．HunancollegeofChineseMedicine，Zhuzhou412012，China) [Abstract]Objective：ToresearchthebiologicalactivitiesofpolysaccharidefromPolygonatumSibiricum Redoute．Methods：1．AddingPSPtomouse’SfeedstuffanddeterminingtheinhibitionofserumlipidsbyPSP．2．Feeding mousewithPsPtodeterminePsP’Sfunctionofanti-aging．3．FeedingmousewithPsPtodeterminetheimmuneactivities． Results：1．PSPhasobviouseffectinpreventingfromandtreatmentofmousehypercholesterolemia．2．PSPcanincreasethe activitiesofSODandGSH-PxinagedmousebloodanddecreasethecontentofLFandMDAinagedmouseheart，liver [收稿日期]2005—11-07 [基金项目] 安徽师范大学“皖泰”应用开发研究项目(2004Wtjj08) [通讯作者]聂刘旺，Tel：(0553)3869571；E．mail：1wnie@mail．ahnu．edu．cn 5讨论 川I贝雪梨膏为中药保护品种，在临床上已经使 用多年，对阴虚肺热引起的咳嗽喘促，痰涎粘稠有明 显疗效。此次我们对川贝雪梨膏从毒理学及主要药 效学两方面进行了再工作(毒理学评价待发 表)。动物实验研究表明川I贝雪梨膏有明显的平喘、 镇咳和祛痰作用。在通常情况下，上述症状的发生 同时伴有炎性物质的参与，从而引起炎症反应和发 热现象，因而，我们采用不同的致炎模型和不同的发 热模型对川贝雪梨膏进行了抗炎、解热方面的实验 ·42· 研究，其结果表明川贝雪梨膏对不同的炎症模型和 不同的发热模型均有一定的改善作用。 [参考文献] [1]国家药典委员会．中华人民共和国药典[S]．一部，北 京：化学工业出版社，2000．15． [2]张宏、王玉良．最近中成药手册[M]．沈阳：辽宁科学出 版社，1998．328． [3]李仪奎．中药药理实验方法学[M]．上海：上海科学技术 出版社，1991．298．312． [4]陈奇．中药药理研究方法学[M]．北京：人民卫生出版 社，1994．634．658． 万方数据 第12卷第7期 2006年7月 中国实验方剂学杂志 ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae V01．12．No．7 Jul．，2006 andbrain．3．PSPhasa strongabilitytoenhancemousePhagocyte’SPhagocyticpercentageandPhagocyticindex，to increasethecontentofhaemolysininmouseandtheresponseoftheDTH(delayed-typehypersensitivity)innormalmouse andtorecoverresponsetoDTHincyclophosphamide(Cy)intoxicated．Conclusion：PSPcanreducetheserumlipids，deter agingandenhancetheimmunereactioninmouse． [Keywords]PolygonatumSibiricumRedoutePolysaccharide(PsP)；Reductionofserumlipids；Anti-a舀ng； Immunefunction 黄精(PolygonatumsibiricumRedoute)是多年生的 百合科草本植物，具有补中益气，除风湿、安五脏、强 筋骨、止寒热、填精髓之功效，能补诸虚，久服神清气 爽，延年益寿。近年来，对黄精的活性物质研究报道 不少，如黄精多糖具有降血糖⋯、延缓果蝇寿命陋1等 功能，本文将进一步探讨黄精多糖(PSP)的降血脂、 抗衰老以及免疫调节作用。 1 1．1动物昆明种小鼠，体重21土29，雌雄兼有，购 于皖南医学院以及中南大学湘雅医学院动物实验 中心。 1．2仪器与药品721．分光光度计(上海第三分析 仪器厂)；岛津UV．265自动记录分光光度计；总胆固 醇测定试剂盒、血清甘油三酯测定试剂盒(由浙江东 鸥生物工程有限公司生产)；1，1，3，3．四己氧基丙烷 (TEF)、考马斯亮蓝均为Sigma公司产品；2，4．二硝基 氟苯(DNFB)(中国金山县兴塔化工厂生产)；环磷酰 胺(Cv)(上海华联制药有限公司生产)；5，5’．二硫代 对硝基苯甲酸(DTNB)、硫代巴比妥酸(TBA)均是上 海试剂二厂生产；邻苯三酚遵义市第二化工厂生产； 其它试剂皆为分析纯。黄精多糖(Polygonatum sibiricumRedoutepolysaccharidePSP)由本实验室从九 华山采集的黄精根茎中分离提纯(多糖含量为 91．7％)。 2方法 2．1 PSP的降脂作用。31 2．1．1对实验性小鼠高脂血症的预防作用将50 只小鼠均分为5组，自由取食，对照组饲以基础饲 料，模型组饲以高脂饲料，大剂量组饲以高脂饲料+ 500mg]kgPsP，中剂量组饲以高脂饲料+250mg／kg PSP，小剂量组饲以基础饲料+125mg／kgPsP。高脂 饲料配方：在基础饲料中加入3％胆固醇，30％甘油 三酯。连续喂食7d，于第8d断头取血，37℃温浴 lh，3000r／min离心15min，取血清，采用酶法测定小 鼠血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量。 2．1．2对实验性小鼠高脂血症的治疗作用将50 只小鼠均分为5组，分组、造型及给PSP方式同上， 造模各组先饲以不含PSP的高脂饲料8d后(这时血 中TG和TC含量均明显升高)，再饲以含有PSP的高 脂饲料，于给PSP后第8d断头取血，测定小鼠血液 中的TG、TC的含量。 2．2 PsP对小鼠衰老的延缓作用H’51选7月龄昆 明种健康小鼠30只，体重32．4±1．19，雌雄兼有，依 体重均匀分成3组，即生理盐水(NS)对照组和不同 剂量PsP组：小剂量组(250mg／kg·d．ig)，大剂量组 (500mg／kg·d．ig)，连续5周；另设1月龄幼年小鼠组 (10只)，体重14．3±0．99，igNS，每天1次，连续5 周。各组小鼠于末次给药后12h，处死，取小鼠全血， 并剖取小鼠心、肝、脑，分别按DTNB直接法№1以及 邻苯三酚自氧化法"o测定小鼠血GSH．Px与SOD活 力，按TBA显色法¨1以及Sohol法旧1分别测定小鼠 心、肝、脑组织中MDA与LF含量。 2．3 PSP对小鼠免疫机能的影响¨¨12j 2．3．1对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响取 小鼠40只，均分为4组，PSP大、中、小剂量组(500， 250，125mg／kg．ig)和对照组，每天给药1次，灌服量 为10mIJkg，对照组ig等体积NS，连续给药7次，末 次给药后1h每鼠腹腔注射5％鸡红细胞混悬液 0．4mL，于给鸡红细胞后4h处死小鼠，按文献方法测 腹腔巨噬细胞的吞噬功能。 2．3．2对小鼠溶血素生成的影响取昆明种小鼠 40只，均分为4组，PSP大、中、小剂量组(500，250， 125mg／kg．ig)，对照组ig等体积Ns，每d给药1次， 连续10d；给药后第3d每鼠腹腔注射5％鸡红细胞 NS混悬液0．2mL进行免疫，免疫后第7d眼眶取血， 离心，取血清用NS稀释100倍，取稀释后血清lmL， 5％鸡红细胞混悬液0．5mL，10％补体0．5mL混合， 在37℃恒温孵育30min，O℃冰箱中中止反应，离心， 取上清液于紫外可见光谱仪540nm处比色，测OD 值。 ·43· 万方数据 第12卷第7期 2006年7月 中国实验方剂学杂志 ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae V01．12．No．7 Jul．，2006 2．3．3对迟发型超敏反应(DTH)的影响取昆明种 小鼠40只，按体重均分为4组，分组及剂量见表4， ig给药，每d1次，连续10d，对照组ig等体积Ns。 用药第4d，用脱毛剂在小鼠腹部脱毛处理，次日用 1％DNFB(用1：1丙酮麻油配制)在脱毛处致敏，每 鼠50ttL涂匀，24h后再用同法加强致敏1次。致敏 第2d，小鼠腹腔注射Cy60mg／kg，连续3d，致敏第 4d，用1％DNFB20pL均匀涂抹左耳进行攻击，攻击 30h后剪下左右双耳，用打孑L器在双耳相应部位各 打一耳片，称重，求出左右耳片重量之差进行组间比 较。 3结果与分析 3．1 PSP的降脂作用 3．1．1 PSP对实验性小鼠高脂血症的预防作用，结 果见表1。 表l PsP对实验性小鼠高脂血症的预防作用(；4-s，n：lO) 注：与模型组相比”P书

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