变态反应患者过敏原体外检测与分析

变态反应患者过敏原体外与 齐齐哈尔医学院学报2008年第29卷第15期·1807· 变态反应患者过敏原体外检测与分析 涂海健　谢志勇　林宏志　胡为群　卓俊瑞　戴文森 【摘要】　目的　探讨变态反应性疾病患者外周血清中总IgE和过敏原特异免疫球蛋白E(sIgE)的情况以及它们的相互关系。　采用德国Mediwiss公司生产过敏原检测系统以免疫印迹法定量检测血清中总IgE和过敏原特异性sIgE抗体。结果　272例变态反应性疾病患者在吸入组总IgE阳性检出率86.8%(236/272),食物组总IgE阳性检出率为26.1%(71/272);过敏原特异性抗体sIgE阳性检出率为80.5%(219/272),检出2种和2种以上sIgE阳性率为60.3%(164/272);189人检测到吸入组过敏原,64人检测到食物组过敏原,36人为吸入组和食物组混合过敏原。吸入组过敏原检出阳性项次共357项,最常见的过敏原为户尘螨,阳性率为44.1%(120/272),其次为猫毛皮屑、狗毛皮屑组合26.8%(73/272),蟑螂24.6%(67/272)和树花粉组合15.4%(42/272;,食物组检出阳性项次共74项,主要食物组过敏原阳性检出率依次为蟹、虾9.2%(25/272)、羊肉7.4%(20/272)、腰果3.7%(10/272)、小麦、2.6%(7/272)。对主要致病过敏原特异性sIgE浓度(分级)分析,户尘螨4～6级阳性检出率显著高于其它过敏原(P<0.01)。结论　体外总IgE和过敏原特异免疫球蛋白E(sIgE)检测,可以为临床确认过敏性体质、寻找相应过敏原、为变态反应性疾病的预防、诊断和治疗提供依据。 Vitrotestandanalysisofallergenofpatientswithallergicdisease　TUHai-jian,etal.　(TheHospitalAffiliatedtoPUTIANcollege1.DepartmentofClinicalLaboratory,2.DepartmentofDermatology,3.DepartmentofENT,4.DepartmentofPediatrics,5.DepartmentofRespiratory.Putian,fujian,351100,CHINA) 【Abstract】　Objective　Toinvestigatethecorrelationofallergyandtheserumlevelsofallergen-specificIgE(sIgE)andtotalIgEinthepatientswithallergydisease.Methods　Theserumlevelsofaller-gen-specificIgE(sIgE)andtotalIgEweredetectedbyWesternBlot,andAllergyScreenAnalyticGmbHtestsystemwasappliedtotestbyMediwisscompanyofGerman.Results　ThepositiverateoftotalIgEofaeroallergergroupandfoodallergergroupwere86.8%,26.1%,respectively.ThetotalpositiverateofsIgEwere80.5%(219/272),While,Twoandmorepositiveofallergers-sIgEwere60.3%amongthe272cases.Itwasalsoshowedthat189caseswereaerollergen-positive,64caseswerefood-allerger-positive,and36caseswerebothaeroandfood-allergen-positive.Thehighestpositiverateofallergenwashouse-dustmites44.1%(120/272),Nextwascat-doghair26.8%(73/272),cockroach24.6%(67/272),trees-pollens15.4%(42/272)amongaeroallergergroupof357positivetest。Whileinfoodal-lergergroup,themostcommonallergenwascrab-shrimp9.19%(25/272),mutton7.35%(20/272),cashew3.68%(10/272)andwheat2.57%(7/272).Moreover,Thelevelofallergen-specificIgEofhouse-dustmiteswassignificantlyhigherthanthatofotherallergen(P<0.01).Conclusions　Invitrotestandanalysisofallergenofpatientswithallergicdiseasecanhelpustofindrelevantallergenandtoconfirmallergenconstitutionofpatients,andprovidefoundationofthepreventionandtreatmentofallergicdis-ease. 【Keywords】　Allergicdisease　allergen　allergen-specificIgE　WesternBlot　　随着工业化的进展、环境污染加重和饮食结构改变等因素的影响,变态反应性疾病有逐年增多的趋势,调查表明,全世界有25%以上的人受变态反应性疾病困扰[1],因此,变态反应性疾病防治研究引起人们的极大的关注[2]。为了解变态反应性疾病患者外周血清中总IgE和过敏原特异性IgE抗体在变态反应性疾病中的意义,我们采用免疫印迹法对患者血清进行吸入性和食物性的过敏原特异性IgE抗体及总IgE进行检测和分析,现将结果如下。1　材料与方法1.1　研究对象　为我院2006年2月～2008年3月门诊及住院的变态反应性疾病患者,共272例,男160例,女112例,年龄8月至72岁,病程1天至13年,其中荨麻疹105例、湿疹34例、接触性皮炎31例、过敏性鼻炎患者62例、支气管哮喘40例,所有病例经临床确诊。1.2　仪器与试剂　德国Mediwiss公司生产AllergyScreen 作者单位:莆田学院附属医院 邮-AnalyticGmbH过敏原检测系统;专用阅读仪(RAPIDREADER)等。AllergyScreenPanel4吸入组过敏原检测条包括的过敏原及编码:户尘螨D1、矮豚草W1、蒿W6、葎草W22、猫毛皮屑、狗毛皮屑E1,E5、蟑螂I6、柏T23、霉菌组合(点青霉、分枝孢霉、烟曲霉、交链孢霉)Mx1、树花粉组合(栎、榆、梧桐、柳、三角叶杨)Tx4、总IgE。AllergyScreenPanel5食物组过敏原检测条包括的过敏原及编码:鸡蛋白、蛋黄F245、牛奶F2、鱼F3、蟹、虾F23,F24、牛肉F27、羊肉F88、腰果F202、花生、黄豆F13,F14、小麦F4、总IgE。 1.3　检测方法　抽取患者静脉血3ml,4000G/转10min分离血清,取250ml与吸附有特异性过敏原的硝酸纤维素膜于反应槽内室温孵育45min,洗涤后加入250ml标记了生物素的抗人IgE抗体,室温孵育45min,洗脱未结合的二抗,加入结合有碱性磷酸酶标记的链霉亲和素,在室温孵育20min,洗去未结合酶,加入250ml底物孵育20min显色,后用流水冲洗,终止底物酶反应,完全干燥,通过德国Mediwiss公司生产 ·1808· AllergyScreenAnalyticGmbH过敏原检测系统检测,计算出每种过敏原的浓度数值(IU/mL)和分级。1.4　结果判断　过敏原特异性IgE抗体检测结果按其浓度定量进行0～6分级如下:0级:<0.35KU/L;1级:0.35～0.75KU/L;2级:0.75～3.5KU/L;3级:3.5～17.5KU/L;4级:17.5～50KU/L;5级:50～100KU/L;6级:>100KU/L。1级以上即>0.35KU/L为阳性。1.5　统计学方法　数据分析采用SPSS12.0软件,计数资料以率表示,率的比较采用卡方检验P<0.05为差异有统计学意义。2　结果2.1　血清中总IgE和过敏原特异性sIgE抗体检测　采用免疫印迹法对272例变态反应性疾病患者血清进行吸入性和食物性的过敏原特异性sIgE抗体及总IgE进行检测,检测结果CCD相机照相读取,显色深浅与血清中sIgE及总IgE含量成正比,见图1 。 JournalofQiqiharMedicalCollege,2008,Vol.29,No.15 60.3%(164/272);吸入组过敏原检出阳性项次共357项,189 人检测到吸入组过敏原,食物组检出阳性项次共74项,共64人检测到食物组过敏原,36人为吸入组和食物组混合过敏原。2.3　各种过敏原特异性sIgE检出率　检出的阳性过敏原特异性sIgE中,最常见的过敏原为户尘螨,阳性率为44.1%(120/272),其次为猫毛皮屑、狗毛皮屑组合26.8%(73/272),蟑螂24.6%(67/272)和树花粉组合15.4%(42/272);主要食物组过敏原阳性检出率依次为蟹、虾9.2%(25/272)、羊肉7.4%(20/272)、腰果3.7%(10/272)小麦、2.6%(7/272)。其它过敏原特异性IgE抗体阳性检出率见图2 。 图2各种过敏原特异性sIgE抗体阳性检出率 图1:免疫印迹法检测结果图中显色深浅与血清中sIgE及 总IgE含量成正比 2.2　总阳性率　272例变态反应性疾病患者在吸入组总IgE阳性检出率86.8%(236/272),食物组总IgE阳性检出率为26.1%(71/272);过敏原特异性sIgE抗体阳性总检出率为80.5%(219/272),检出2种和2种以上sIgE抗体阳性率为 2.4　主要致病过敏原特异性sIgE浓度(分级构成比)检测情 况　吸入组过敏原中主要致病过敏原特异性sIgE浓度4～6级阳性检出率依次为户尘螨>蟑螂>猫毛皮屑、狗毛皮屑组合>树花粉组合;食物组4～6级阳性率依次为腰果>羊肉>蟹、虾。吸入组过敏原4～6级总阳性率44.4%(134/302)显著高于食物组12.7%(P<0.01);户尘螨4～6级阳性检出率显著高其它主要致病过敏原(P<0.01)。见表1。 表1　主要致病过敏原特异性sIgE浓度(分级构成比)检测情况 　　户尘螨D1(n=120)　　　　猫毛皮屑、狗毛皮屑E1,E5(n=73)　　　　　　蟑螂I6(n=67)　　　　 阳性例数阳性率%阳性例数阳性率%阳性例数阳性率% 1～3级4033.35169.94364.2 ＊分级　　树花粉组合Tx4(n=42)　　　　　羊肉F88(n=25)　　　　　　蟹、虾F23,F24(n=20)　　　　腰果F202(n=10)　　 阳性例数阳性率%阳性例数阳性率%阳性例数阳性率%阳性例数阳性率% 3481.02496.01785.0770.0819.014.0315.0330.0　　注:＊户尘螨4～6级阳性检出率显著高其它主要致病过敏原(P<0.01)。 分级 3　讨论 变态反应性疾病是一种常见病,其病因除了患者本身的遗传背景、过敏体质以外,过敏原的作用是关键,明确过敏原是诊断与治疗变应性疾病的首要问题,同时,过敏原诱导机体产生特异性sIgE、靶细胞致敏、过敏介质产生和释放、效应器官的反应共同构成一个级联反应体系,其中IgE处于核心环节[3]。因此,sIgE测定成为目前公认的检测过敏原导致Ⅰ型变态反应的最有效手段之一[4]。 我们采用德国Mediwiss公司生产过敏原检测系统以免疫印迹法定量检测变态反应性疾病患者血清中总IgE和过敏原特异性sIgE抗体,试验结果显示,272例变态反应性疾病患者过敏原特异性sIgE抗体,其阳性检出率高达80.5%,2种和2种以上sIgE抗体阳性率为60.3%,混合吸入组和食物组过敏原sIgE抗体阳性13.2%。表明该方法具有较高的阳性检出率以及变态反应性疾病存在致敏状态,可多种过敏原要地位,吸入组总IgE阳性检出率86.8%,食物组总IgE阳性检出率为26.1%,吸入组过敏原检出阳性项次共357项,189人次(69.5%)检测到吸入组过敏原,这与国外报道[5]变态反应性疾病54%～69%是由吸入性过敏原引起的基本一致。最常见的过敏原为户尘螨,阳性率为44.1%(120/272),其次为猫毛皮屑、狗毛皮屑组合26.8%(73/272),蟑螂24.6%(67/272)和树花粉组合15.4%(42/272)。国外对屋尘螨 [6] 的生态及其致敏性进行研究认为温度和湿度是影响尘螨生存的两大因素,17～30℃为尘螨生存的最适温度,这与所研究的地区温暖潮湿适合屋尘螨生存相一致,其它吸入性过敏原可能与农村的家畜、卫生条件相对较差,城市中养宠物增多以及季节性的环境改变有关。 食物组检出阳性项次共74项,64人检测到食物组过敏原,主要食物组过敏原阳性检出率依次为蟹、虾9.19%(25/272)、羊肉7.35%(20/272)、腰果3.68%(10/272)小麦2. 齐齐哈尔医学院学报2008年第29卷第15期·1809· 半导体激光治疗活髓牙全冠牙体预备后牙本质敏感的临床观察 李向新　宋雅能 【摘要】　目的　研究半导体激光治疗全冠牙体预备后牙本质敏感的临床效果。方法　将60例患者共计99颗活髓牙经金属烤瓷全冠牙体预备后随机分为三组,其中激光组预备体采用半导体激光分区照射180s;脱敏剂组预备体使用MS-COAT脱敏剂脱敏2次;对照组不处理;然后均用间接法制作临时冠,氧化锌丁香油水门汀粘固。最后分别测试牙体预备后10天的冷诊NRS值、电刺激痛感觉阈值。结果　激光组的冷诊NRS值(3.76±1.65)和电刺激痛感觉阈值(16.43±3.44)和脱敏剂组的冷诊NRS值(3.83±1.73)和电刺激痛感觉阈值(17.21±4.12)均小于对照组的冷诊NRS值(5.48±1.80)和电刺激痛感觉阈值(13.56±3.26),差异均有显著性(P<0.05),而激光组和脱敏剂组无统计学差异(P>0.05)。结论　半导体激光能有效的治疗金属烤瓷全冠牙体预备后的牙本质敏感。 【关键词】　牙本质过敏　半导体激光　MS-COAT　脱敏剂　义齿修复术Comparativestudyofsemiconductorlaseronpostoperationhypersensitivityinvitalteethpreparationforcrownrestoration　LIXiang-xin,etal.　(TheFirstPeople'HospitalofLianyungang,JiangSu22202,China) 【Abstract】　Objective　Toevaluatetheclinicaleffectsofsemiconductorlaseronpostoperationhy-persensitivityinvitalteethpreparationforcrownrestoration.Methods　Atotalof98teethfrom60pa-tientswithdentinhypersensitivityaftervitaltoothpreparationwereforcrownrestorationweredividedin-tothreegroups,andtreatedbythethreedifferentmethods.Lasergroupwasirradiationbysemiconductorlaserfor180s.DesensitizergroupwasdaubedwithMS-COATfor2times.Nodisposalservedascon-trolgroup.Allpreparedteethwereprotectwithtemporaryrestorations,whichwerecementedwithzincoxideeugenolpaste.TendayslatertestNRSvaluebygivingcrymo-stimulusandthresholdsofpainfulfeelingbygivingelectricstimulationv.Results　TheNRSvalueandthethresholdsofpainfulfeelingofbothlasergroup(3.76±1.65;16.43±3.44)anddesensitizergroup(3.83±1.73;17.21±4.12)weresignificantlydifferentfromthatofthecontrolgroup(5.48±1.80;13.56±1.26).Therewasnosignifi-cantdifferencebetweenlasergroupanddesensitizergroup.Conclusions　Semiconductorlaserisaneffec-tiveandconvenienttechniquefortreatingpostoperationhypersensitivityinvitalteethpreparationforcrownrestoration. 【Keywords】　Dentinhypersensitivity　semiconductorlaser　MS-COAT　Desensitizer　dentalprosthesis 　　金属烤瓷全冠修复体在牙体预备时为了开辟足够的修复 作者单位:江苏省连云港市第一人民医院口腔科通讯作者:李向新,E-mail:zglygjl@163.com邮　　编　222002　　收稿日期　2008-04-30 体空间和取得就位道,需要切割大量牙体组织,导致大约有(1 7[1] -2)×10个牙本质小管暴露,使预备牙对外界机械、化学、温度刺激敏感,甚至诱发牙髓炎症。目前临床上已采用脱敏剂处理牙体预备后的基牙,这样既可以减轻患者痛苦,也可 AppI,2001,756(1-2):41-55 [2]　ScalabrinDM,Davbeks,PerzanowskiMS,etal.Useofspecific IgEinAssessingtherelevanceoffungalanddustmiteallergens toatopicdermatitis:acomparisonwithasthmaticandnonasth-maticcontrolsubject[J].JAllergyClinImmunol,1999,104(6):1273-1279 [3]　LehrerSB,ReishR,FemandesJ.etal,Enhancementofmurine IgEantibodydetectionbyIgGremoval[J].JImmunoeMeth-odes,2004.284(1-2):1-6 [4]　PlebaniM.ClinicalvalueandmeasumentofspecificIgE[J].ClinBiochem,200336(6):453-469[5]　PaganelliR,AnsoteguiIJ,SastreJ,etal.SpecificIgEantibodiesinthediagnosisofatopicdisease.Clinicalevaluationofanewin vitrorestsystem,UniCAP,insixEuropeanallergyclinics[J].Allergy,1998,53 [6]　KorsgaardJ,HarvingH.House-dustmitesandsummercotta-ges[J].Allergy,2005,60(9):1200-1203[7]　孙宝清,韦妮莉,王红玉等。变态反应性疾病患螨和蟑螂过敏原 J]6:1显关系,因本地区地处沿海,居民多喜爱蟹、虾和鱼等海产品。 但以羊肉、腰果、小麦等北方地区为主食物的过敏原在食物组中也有较高检出率。这可能随社会人口流动增强以及本地区人们食物结构改变等有关。 对主要致病过敏原特异性sIgE浓度(分级)分析,吸入组过敏原4～6级阳性率高于食物组(P<0.01),户尘螨4～6级阳性检出率显著高其它过敏原(P<0.01)。孙宝清等在研究户尘螨和蟑螂过敏原时,同样发现户尘螨所致过敏患者特异性sIgE抗体强度比蟑螂等过敏原高,具体原因有待进一步研究。 综上所述,体外总IgE和过敏原特异免疫球蛋白E(sIgE)检测,可以为临床确认过敏性体质、寻找相应过敏原;了解本地区主要致病过敏原分布情况,为变态反应性疾病的预防、诊断和治疗提供依据。 参　考　文　献 [1]　PoulsemLK,Invivoandvitrotechniquestodeterminethebio-[].S[7]