人参养荣汤对血管性痴呆大鼠的神经保护作用

中医资料下载站 TCM999.5d6d.com 最全的中医资料库 · ７３· ５　施仲伟译．高血压诊疗指南．１９９９ 年世界卫生组织和国际高血压 联盟制订，１９９９，７． ６　Ｚａｃｈａｒｉａｈ ＰＫ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ ｌｉｆｅ ｏｎ ｎｉｔｒｅｎｄｉｐｉｎｅ ａｎｄ ｐｒｏｐ唱 ｒａｎｏｌｏｌ．Ｊ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９８８，１２（ Ｓｕｐｐ１．４） ：２９． ７　王琦．论辨证论治研究中存在的问题．安徽中医学院学报，１９９８， １７（２） ： ４ －６． ８　曲琰，贾天柱．栀制人参的 抗疲 劳 实验 研 究．中外 医疗，２００８，２７ （１２） ：１２０ －１２１． ９　阎小平，刘维佳，吕宝梁．回力宝口服液的药效学研究．山西中医， １９９７，１３（１） ：３８ －３９． １０　潘振字，汪旭明，壬照字，等．葛根素对 ｎ 半乳糖模型鼠记忆能力 及大脑皮质胆碱能系统的影响．中国老年学杂志，２００８，２８． （编辑：黄　杰） 人 参 养 荣 汤 对血 管 性 痴 呆 大 鼠 的神 经 保 护 作 用 １ １ ２ １ 刘　冰 ，赵桂芝 ，王永明 ，应栩华 ［摘要］　目的　初步探讨人参养荣汤对血管性痴呆的神经保护作用。 方法　采用永久性结扎双侧颈总动脉血管性痴呆大鼠 模型，从学习记忆、脑梗死面积、海马齿状回新生神经细胞和自由基损伤等方面初步考察人参养荣汤的神经保护作用。 结果 　与模型组比较，人参养荣汤组认知障碍明显改善，脑梗死面积明显降低，齿状回新生神经细胞明显增加，自由基损伤明显减 轻。 结论　人参养荣汤对血管性痴呆具有一定的神经保护作用，其内在机制值得深入探讨。 ［关键词］　血管性痴呆；人参养荣汤；神经保护；神经发生；认知障碍 ［中图分类号］　Ｒ２８５．５　　　　［文献标识码］　Ａ　　　　［文章编号］　１６８１唱２４７６（２０１０）０２唱００７３唱０３ 　　人参养荣汤首载于枟太平惠民和剂局方枠，有益 气补血、养心安神等功效。 本文观察人参养荣汤对 血管性痴呆大鼠认知障碍、神经发生和自由基损伤 等方面的影响，现报道如下。 1　材料与方法 1．1　实验动物　Ｗｉｓｔａｒ 雄性大鼠，体重 ２２０ ～２６０ｇ， 北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证编号 ＳＣＸＫ（京）２００２ －２００３。 1．2　模型复制、分组与给药　取大鼠 ３０ 只， １０％ 水合氯醛麻醉，分离双侧颈总动脉，双重丝线结扎后 随即剪断。 随机分为模型组和人参养荣汤组，２ 组 动物数基本相当。 另取大鼠 １５ 只，除不结扎动脉外 操作如前，设为假手术组。 术后次日，各组动物处置 如下：假手术组及模型组给予自来水 １ｍｌ，人参养荣 作者单位： １ ３１０００７　浙江杭州，浙江省中医药研究院中医临床研究 所） ２ ３０００７０　天津，天津医科大学公共卫生学院 汤组给予人参养荣汤 ５ｇ ／ｋｇ（相当于生药含量，本研 究所自煎），连续 ４ 周。 1．3　Ｍｏｒｒｉｓ 水迷宫　测试前先采用 Ｍｏｒｒｉｓ 水迷宫 （中国医学科学院药物研究所） 训练 ６ 天，以潜伏期 （从入水到找到平台所用时间）和游泳距离（从入水 到找到平台的总行程） 为测试成绩的指标，每天每 只大鼠在 ４ 个象限共训练 ４ 次，每次游泳时间为 ６０ｓ，第 ７ 天成绩记做测试成绩。 测试于实验结束前 １ 周进行。 1．4 　自由基损伤　末次给药后 ６ｈ，每组取 ６ 只大 鼠，断头，冰上分离海马，称重，以冷生理盐水制成匀 浆液（质量体积比 １：９），低温分离取上清，考马斯亮 兰法测定蛋白含量。 按说明书测定 ＭＤＡ、ＧＳＨ 含量 和 ＳＯＤ 活性。 1．5　神经发生　末次给药前 ２ 天，每组取 ３ 只大 鼠，以 ５０ｍｇ ／ｋｇ ＢｒｄＵ 腹腔注射 ２ 次，每次间隔 ８ｈ。 水合氯醛麻醉，４％多聚甲醛灌注，取脑，置于多聚甲 醛后固定过夜，２０％蔗糖沉底，选择齿状回部位冠状 位冰冻切片，脑片厚 ３０μｍ，置于磷酸盐缓冲液。 常 规免疫荧光染色（ａｎｔｉ －ＢｒｄＵ 稀释比 １：４００，ａｎｔｉ － ＮｅｕＮ 稀释比 １：５００）。 摄片并计算 ＢｒｄＵ ／ＮｅｕＮ 阳 性细胞数。 1．6　脑梗死范围　末次给药后 ６ｈ，每组取 ５ ～６ 只 大鼠，断头取脑，剔除嗅球、小脑和低位脑干。 将大 脑连续冠状切成 ５ 片。 用 １％ ＴＴＣ（ 氯化三苯基四 氮唑）染色，３７℃避光温孵 １５ｍｉｎ。 按切片顺序排列 并拍照，计算脑梗死面积。 1．7　统计学处理　所有描述性参数以均数 ± 差 示， 组 间 比 较 采 用 单 因 素 方 差 分 析。 用 2．3　人参养荣汤对神经发生的影响　造模后，大鼠 ＢｒｄＵ ／ＮｅｕＮ 阳性细胞数明显增加；在此基础上，给 药组大鼠阳性细胞数进一步显著增加（见图 １ ～３， 表 ３）。 表 3　人参养荣汤对神经发生的影响　（x珋±s） 组别 阳性细胞数 假手术组 ５３．０６ ±５．７８ 模型组 １３１．２５ ±７．９２△△ 人参养荣汤组 ２１６．４８ ±１４．５１倡倡 ＳＰＳＳ１３．０ 软件包进行分析，P ＜０．０５ 为差异有显著 性。 2　结果 　　注：与假手术组比较，△△ ＜０．０１ P ＜０．０１；与模型组比较，倡倡 P 2．1　人参养荣汤对认知障碍的影响　水迷宫测试 结果表明，造模后潜伏期和游泳距离均显著延长（P ＜０．０１ ）， 而 人 参 养 荣 汤 可 显 著 使 之 缩 短 （ P ＜ ０畅０５），提示其可明显改善血管性痴呆大鼠学习记 忆能力（见表 １）。 表 1　人参养荣汤对认知障碍的影响　（x珋±s） 2．4　人参养荣汤对脑梗死面积的影响　造模后，大 鼠脑梗死面积显著增加；给予人参养荣汤后，大鼠脑 梗死面积显著减少（见表 ４）。 表 4　人参养荣汤对脑梗死面积的影响　（x珋±s） 组别 脑梗死面积 假手术组 ０．００ ±０．００ 模型组 １１．７８ ±５．２１△△ 人参养荣汤组 ５．１９ ±２．８８倡倡 　　注：与假手术组比较，△△ P ＜０．０１；与模型组比较，倡 P ＜ ０．０５ 2．2　人参养荣汤对自由基损伤的影响　造模后，大 　　注：与假手术组比较，△△ ＜０．０１ 3　讨论 P ＜０．０１；与模型组比较，倡倡 P 鼠 ＭＤＡ 升高，ＳＯＤ、ＧＳＨ 降低；给予人参养荣汤后， 动物 ＭＤＡ、ＳＯＤ 和 ＧＳＨ 的不良变化均得以改善（见 表 ２）。 现阶段，缺血性脑血管病患者的临床治疗效果 往往难以令人满意，不断探索和寻找新的治疗途径 和治疗药物始终是当前国内外神经病学研究的重点 ［１ ～５］ 内容和社会急需解决的课题 。 缺血性脑损伤 表 2　人参养荣汤对自由基损伤的影响　（x珋±s） 组别 ＭＤＡ（ｎｍｏｌ ／ｍｇ） ＳＯＤ（ｕ ／ｍｇ） ＧＳＨ（ｍｇ ／ｇ） 假手术组 ３．１１ ±０．２０ ２４９．０５ ±１７．２４ ３２１．２４ ±２０．３０ 模型组 ４．８９ ±０．１７△△ １２１．３２ ±１０．３９△△ ２３７．０６ ±２７．４１△△ 人参养荣汤组 ３．６９ ±０．２２倡 １６３．０９ ±１４．１３倡 ２８６．３６ ±２９．８２倡 　　注：与假手术组比较，△△ P ＜０．０１；与模型组比较，倡 P ＜ ０．０５ 后，脑组织由于缺血、缺氧，细胞能量代谢出现障碍， 导致海马区局部激素水平、神经递质、神经营养因子 等浓度发生改变，进而导致包括海马齿状回神经发 生在内的多种神经生物学事件发生。 但由于新生神 经细胞数量有限，且持续存在的病理生理因素使得 大部分新生细胞难以与周围建立联系，最终导致迟 发性凋亡，影响神经功能重建。 因此，增强脑内源性 神经元更替能力成为治疗神经系统疾病的一个研究 ［６ ～９］ 热点 。 · ７５· 人参养荣汤有益气补血、养心安神等功效，现代 医学研究提示其具有抗氧化应激、抗衰老和拮抗脑 ［１０ ～１５］ Ｐａｔｈｏｌ，２００８，１７２（６） ：１５２０ －１５２８． ７　Ｓｉｖｉｌｉａ Ｓ，Ｇｉｕｌｉａｎｉ Ａ，Ｄｅｌ Ｖｅｃｃｈｉｏｇ，ｅｔ ａｌ．Ａｇｅ －ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｏｆ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｙｐｏｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．Ｎｅｕ唱 缺血再灌注等神经保护作用 呆的作用未见报道。 ，但其对血管性痴 ｒｏｐａｔｈｏｌ Ａｐｐｌ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ，２００８，３４（１） ：５２ －６１． ８　Ｅｓｎｅａｕｌｔ Ｅ，Ｐａｃａｒｙ Ｅ，Ｅｄｄｉ Ｄ，ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｕ唱 本文研究发现，人参养荣汤可明显改善其认知 功能障碍，显著激活神经发生，提示人参养荣汤对大 鼠血管性痴呆具有保护作用，值得深入探讨。 　　（本文图片见封三） ［参考文献］ １　王红梅，杨丽丽，白玉海，等．血管性痴呆的研究进展．齐齐哈尔医 学院学报，２００９，３０（１０） ：１２２６ －１２２８． ２　程海霞，张立平，胡坚莉，等．局灶性脑缺血后海马齿状回神经发 生及其与血管内皮生长因子关系的研究．中国组织化学与细胞化 学杂志，２００９，１８（２） ：１９２ －１９６． ３　赵焕东，高剑峰，吕风华．脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注海马齿 状回细胞增殖分化的影响及量效作用．河南中医，２００８，２８（１０） ： ３０ －３２． ４　Ｓｏｌｏｍｏｎ Ａ，Ｋｉｖｉｐｅｌｔｏ Ｍ，Ｗｏｌｏｚｉｎ Ｂ， ｅｔ ａｌ．Ｍｉｄｌｉｆｅ ｓｅｒｕｍ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｒｉｓｋ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ ａｎｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｅｍｅｎｔｉａ ｔｈｒｅｅ ｄｅｃａｄｅｓ ｌａｔｅｒ．Ｄｅｍｅｎｔｇｅｒｉａｔｒ Ｃｏｇｎ Ｄｉｓｏｒｄ，２００９，２８（１） ：７５ －８０． ５　Ｋａｌａｒｉａ ＲＮ，Ｍａｅｓｔｒｅｇ Ｅ，Ａｒｉｚａｇａ Ｒ，ｅｔ ａｌ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｖａｓ唱 ｃｕｌａｒ ｄｅｍｅｎｔｉａ ｉｎ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ： ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ， ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ， ａｎｄ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ．Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ，２００８，７（９） ：８１２ －８２６． ６　Ｅｒｍｉｎｉ ＦＶ，Ｇｒａｔｈｗｏｈｌ Ｓ，Ｒａｄｄｅ Ｒ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｃｅｒｅｂｒａｌ ａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓ ．Ａｍ Ｊ ｓｉｎｇ ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ ａｎｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ ｎｅｕｒｏｇｅｎｅ 唱 ｓｉｓ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｉｅｎｔ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｊ Ｃｅｒｅｂ Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ，２００８，２８（９） ：１５５２ －１５６３． ９　Ｌｅｅ ＳＲ，Ｋｉｍ ＨＹ，Ｒｏｇｏｗｓｋａ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏ唱 ｔｅｉｎａｓｅ ｉｎ ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔ ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｕｂｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｚｏｎｅ ａｆｔｅｒ ｓｔｒｏｋｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２００６，２６（１３） ：３４９１ －３４９５． １０　宋巧梅，唐方，谢肄聪．人参养荣汤对 Ｄ －半乳糖致衰老小鼠抗 氧化作用及脏 器 指 数 的 影 响．中 国 老 年 学 杂 志，２００３，２３ （ ６ ） ： ３８６ －３８７． １１　胡瑞，邓红，唐方．人参养荣汤对衰老小鼠脑神经元形态和密度 的影响．中医杂志，２００６，４７（１１） ：８５９ －８６０． １２　邓红，唐方．人参养荣汤对亚急性老化小鼠肝及脑组织线粒体膜 流动性保护作用的研究．中国中西医结合杂志，２００６，２６（ 基础理 论研究特辑） ：３０ －３３． １３　曹利民，胡志诚．人参养荣汤治疗老年性痴呆临床分析．实用中 医药杂志，２００８，２４（４） ：２０７． １４　王斌，王学美．天然药物防治阿尔茨海默病的实验研究进展．天 津中医药，２００９，２６（１） ：８４ －８６． １５　杨明会，李敏，窦永起，等．补肾活血法治疗帕金 森病 的 理论 探 讨．中国中医基础医学杂志，２００９，１５（１１） ：８１２ －８１４． （编辑：邓　锋） · 图书订购· 华夏时代医学图书服务部 华夏时代医学图书服务部是经国家新闻出版总署批准的正规的出版物经营单位，本部经营各种医学工 具书和音像制品，现拥有 ８ ０００ 多种医学专业图书，１ ０００ 余种医学音像产品和医学光盘。 本部与多家医学 出版社建立了良好的合作，使您在本部购书得到最优惠的待遇。 单次订单总金额超过一定限额，可获得订单总金额的百分比作为积分，每积 １ 分等同人民币 １ 元，可无 限制地在我部购买任何商品，收到书款后我们会以最快的速度将您所需书籍配全并邮寄送货。 详情请登录 本部网站或热线咨询获得。 优质的服务 ＋快速的工作效率 ＋我们真诚的心 ＝您的微笑 购书热线：０１０唱６２２６３８１１ 网 址： ｗｗｗ．ｅｂｏｏｋ．ｓｈｏｕｘｉ．ｎｅｔ Ｅ唱ｍａｉｌ： ｅｂｏｏｋ＠ｃｈｉｎａｍｅｄ．ｃｎ 组别� 潜伏期（ ｓ）� 游泳距离（ ｃｍ）� � 假手术组� １８．２８ ±４．９７� ５３５．６９ ±４２．７８� � 模型组� ３４．８１ ±８．３９△△� ８５６．１８ ±４９．３０△△� � 人参养荣汤组� ２３．９４ ±６．７３倡� ６２８．３９ ±３４．１１倡� � 中医资料下载站 请记住我们的域名：TCM999.5d6d.com