不同生物药厂禽流感疫苗对蛋鸡免疫

不同生物药厂禽流感疫苗对蛋鸡免疫 安全用药 doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2015.12.012 不同生物药厂禽流感疫苗对蛋鸡免疫效果评估 陈树霞1，葛恒德2，蒋法成1，蒋锁俊1，孙浩1 （1.江苏省淮安市动物疫病预防控制中心江苏淮安223001；2.江苏省涟水县动物疫病预防控制中心江苏淮安223400） 摘要：禽流感病毒是由A型流感病毒引起的禽类(包括家禽和野禽)的感染和（或）感染综合征。目前危害最严重是H5N1亚型高致病性禽流感病毒及其变异株，不仅给养禽业带来巨大经济损失，而且威胁人的公共卫生安全。世界卫生组织(OIE)和我国都将高致病性禽流感列为A类动物传染病。我国高致病性禽流感的防控的关键环节是主要通过接种疫苗来控制H5N1病毒，实行强制免疫政策，所以疫苗的免疫效果对养禽业尤为重要。为了解不同企业生产的禽流感疫苗的免疫效果，为防疫疫苗的选择提供参考依据，我们进行了比对实验，实验选择六种不同企业生产的H5亚型禽流感重组疫苗（以下分别称为：“A疫苗”“、B疫苗”、“C疫苗”、“D疫苗”、“E疫苗”、“F疫苗”）分别免疫鸡群，定期对鸡场开展禽流感免疫抗体，比较不同企业禽流感疫苗的免疫效果，对不同企业的禽流感疫苗进行免疫效果评价，选择免疫效果好的疫苗作为本市防疫之用。关键词：禽流感；疫苗；免疫效果 季节发病率较高，多见于3～20日龄雏鹅。该病症发病迅猛，呈爆发态流行，传播速度快，传染性较强，死亡率较高[2]。患鹅存在继发性感染或混合感染时，其死亡率明显高于单一性感染。小鹅瘟潜伏时间为3～5d，患鹅消化系统及神经系统功能会出现异常，随着病情的深入会转变为全身性症状。 目前小鹅瘟治疗多以疫苗治疗为主，但也存在效果不佳的情况。治疗时应当把握患鹅实际情况，采取针对性措施控制病情，并改善雏鹅生长环境及饮食，从而获取更好的治疗效果。从本研究结果来看，采取盐酸林可霉素注射液治疗雏鹅小鹅瘟得到了较好效果，治疗初期可有效控制相关症状及病情蔓延，当患鹅病情稳定后，继续用药可进一步促进疗效，使病症得到痊愈。事后观察，并未出现病情反复发作，可见盐酸林可霉素可对小鹅瘟具有根治性作用。 盐酸林可霉素可对细胞蛋白质合成产生明显抑制作用，从而控制病源菌繁殖，对感染性症状具 参考文献 [1][2][3] 王占,杨光,宋长瑞,等.小鹅瘟的临床诊断与治疗[J].养殖技术顾问,2010,01（08）:171. 吉力力,苏战强,王金泉,等.新疆托克逊县小鹅瘟的诊断与治疗[J].畜牧与兽医,2015,47（08）:162. 邹跃.一例小鹅瘟病的诊断与治疗[J].畜禽业,2011,02（08）:86-87. 有较好的疗效。一般情况下，小鹅瘟主要会采取高免血清进行治疗，但治愈率并不理想，相关文献表明此方法治疗小鹅瘟，治愈率为45%～60%[3]。而本研究中1405只患鹅，经盐酸林可霉素注射液治疗后，除64只死亡，均得到治愈，治愈率高达91%。此外，在用药期间还要加强消毒工作，对场地、料槽等进行有效消毒，病死鹅可进行深埋处理，预防病情进一步扩散。 综合来看，盐酸林可霉素注射液用作禽类病毒性疾病如小鹅瘟，的确能得到较好的疗效，值得推广。■（编辑：狄慧） 安全用药 禽流感病毒（AvianInfluenzaVirus,AIV）是正黏病毒科，流感病毒属，单链负股分阶段RNA病毒[1]。禽流感病毒的亚型众多，病毒表面糖蛋白血凝素（HA）有16种为H1-H16和神经氨酸酶（NA）有9种为N1-N9共9个亚型，HA和NA的抗原变异是相互独立的,各亚型之间缺乏交叉保护，同一亚型病毒有不同的变异株，所有亚型的病毒均可以在这些宿主中分离到，野生鸟类是其天然宿主[2]，禽流感病毒根据其致病性分为高致病性和低致病性，H5N1为高致病性禽流感病毒。禽流感的发生给养禽业带来的经济损失不可估量，同时还严重威胁到人类的身体健康，因此控制禽流感病毒尤为重要。我国主要采取“扑杀与强制免疫相结合”的综合防制措施，取得比较理想的预防与防制的效果。目前国内有多家企业生产H5亚型禽流感灭活苗，为了解不同疫苗的免疫效果，提高疫苗的保护水平，本次比对实验选择A、B、C、D、E、F六种禽流感重组二价灭活疫苗分别免疫鸡群，并制定了严格的免疫程序，免疫后定期检测血清的HI抗体效价，观察不同企业生产的六种疫苗免疫鸡群后鸡体内产生抗体的消长规律及差异，为我市防疫工作提供科学依据。1材料与方法1.1试验材料 96孔V型微量血凝板、可调微里移液器，微量振荡器、普通离心机、1%红细胞悬液、0.85%生理盐水。1.2试剂 H5禽流感病毒抗原和H5禽流感病毒阳性血清，由哈尔滨维科生物技术开发公司生产。1.3试验疫苗 基金项目：2014年江苏省农业三新工程资金项目，项目编号：SXGC［2014］142。 14日龄母 源抗体水平平均值（log2）4.034.23 禽流感重组二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株），来自不同生产企业，分别为：“A疫苗”，“B疫苗”“C疫苗”，，“D疫苗”，“E疫苗”“F疫苗”。1.4试验鸡群和方法 试验在淮安市四个鸡场实施，分别为XY场、HZ场、HA场、JH场。每个养鸡场自由选择两种H5亚型禽流感疫苗对鸡场进行高致病性禽流感免疫。试验动物：每个鸡场整栋中的鸡群分成二组，每组约1000只鸡左右，XY场用“A疫苗”和“B疫苗”免疫二组雏鸡；HZ场用“C疫苗”和“D疫苗”免疫二组雏鸡；HA场用“E疫苗”和“F疫苗”免疫二组雏鸡；JH场“C疫苗”和“E疫苗”免疫二组雏鸡。鸡场在雏鸡15日龄进行首免，颈部注射0.5mL/只，首免后每隔一周进行一次抗体检测水平(首免后第一周、第二周、第三周共三次)；首免21d后进行第二次免疫，第二次免疫以后继续每隔一周监测一次抗体，抗体水平达到峰值时每隔4周监测一次抗体，直到下次强化免疫开始时结束抗体监测。1.5血凝（HA）与血凝抑制（HI）试验方法 采用中华人民共和国国家GB/T18936-2003《高致性禽流感诊断技术》。2试验结果 4个鸡场在首免前14日龄都进行了母源抗体水平监测，14日龄母源抗体水平平均值在3.97～4.23（log2）之间，雏鸡在14日龄前都具体相对好的抗体保护水平。4个养鸡场母源抗体水平、首免和二免抗体水平平均值具体检测数据见表1～5。3讨论 1）XY鸡场选择A疫苗和B疫苗进行免疫（见表1）首免后两种疫苗1周 后抗体滴度基本相同，2周后A疫苗抗体上升明显，第2周抗体水平已经高达5以上，具有很好免疫保护作用，B疫苗2周抗体水平略有下降，两种疫苗首免后第2周后抗体滴度 二免 日龄 1周 3636 7.537.9 二免抗体水平平均值（log2）2周9.99.53 3周1010 4周1010 8周1010 12周16周9.89.789.65 20周9.4 表1 XY场禽流感HI抗体检测数据 疫苗A疫苗B疫苗 批 号 检测方法 样本数8080 首免日龄1515 首免抗体水平平均 值（log2）1周4.134.03 2周5.333.9 3周7.316 140840301HA＼HI20141006 HA＼HI 9.689.53 表2 HZ场禽流感HI抗体检测数据 疫苗C疫苗 批 号2014028 检测方法HA＼HI 样本数16080 14日龄母源抗体水平平均值（log2）4.094.11 首免日龄1515 首免抗体水平平均 值（log2）1周1.790.93 2周0.570.03 3周5.081.65 3636二免日龄 1周6.935 二免抗体水平平均值（log2）2周8.2 3周 4周 8周12周16周20周 9.4 8.586.98 8.98.087.4 D疫苗140170301HA＼HI7.037.77.655.69.386.956.75 23 安全用药 表3 HA场禽流感HI抗体检测数据 疫苗E疫苗F疫苗 批 号2014092201432 检测方法HA＼HIHA＼HI 样本数8080 14日龄母源抗体水平平均值（log2）3.983.97 首免日龄1515 首免抗体水平平均 值（log2）1周00 2周3.375.33 3周4.76.9 二免日龄3636 1周8.99.08 二免抗体水平平均值（log2）2周8.959.6 3周99.5 4周8周9.019.79.229.7 12周7.28.65 16周8.28.5 20周8.68.9 表4 JH场禽流感HI抗体检测数据 疫苗E疫苗C疫苗 批 号20141102014028 检测方法HA＼HIHA＼HI 样本数80160 14日龄母源抗体水平平均值（log2）4.014.09 首免日龄1515 首免抗体水平平均 值（log2）1周2.61.79 2周2.830.57 3周1.935.08 二免日龄3636 1周6.46.93 二免抗体水平平均值（log2）2周8.258.2 3周8.98.9 4周8周9.239.58.087.4 12周9.449.4 16周8.838.58 20周8.36.98 表5 各疫苗免疫效果检测数据汇总表 疫苗A疫苗B疫苗C疫苗D疫苗E疫苗E疫苗F疫苗 批 号14084030120141006201402814017030120140922014110201432 检测方 法HA＼HIHA＼HIHA＼HIHA＼HIHA＼HIHA＼HIHA＼HI 样本数808016080808080 14日龄母源抗体水平平均值（log2） 4.034.234.094.113.984.013.97 首免日龄15151515151515 首免抗体水平平均 值（log2）1周4.134.031.790.9302.60 2周5.333.90.570.033.372.835.33 3周7.3165.081.654.71.936.9 36363636363636二免日龄 1周7.537.96.9358.96.49.08 二免抗体水平平均值（log2）2周9.99.538.27.038.958.259.6 3周10108.97.798.99.5 4周10108.087.659.019.239.22 8周10107.45.69.79.59.7 12周9.89.789.49.387.29.448.65 16周9.689.658.586.958.28.838.5 20周9.539.46.986.758.68.38.9 两者相差1（log2）滴度以上，两种疫苗差异明显。二免后抗体水平两组都急剧上升，二免第3周抗体滴度达最高值，12周后稍有降低，但是仍维持在较高的抗体水平，两种疫苗在二免后抗体滴度没有显著差异。两种疫苗免疫效果均较好、抗体水平较为整齐。 2）HZ鸡场用C疫苗和D疫苗进行免疫（见表2），首免后2周内两种疫苗的抗体水平下降明显，呈渐下降趋势，3周后C疫苗抗体滴度明显高于D疫苗3.43（log2）抗体滴度。二免后C疫苗抗体上升幅度大，增长速度明显比D疫苗快，两种疫苗抗体水平前三周相差有至少1（log2）滴度，两组疫苗存在明显差异。 3）HA鸡场用E疫苗和F疫苗进行免疫（见表3），首免后鸡群出现抗体滴度下降，1周抗体水平为0，到第2周才产生抗体，F疫苗首免后第2周、3周抗体高出E疫苗2（log2）滴度，首免情况两种疫苗存在显著差异。二免后两种疫苗产生的抗体明显增长，高出首免2（log2）滴度以上，到第8周达到高峰，二免后两种疫苗的抗体增长水平基本相同，无明显差异。 4）JH鸡场用E疫苗和C疫苗进行免疫（见表4）,首免后的1-2周内，两种疫苗抗体滴度都不高，但是3周后的E疫苗的抗体滴明显低于C疫苗，两种疫苗首免后抗体水平稍有差异。二免后两种疫苗的抗体增长趋势明显，E疫苗抗体上升幅度大于C疫苗，而且高峰值维持的时间也比C疫苗长。 ５）由表5可知，A疫苗首免后抗体水平快速上 升，免疫效果显著，二免后3周抗体滴度达到10 （log2），12周后抗体滴度才略有下降；B疫苗首免后第1、2周抗体滴度相近，第3周抗体滴度与A疫苗有一点差异。二免后A疫苗和B疫苗抗体水平基本相同，没有明显差异，抗体水平都很高，对鸡群都有较强的免疫保护作用；F疫苗首免后第一周没有抗体，略逊于A疫苗，第2周、3周抗体水平与A疫苗基本相同，二免后抗体滴度平均在9（log2）左右与A疫苗和B疫苗也没有明显的差异；E疫苗（2014092）和C疫苗首免后2周抗体水平都低，2周后抗体滴度E疫苗（2014092）高于C疫苗，到第3周抗体水平基本相同，差异不明显，相比较前三种疫苗有显著差异；D疫苗和E疫苗（2014110）首免后抗体滴度很低，二免后抗体滴水平增长明显，达到保护鸡群的水平，但是E疫苗（2014110）抗体滴度明显高于D疫苗，二者相比E疫苗（2014110）免疫效果显著些；E疫苗（2014110）和E疫苗（2014092）同一厂家不同批次的疫苗，首免后E疫苗（2014092）产生的抗体滴度明显高于E疫苗（2014110），二者有明显差异，二免抗体水平基本相同，说明同一厂不同批号的疫苗，免疫效果也存在一定的差异。■（编辑：狄慧）参考文献： [１][２] 甘孟侯,禽流感（第二版）[M].北京：中国农业出版社,2002.Fouchier,R.A.,etal.,CharacterizationofanovelinfluenzaAvirushemagglutininsubtype(H16)obtainedfromblack-headedgulls[J].JVirol,2005.79(5):p.2814-22.