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急性白血病免疫分型

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急性白血病免疫分型null讲座讲座 急性白血病 免 疫 学 分 型     急性白血病的免疫分型    急性白血病的免疫分型 MICM分型: 细胞形态学(包括细胞组化)为基础, 细胞免疫学(免疫表型)为主体, 细胞遗传学为辅助, 分子生物学为补充的原则。 免疫学分型对ALL更重要。 免疫学与FAB分型可不一致。  白血病免疫分型原理   白血病免疫分型原理 白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的性质与正常白细胞的抗原性质相同,目前...
急性白血病免疫分型
null讲座讲座 急性白血病 免 疫 学 分 型     急性白血病的免疫分型    急性白血病的免疫分型 MICM分型: 细胞形态学(包括细胞组化)为基础, 细胞免疫学(免疫型)为主体, 细胞遗传学为辅助, 分子生物学为补充的原则。 免疫学分型对ALL更重要。 免疫学与FAB分型可不一致。  白血病免疫分型原理   白血病免疫分型原理 白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的性质与正常白细胞的抗原性质相同,目前尚未发现特异的白血病抗原。 但白血病细胞可能具有: 1.特异性的联合抗原; 2.某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上,而正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见。 ——这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群CD(cluster designations). 白血病免疫分型原理 白血病免疫分型原理白血病免疫分型的意义: 1。有助于白血病亚型的诊断,特别对用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源时及杂合性白血病; 2。指导临床治疗; 3。有助于判断白血病的预后; 4。可进行疾病的监测如MRD检测。    细胞系列抗原的表达     ---B细胞系抗原    细胞系列抗原的表达     ---B细胞系抗原B细胞根据发育阶段可分为: B祖细胞 TdT、CD34、HLA-DR  前B细胞(可再分为前前B、前B)TdT、CD34、CD10、CD19、CD24  未成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22  成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22  活化B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22  浆细胞 CD38    细胞系列抗原的表达     ---T细胞系抗原    细胞系列抗原的表达     ---T细胞系抗原T细胞发育的路径为: 骨髓(骨髓祖细胞→前胸腺细胞,亦称T祖细胞) --→胸腺(早→中→晚) --→外周血(成熟) 骨髓T祖细胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+ CD7出现最早并贯穿于T细胞发育全程      T细胞系抗原      T细胞系抗原 T 细胞进入胸腺后: (早) CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-  (中)CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-  (晚)CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+,     CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+ CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+   进入血液及淋巴结       T细胞系抗原      ---外周血T细胞      T细胞系抗原      ---外周血T细胞血液中T细胞主要有以下亚型: 1.CD3+、CD4+、CD8- —辅助性T细胞/诱导性T细胞,TH/TI 占T细胞总数的60-70% 2.CD3+、CD4-、CD8+ —抑制性T细胞/细胞毒性T细胞,TS/TC, 占T细胞总数的20-30% 3.CD3+、CD4+、CD8+ — 占T细胞总数的1-3% 4.CD3+、CD4-、CD8- — 占T细胞总数的1-10%     T细胞系抗原      ---CD4+T细胞亚群     T细胞系抗原      ---CD4+T细胞亚群1.根据产生淋巴因子的差异分为:   TH1—产生 IL-2、IFN-γ、TNF-β   TH2—产生 IL-4、IL-5、IL-6、IL-10 2.根据功能分为:   TSI(suppressor inducer T-cell)   —诱导TS功能,CD31+、CD45RA+   THI(helper inducer T-cell)   —辅助B细胞产生抗体,CD31-、CD45RO+ 3.分为记忆T细胞、天然T细胞、活化T细胞 天然T细胞 记忆T细胞 活化T细胞 天然T细胞 记忆T细胞 活化T细胞        髓系抗原       髓系抗原根据髓系抗原表达大致分为7类: 1.粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原: CD13、CDw17、CD32、CD87、 CD88、CD89、CDw92、CD93、 CD156、CD157、CD163。 2.以粒细胞为主,也存在于单核细胞上的抗原: CD15、CD65。 3. 以单核细胞为主,也表达在粒细胞上的抗原: CD14、CD33。       髓系抗原       髓系抗原 3.基本只表达在单核细胞上的抗原: CD16、CD64、CD68、CD91、CDw136、CD155。 基本只表达在粒细胞上的抗原:CD16b、CD66。 4.造血干、祖细胞抗原:CD34、CD90。 5.其他髓系相关抗原:主要存在于其他系细胞上, 髓系细胞上也有表达:CD4、CD7、CD9、CD10、 CD11b、CD11c、CD31、CD36、CD38 6.血小板相关抗原:CD36、CD41、CD42、CD61、CD62。 7.. 红细胞抗原: CD36、GPA      ALL免疫分型     ALL免疫分型从70年代开始试图进行免疫学分型: 1986年前五分法 1986年后两大类九分法 1994年四型21类法     ALL免疫分型       --五分法:     ALL免疫分型       --五分法:五分法: Common型 未分化型  T细胞型   前B细胞型  B细胞型 表型 DR/CD9/CD10+ 复杂 CD2/CD5+ CyIg SmIg+ 发生率:国外 60-70% 30% 15-25% 2--3% 2--3% 国内 50% 30% 20% 0.5% 1.5% 预后: 儿童 最好 次之 再次 最次 最次 成人 次之 再次 最好 最次 最次      ALL免疫分型      --两类九型法: 非T亚型 HLA-DR CD9 CD10 CD20 μ链 SmIg 发生率% I + - - - - - 5 II + + - - - - 15 III + + + - - - 30 IV + + + + - - 50 V + + +/- +/- + - <5 VI + + - + - + <2      ALL免疫分型      --两类九型法: 非T亚型 HLA-DR CD9 CD10 CD20 μ链 SmIg 发生率% I + - - - - - 5 II + + - - - - 15 III + + + - - - 30 IV + + + + - - 50 V + + +/- +/- + - <5 VI + + - + - + <2      ALL免疫分型      --两类九型法     ALL免疫分型      --两类九型法T亚型 CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8  CD1a 发生率 I + + + - - -  - 55 II + + + +25% +90% +90% + 25 III +  +  + + + # + # - 20 #:二者之一阳性 ALL免疫分型 --四型21类法 ALL免疫分型 --四型21类法第一型:裸型- 未分化型,干细胞型 第二型:纯型- Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3,         Pre-B4,B,T1,T2,T3 第三型:变异型-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-4/CD15+,         PRE-B1-4/T+,T1-4/My+,         T1-4/CD15+,T1-4/B+ 第四型:多表型-Pre-B1-4/M+,T1-4/M,         Pre-B+T,Pre-B+T+M. ALL免疫分型 --FAB的MIC分型 ALL免疫分型 --FAB的MIC分型 B-ALL CD19 TdT DR CD10 CyIg SmIg FAB亚型 早期前B + + + - - - L1,L2 t(4;11) t(9;22) 普通-ALL + + + + - - L1,L2 6q- 近单倍体 t/del(12p) t(9;22) 前B-ALL + + + + + - L1 t(1;19) t(9;22) B-ALL + + - +/- +/- + L3 t(8;14) t(2;8) t(8;22) 6q- ALL免疫分型 --FAB的MIC分型 ALL免疫分型 --FAB的MIC分型 T-ALL CD7 CD2 TdT FAB亚型 早期前T + - + L1,L2 t/del(9q-) T-ALL + + + L1,L2 t(11;14) 6q- 白血病系列积分方法 白血病系列积分方法  1.单表型:某个系列积分大于2分,其他系列为0分:        纯B-ALL,纯T-ALL,纯AML(M0-5),纯AML-M6,纯AML-M7。  2.表达某一系列抗原为主型:某一个系列积分大于2分,伴另一系列抗原的      表达,但小于或等于2:      1、My+-B-ALL,My+-T-ALL, My+:CD13+/14+/33+和15±, 2、CD15+B-ALL,CD15+T-ALL, CD15+:CD15+(CD13/14/33-)      3、CD2+ B-ALL CD5+ B-ALL CD7+B-ALL, 4、CD20+T-ALL CD24+T-ALL 5、Ly+AML。 3. 双表型:至少二个系列积分大于2分: B-ALL-粒单型(形态ALL),B-ALL-粒单型(形态AML), T-ALL-粒单型(形态ALL),B-ALL-粒单型(形态AML)。 4. 未分化型,所有系列积分均小于或等于2。 急性白血病免疫学 系列分型的积分 急性白血病免疫学 系列分型的积分方案分数 B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 M/cCD22 M/cCD3 MPO CD41 CD42 血型蛋白A cCD79a M/cTCRα/β Ccd13 CD61 RhD HbF cμ sIg M/cTCRγ/δ FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117       免疫学分型     与FAB AML分型的相关性      免疫学分型     与FAB AML分型的相关性M1:CD34+、MPO+、DR+、TdT+、CD33+、CD13+、CD15-、CD11b-、 无 淋、红、巨核系抗原 M2:CD34+、CD33+、CD13+、DR+、CD15+ M3:CD33+、CD13+、DR-、CD34- M4:CD34+ 、CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M5:CD34+ CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M6:血型糖蛋白+、CD34-,DR-、CD33-、CD13-、CD15- M7:CD34+、CD33+、DR+、CD41+、CD42+、CD61+ M0:FAB:形态学为L2型,MPO、SBB组化阴性,淋系抗原阴性,CD33、CD11、CD15 及antiMPO单抗阳性。    细胞系列抗原的表达 ---B细胞系抗原   细胞系列抗原的表达 ---B细胞系抗原 HLA-DR意义 在白血病分型中,HLA-DR特异性较差, 除B系外,HLA-DR在急非淋、成人T细胞白血病亦表达, 但如DR+,加上CD5-、CD7-则99%为B系。90%B系ALL表达CD10。 与AL预后有的抗原 与AL预后有的抗原 1。CD34: 强表达者预后差,特别是复发时CD34增强是最有意义的免疫学表型改变,CD34常与一些预后差的因素共存时有相加的作用,与CD34与Pgp或DR共存的患者,比单表达其中一个抗原的患者完全缓解率明显降低。 与AL预后有的抗原 与AL预后有的抗原 2。Pgp: 表达者 1、预后较差, 2、常出现耐药现象, 3、常与预后不良的因素如CD34、 CD56相伴随。 与AML预后有的抗原 与AML预后有的抗原 3。髓系抗原 表型越不成熟预后越差, CD33/CD15/CDw65低表达的AML一般提示治疗无反应或/和生存期较短。 与AL预后有的抗原 与AL预后有的抗原4。My+ALL:CR率低 占ALL21.6%, My+ALL CR52.6%, My-ALL CR80%. 5。CD34+ALL: CR率较低, 占ALL53.6% CD34+ALL CR62%,CD34-ALL CR82.6%, CD34+My+ALL: CR率很低,CR33.3%, CD34-My-ALL83.3%, 6。Ph+ALL : CR率低,CR41%,Ph-ALL CR83.3% 与AML预后有的抗原 与AML预后有的抗原 6。Ly+AML: CR率低 占AML43%, CR46%,合并CD34+38%,PgP+15%, (其中CD2+AML7.7%,CD7+AML22%,CD19+13%), Ly-AML:CR73% 7。CD7+AML: CR率低, 占AML22%, 合并CD34+75%,PgP+55%,( M1:42%,M2:18%,M4:28%,M5:9%,M3:0%)CR35% 与AML预后有的抗原 与AML预后有的抗原 8。CD19+AML: CR率较低, 占AML13%,合并CD34+67%,PgP+33%,(M2:16%,M5:25%),CR50%。 9。CD2+AML: CR率较高, 占AML18%,合并CD34+57%,PgP+14%,(M3:36%,M5:13%),CR71%。 与AML预后有的抗原 与AML预后有的抗原10。MK+AML:CR率很低, 占AML12.8%, CR33%,其中HAL:45%,M5:24%,M2:14%,M3、M6不表达, 常伴CD34+、PgP+,WBC明显增高。 11。Ph+AML: CR率低, 占AML2—10%,见于M1,M2,M4,CD34高表达,缓解期短。 从分子水平看: bcr断裂点位于M-bcr,产物为P210---CML急变而来; bcr断裂点位于m-bcr,产物为P190---原发性AML。 杂合性急性白血病 杂合性急性白血病杂合性急性白血病(HAL)又称为混合性急性白血病(MAL)指白血病细胞表达一种系以上免疫标记的一组白血病,主要依靠免疫分型确诊。发生率占白血病的1.2%-1.5%,疗效差,预后不良。 分型 1。双表型:白血病细胞较均一,每个细胞同时表达淋巴系和髓系细胞的免疫学标志; 2。双克隆型:白血病细胞不均一,同时存在两种恶性克隆性细胞,一般一种表达淋巴系标志,一种表达髓系细胞标志; 3。双系细胞:与双克隆型相似,但这两部分白血病细胞系来自同一多能干细胞。并限定只有当两种细胞并存,或6个月之内相继发生,才属次型; 4。转换型:白血病细胞由一种表型在6个月以后转为另一种表型,现已不将次型称为HAL。 HAL目前多联合应用形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等手段来确定诊断。 HAL的淋系和髓系标志均大于标准,T、B淋巴细胞混合一般不作为HAL看。 系统标志积分达不到诊断标准的称为Ly+AML或My+ALL。 诊断标准 多才用积分法。 急性白血病免疫学 系列分型的积分方案 急性白血病免疫学 系列分型的积分方案 分数 B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 M/cCD22 M/cCD3 MPO CD41 CD42 血型蛋白A cCD79a M/cTCRα/β cCd13 CD61 RhD HbF cμ sIg M/cTCRγ/δ FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117 系统标志积分 系统标志积分苏医 B系 T系 髓系 2分 CD22+、 CD3+、 POX+ 1分 CD19+、 CD2+、 CD13+、CD33+、 CD10+ CD41+、CD61+ 0.5分 CD7+ CD14+、CD15+ 大于或等于2分为系列阳性 系统标志积分 系统标志积分Catovsky B系 T系 髓系 2分 CyCD22+ CyCD3+ MPO+ 1分 CD10+ CD19+ CD2+、CD5+ CyCD13+、CD33 0.5分 TdT+、 IgH TdT+、CD7+ CD11+、CD14+ CD15+, 大于或等于2分为系列阳性 系统标志积分 系统标志积分 EGI B系 T系 髓系 2分 CD79a+ CyCD3+、 抗MPO+ CyIgM+、 mCD3+、 CyCD22+ 抗TcR+、 1分 CD19+ CD2+、 CD13+、 CD10+、 CD5+、 CD33+、 CD20+ CD8+、 CDw65+ 0.5分 TdT+、CD24+、 TdT+、CD7+、 CD14+、CD15+、 CD64+、CD117 髓系大于或等于2分、淋系大于1分为系列阳性 系统标志积分 系统标志积分 307医院 B系 T系 髓系 2分 CD22+、μ链+、 CD3+、 MPO、CD13+、 CD20+ TCR+、 CD14+、CD33+、 CD19+ Auer小体、PPO 1分 CD10+、CD24+ CD2+、CD5+、 CD11b+、CD11c+、 CD15+、NSE、 CAE、SBB、t(8:21) t(15:17) 0.5分 TdT+、IgH+ CD7+ AML形态学 大于或等于2分为系列阳性 系统标志积分 系统标志积分山东医大 B系 T系 髓系 2分 CD22+、μ链+、 CD3+、 MPO、CD13+、 CD20+ 、SmIg CD14+、CD33+、 CD19+ Auer小体、PPO CD41、CD42、CD61 1分 CD10+、CD24+ CD2+、CD5+、 CD11b+、CD11c+、 IgL、L3形态学 CD15+、NSE、 CAE、SBB、 t(15:17)或PML/RARa t(8:21)或AML/ETO 形态学M2b、M3a、M6 0.5分 TdT+、IgH+ TCR+、CD3+ 其他AML形态学 两系或三系积分大于2分为HAL 系统标志积分 系统标志积分河北二院 B系 T系 髓系 2分 CD22+、μ链+、 CD3+、 MPO、CD13+、 CD33+、 CD20+ CD21+ CD28、 CD14+、CD41+、CD42+、 CD19+ SmIg Auer小体、PPO、inv(16) L3形态学 t(15:17)、t(8:21) M4Eo、M6、M2b、 M3形 态学、PML/RARa 1分 CD10+、CD24+ CD2+、CD5+、 CD11b+、CD11c+、 IgL、PAS PAS、CD56、 CD15+、NSE、 CD57 CAE、SBB、 0.5分 TdT+、IgH+ TCR+、CD7+ 其他AML形态学及细胞化学 两系积分大于2分为HAL 其他白血病的系列标志 其他白血病的系列标志多毛细胞白血病:CD11c+、CD19+、CD22+、CD25+、CD38+、CD20+、SmIg+、CD25-,变异型:CD25- 成人T淋白血病: CD2+、CD3+、CD4+、CD25+,CD8- 幼淋细胞白血病:CD19+、CD20+、CD22+、CD24+、SmIg+ 浆细胞白血病:DR-、CD19-、CD20-、CD38+、胞质Ig+、SmIg- MDS的免疫表型 MDS的免疫表型 1. CD34+7%↑(正常人为2.5%) RA2.8%,RAEB8.5%,RAEBT11.3% CD34+易转为白血病,预后差. 2. CD13+20%↑ (正常人11.7%) RA1.8%,RAEB24%,RAEBT253% 3.CD33+20.9%↑(正常人16.5%) RA18%,RAEB21%,RAEBT23% 4.CD15+30%↓(正常人45.5%) 5. CD3+27%,19%,11%↓(正常人35.5%)
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