去甲肾上腺素和内皮素在应激损伤中的作用

去甲肾上腺素和内皮素在应激损伤中的作用 　　社会环境因素对人类行为生理和健康影响的研究，是目前生命科学与人口健康研究的重要课之一，下面是搜集整理的一篇探究去甲肾上腺素作用的，欢迎阅读查看。 　　随着社会的高速发展，工作和生活节奏不断加快，时代对人类的要求也愈来愈高，人类将更多地处于应激之中，应激对人类的危害也将不断加剧。机体在遭遇紧急情况时，如恐惧、惊吓、焦虑、创伤或失血等情况，交感神经活动加强，去甲肾上腺素(nora-drenaline,NA)、肾上腺素(adrenaline,A)的分泌量大大增加。NA、A作用于中枢神经系统细胞膜受体，激活腺苷酸环化酶，将三磷酸腺苷(ATP)催化生成环-磷酸腺苷(cAMP),cAMP激活蛋白激酶A(PKA),使蛋白质磷酸化，产生细胞反应，从而提高机体的兴奋性，使机体处于警觉状态，反应灵敏，以适应在应急情况下的需要，或使机体发病[1],甚至猝死[2].内皮素(endothelin,ET)是调节心血管功能的重要因子，对维持基础血管张力与心血管系统稳态起重要作用。内皮素是迄今为止发现的作用最强的缩血管物质。并且缩血管升血压效应还可反射性引起心率抑制，造成心肌供血不足、代谢紊乱，内皮素(ET)与去甲肾上腺素是引起猝死的关键因素，在应激损伤过程中具有至关重要的作用。 　　本文给予中国树鼩、Wistar大鼠、BALB/c小鼠低频电刺激，观察相同刺激对不同种类动物应激反应的程度，探索NA、ET在应激损伤中的作用，为法医病理学研究和应激损伤分析提供参考资料。 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　1.1.1实验动物 　　中国树鼩(滇西亚种，Tupaiabelangerichinen-sis[3]),90只，雄性，体重120~125g,购于中国科学院昆明动物研究所【SCXK(滇)K2013-0003】。SPF级Wistar大鼠，90只，雄性，体重200~210g.SPF级BALB/c小鼠，90只，雄性，体重20~22g,大、小鼠均购于甘肃省中医学院科研实验中心【SCXK(甘)2011-0001】。 　　1.1.2试剂 　　利血平：批号：130406,广东邦民制药厂有限公司生产;去甲肾上腺素(NA)、内皮素(ET)放免检测试剂盒，北京北免东雅生物技术研究所生产。 　　1.1.3仪器 　　GC-1200γ计数放免仪：美国Picker公司制造;Dossy-2H多通路生理参数采集存储仪：购于成都达硕生物科技有限公司。 　　1.2实验方法 　　1.2.1动物分组 　　选取中国树鼩、SPF级Wistar大鼠、BALB/c小鼠各90只。中国树鼩在实验室饲育笼(250cm×150cm×150cm连接50cm×30cm×20cm休息室)内饲养，每笼5只;Wistar大鼠、BALB/c小鼠在独立通气笼(individualventilatedcages,IVC)内饲养，自由饮水进食，人工光照12h.实验室温度18~22℃,IVC内温度(22±0.2)℃,湿度55%~65%,适应7d.每种动物按体重随机各分为3组，每组30只。电刺激组(给予脉冲直流电刺激[4]).利血平组(各组在饮水中加入利血平2mg/100mL,次日给予电刺激，刺激条件同电刺激组). 　　1.2.2动物实验、标本采集和检测实验前，每只动物均剃去左侧前、后肢体毛各约1.0mm×1.0mm,实验时，将Dossy-2H多通路生理参数采集存储仪皮肤电极片(面积0.7mm×0.7mm)粘贴于去毛处，外用尼龙带扎紧。对照组和实验组分别在实验(电刺激)后12、24、36h各取10只动物(各组采血前禁食6h,不禁水),用乙醚吸入麻醉，从心脏采血1mL,3000r/min离心10min,分离血清，冻存待测。全部血清用GC-1200γ计数放免仪检测NA、ET水平。 　　1.3统计学分析 　　实验数据采用SPSS17.0软件进行统计学处理。低频电刺激对动物血激素水平的影响用百分比表示，组间差异采用单因素方差分析，用均数±差(x±s)表示，以P<0.05为差异有统计学意义。 　　2结果 　　2.1低频电刺激对中国树鼩血激素水平的影响 　　电刺激后12、24、36h检测，电刺激组中国树鼩血内皮素(ET)水平比对照组分别升高了79.84%、77.03%、69.52%(P<0.01);利血平组(先给予利血平，再给予相同的低频电刺激)中国树鼩血ET水平比电刺激组分别降低了35.19%、35.38%、33.80%(P<0.01);电刺激组中国树鼩血NA水平比对照组分别升高了72.51%、64.99%、60.48%(P<0.01),利血平组中国树鼩血NA水平比电刺激组分别降低了65.38%、59.56%、52.60%(P<0.01).见图1. 　　2.2低频电刺激对Wistar大鼠血激素水平的影响 　　电刺激后12、24、36h检测，电刺激组Wistar大鼠内皮素(ET)水平比对照组分别升高了68.05%、47.30%、24.28%(P<0.01);利血平组Wistar大鼠血ET水平比电刺激组分别降低了32.54%、26.85%、14.28%(P<0.05~0.01);电刺激组Wist-ar大鼠血NA水平比对照组分别升高了66.12%、53.62%、44.39%(P<0.01),利血平组Wistar大鼠血NA水平比电刺激组分别降低了69.84%、65.10%、60.38%(P<0.01).见图2. 　　2.3低频电刺激对BALB/c小鼠血激素水平的影响 　　电刺激后12、24、36h检测，电刺激组BALB/c小鼠血内皮素(ET)水平比对照组分别升高了67.39%、62.57%、55.59%(P<0.01);利血平组BALB/c小鼠血ET水平比电刺激组分别降低了20.44%、17.82%、19.27%(P<0.05~0.01);电刺激组BALB/c小鼠血NA水平比对照组分别升高了27.58%、21.72%、14.83%(P<0.05),利血平组BALB/c小鼠血NA水平比电刺激组分别降低了17.25%、24.18%、16.04%.见图3. 　　3讨论 　　为了探索社会环境压力对人们身心健康的影响，很多学者对相关的动物模型进行了长期的研究，发现慢性环境刺激使中国树鼩血象[5]、血激素水平[6]、生殖系统[7]发生病理性变化。慢性束缚应激能引起大鼠学习记忆能力降低[8]、肠功能紊乱[9],热刺激造成小鼠肝脏、十二指肠和空肠严重损伤[10].反复电刺激清醒状态下大鼠上矢状窦[11,大鼠出现抑郁的行为。旋转刺激能引起大鼠血促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropichormone)、促肾上腺皮质素释放激素(corticotropinreleasinghormone)水平升高[12],激发肾上腺皮质激素的释放，增进抵抗力。高浓度的NA加速内皮细胞合成并释放内皮素(ET)和血小板活化因子(platelet-activatingfac-tor)[13].升高的ET不仅本身有强烈的缩血管作用，而且增强NA的缩血管作用[14].睾酮(testoster-one)水平下降[15],可使大鼠血管内皮受损，ET释放增加[16].NA、ET的过度分泌，在引起血管收缩的同时加剧血小板的激活并释放血栓素(thrombox-ane),活化的血小板因子(PAF)又可进一步促进内皮细胞释放ET,PAF加速血小板集聚，引起心、脑血管痉挛和血栓形成，造成机体损伤、发病甚至猝死。 　　本文实验结果显示，给予中国树鼩、Wistar大鼠、BALB/c小鼠电刺激后，各组动物血NA、ET水平均显着升高(均P<0.01).给予利血平后再给予相同的电刺激后12h测定，各组动物NA、ET水平比电刺激组明显降低(P<0.05~0.01),其中ET降低程度依次为中国树鼩(35.38%)>Wistar大鼠(32.54%)>BALB/c小鼠(20.44%).实验结果表明，在应激反应中，因应激原种类、动物种属、性别、生理状态、应激状态的不同而有所差异;社会环境刺激能显着增加机体(人、动物)血液中NA、ET水平;NA、ET参与高血压、心脏病乃至猝死的病理过程;利血平能阻碍体内NA的合成和释放，使交感-肾上腺髓质轴和下丘脑-垂体-性腺轴的兴奋降低，缓解了机体对应激损伤的反应，对机体有保护作用。 　　 　　[1]刘水平，陈玉川，郭薇，等。挤压伤大鼠血浆内皮素含量与心脏损伤的关系[J].中山医科大学学报，2002,23(1):27-28. 　　[2]李军杰，叶平，骆雷鸣，等。慢性应激与血清皮质醇、肾上腺素和去甲肾上腺素的关系[J].解放军医学院学报，2010,31(6):558-559. 　　[3]王应祥。中国树鼩的分类研究[J].动物学研究，1987,8(3):213-230. 　　[4]俞发荣，连秀珍，张振南，等。即刻刺激对中国树鼩体内DA、cMAP、cMGP水平的影响[J].中国法医学杂志，2014,29(6):548-550. 　　[5]连秀珍，张红梅，谢明仁，等。慢性环境刺激对中国树鼩行为方式的影响[J].生态科学，2012,31(6):666-670. 　　[6]俞发荣，常青云，连秀珍，等。生活环境条件对中国树鼩血激素水平和心理行为的影响[J].中国实验动物学报2014,22(3):62-66.